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10-beta E. coli 感受态细胞（高效级） |NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

E. coli 化学感受态细胞适用于多种应用中的高效转化。

重点

  • DH10B™ 衍生菌株
  • 可高效转化真核生物来源的甲基化 DNA，或来自 PCR、cDNA 和其它来源 [mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC)] 的非甲基化 DNA
  • 去除了非特异性核酸内切酶 I（endA1）的活性，以获得最高质量的质粒制备
  • 抗 T1 噬菌体（fhuA）
  • 适用于 b-半乳糖苷酶基因的 a-互补蓝白斑筛选（无 IPTG）
  • 减少克隆 DNA 的重组（recA1）
  • 可克隆大质粒和 BAC
  • 无动物来源
  • K12 菌株

基因型

Δ(ara-leu) 7697 araD139  fhuA ΔlacX74 galK16 galE15 e14-  ϕ80dlacZΔM15  recA1 relA1 endA1 nupG  rpsL (StrR) rph spoT1 Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)

产品类别:
Cloning Competent Cell Strains Products

应用:
USER® Cloning,
Applications of USER® and Thermolabile USER II Enzymes,
Site Directed Mutagenesis,

Site Directed Mutagenesis,
High-throughput cloning and automation solutions,

Transformation

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • C3019H     -80    
        NEB® 10-beta/Stable Outgrowth Medium B9035SVIAL 4 1 x 25 ml Not Applicable
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl
        NEB® 10-beta Competent E. coli (High Efficiency) C3019HVIAL -80 20 x 0.05 ml Not Applicable
    • C3019I     -80    
        NEB® 10-beta/Stable Outgrowth Medium B9035SVIAL 4 1 x 25 ml Not Applicable
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl
        NEB® 10-beta Competent E. coli (High Efficiency) C3019IVIAL -80 6 x 0.2 ml Not Applicable
    • C3019P     -80    
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl
        NEB® 10-beta/Stable Outgrowth Medium B9035SVIAL 4 1 x 25 ml Not Applicable
        NEB® 10-beta Competent E. coli (High Efficiency) C3019PVIAL -80 1 x 96-well plate
      (20 μl/well)       		Not Applicable

  • 特性和用法

    Antibiotic for Plasmid Selection

    用于质粒筛选的抗生素 使用浓度
    Ampicillin 100 µg/ml
    Carbenicillin 100 µg/ml
    Chloramphenicol 33 µg/ml
    Kanamycin 30 µg/ml
    Tetracycline 15 µg/ml

    货运单

    • Ships on dry ice

    抗生素耐药性

    • str

  • 优势和特性

    Features

    • 克隆大质粒和 BAC
    • DH10B™ 衍生菌株

    应用特性

    质粒大小对转化效率的影响：10-beta E. coli 感受态细胞（高效级） |
    化学法制备的 NEB 10-beta 感受态细胞（C3019H）比 NEB 5-alpha 细胞（C2987H）更适合于大质粒的转化。质粒越大，两种感受态细胞的转化效率的差值就越大。
    热激时间对 NEB 10-beta E. coli 感受态细胞转化效率的影响：10-beta E. coli 感受态细胞（高效级） |  10-beta E. coli 感受态细胞（高效级） |按照所提供的高效级转化操作流程，用 100 pg pUC19 对照 DNA 转化 50 μl 感受态细胞（C3019H），仅热激时间从 0 至 80 秒不等。
    DNA 温育时间对 NEB 10-beta E. coli 感受态细胞转化效率的影响：10-beta E. coli 感受态细胞（高效级） |
    按照所提供的高效级转化操作流程，用 100 pg pUC19 对照 DNA 转化 50 μl 感受态细胞（C3019H），仅 DNA 温育时间为 0 至 40 分钟不等。
    细胞复苏培养基对转化效率的影响：10-beta E. coli 感受态细胞（高效级） |
    按照所提供的高效级转化操作流程，用 100 pg pUC19 对照 DNA 转化 50 μl 感受态细胞（C3019H），仅使用的复苏培养基不同。NEB 10-beta/Stable Outgrowth 培养基的转化效率最高。
    NEB 10-beta（C3019H/I）高转化效率带来的巨大优势：10-beta E. coli 感受态细胞（高效级） |
    使用不同厂家的产品，按照所提供的产品说明书操作，比较转化效率。图中数值取自三次平行实验的平均值。

     

  • 相关产品

    单独销售的组分

    • NEB® 10-beta/Stable Outgrowth 培养基

  • 注意事项

    1. 贮存和处理：感受态细胞应在 -80℃ 条件下贮存。-20℃ 条件下贮存会显著降低转化效率。当细胞温度高于 -80℃ 时，即使不融化，细胞也会失去效率。
    2. 注意：本产品含危险物质 DMSO。处理前请先查看 MSDS。

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. High Efficiency Transformation Protocol using NEB 10-beta Competent E. coli (High Efficiency) (C3019H/C3019I)
    2. 5 Minute Transformation Protocol using NEB10-beta Competent E. coli  (C3019H/C3019I)
    3. High Efficiency Transformation Protocol with NEB 10-beta in 96-well Plate Format (NEB# C3019P)

  • 使用指南

    • Additional E. coli Strain Genotypes
    • Chemical Transformation Tips
    • Genetic Markers
    • McrA, McrBC and EcoKI Strain Phenotypes
    • Restriction of Foreign DNA by E. coli K-12

  • 应用实例

    • Enhancing Transformation Efficiency

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Characteristics of Select E.coli Strains
    • Competent Cell Product Comparison
    • Competent Cell Selection Guide

  • Web 工具

    • Competitor Cross-Reference Tool
    • NEBcloner®

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Which competent cell strains are compatible with Gateway® Cloning?
    2. What are the strain properties (C3019)?
    3. What is the difference between NEB #C3019H and NEB #C3019I?
    4. What is the shelf life for this strain (NEB #C3019H and NEB #C3019I)?
    5. Which strain of Competent E.coli should I use for general cloning?
    6. Does plasmid size affect transformation efficiency (C3019)?
    7. How should I calculate the transformation efficiency (C3019)?
    8. Can I store competent cells at -20°C instead of -80°C?
    9. What is the optimal heat shock time for this strain (NEB #C3019H and NEB #C3019I)?
    10. How long should I incubate cells on ice after DNA has been added (NEB #C3019H and NEB #C3019I)?
    11. Which kind of transformation tubes should be used?
    12. What volume of DNA can be added into competent cells?
    13. Are NEB’s competent cells compatible with the “Mix & Go” protocol?
    14. What type of competent cells are suitable for transformation of DNA constructs created using NEBuilder HiFi DNA Assembly Master Mix?
    15. Why did Synthetic Biologist Chris Voigt of MIT choose NEB 10-beta for DNA assembly and cloning?
    16. How should I store the NEB 10-beta/Stable Outgrowth Medium?
    17. How should fragments be prepared for assembly using NEBuilder HiFi?
    18. Can the 96-well plate format of NEB 10-beta Competent E.coli, NEB #C3019P, be separated into smaller sections?
    19. How does the transformation efficiency of the 96-well plate format (NEB #C3019P) compare to the other formats?

5-alpha E. coli 感受态细胞（高效级）| DH5α |NEB酶试剂 New England Biolabs

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上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

E. coli 化学感受态细胞适用于多种应用中的高效转化。提供 5 种方便的包装类型：

  • 一次性使用 50 μl/管
  • 200 μl/管
  • 96 孔板
  • 384 孔板
  • 12 x 8 联管：以 12 x 8 联管微孔板集束管包装（Costar™ Cluster Tube System）

 

5-alpha E. coli 感受态细胞（高效级）| DH5α |

5-alpha E. coli 感受态细胞（高效级）| DH5α |

针对 C2987H、C2987I、C2987P 和 C2987U 提供 SOC Outgrowth 培养基。
针对 C2987R 提供 Outgrowth 培养基 1.5。

重点

  • DH5α™ 衍生菌株
  • 无动物来源
  • 可高效转化 PCR、cDNA 或其它来源的非甲基化 DNA（hsdR）
  • 去除了非特异性核酸内切酶 I（endA1）的活性，以获得最高质量的质粒制备
  • 抗 T1 噬菌体（fhuA2）
  • 适用于蓝白斑筛选，通过 β-半乳糖苷酶基因的 α-互补实现
  • 减少克隆 DNA 的重组（recA1）
  • K12 菌株

基因型

fhuA2Δ(argF-lacZ)U169 phoA glnV44 Φ80Δ(lacZ)M15 gyrA96 recA1 relA1 endA1 thi-1 hsdR17

产品类别:
Cloning Competent Cell Strains Products

应用:
USER® Cloning,
Applications of USER® and Thermolabile USER II Enzymes,
High-throughput cloning and automation solutions,

Transformation

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • C2987H     -80    
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl
        SOC Outgrowth Medium B9020SVIAL 4 1 x 25 ml Not Applicable
        NEB® 5-alpha Competent E. coli (High Efficiency) C2987HVIAL -80 20 x 0.05 ml Not Applicable
    • C2987I     -80    
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl
        SOC Outgrowth Medium B9020SVIAL 4 1 x 25 ml Not Applicable
        NEB® 5-alpha Competent E. coli (High Efficiency) C2987IVIAL -80 6 x 0.2 ml Not Applicable
    • C2987P     -80    
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl
        SOC Outgrowth Medium B9020SVIAL 4 1 x 25 ml Not Applicable
        NEB® 5-alpha Competent E. coli (High Efficiency) C2987PVIAL -80 1 x 96-well plate
      (20 μl/well)       		Not Applicable
    • C2987R     -80    
        NEB® 5-alpha Competent E. coli (High Efficiency) C2987RVIAL -80 1 x 384-well plate
      (10 μl/well)       		Not Applicable
        Outgrowth Medium 1.5 B9040AVIAL 4 1 x 10 ml Not Applicable
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl
    • C2987U     -80    
        SOC Outgrowth Medium B9020SVIAL 4 2 x 25 ml Not Applicable
        NEB® 5-alpha Competent E. coli (High Efficiency) C2987UVIAL -80 1 x 96 x 0.05 ml
      (12 8-well strip)       		Not Applicable
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl

  • 特性和用法

    Antibiotic for Plasmid Selection

    用于质粒筛选的抗生素 使用浓度
    Ampicillin 100 µg/ml
    Carbenicillin 100 µg/ml
    Chloramphenicol 33 µg/ml
    Kanamycin 30 µg/ml
    Streptomycin 25 µg/ml
    Tetracycline 15 µg/ml

    货运单

    • Ships on dry ice

    抗生素耐药性

    • 无

  • 优势和特性

    Features

    • 通用克隆菌株
    • DH5α™ 衍生菌株

    应用特性

    DNA 对转化效率和菌落产量的影响： 5-alpha E. coli 感受态细胞（高效级）| DH5α |
    在转化反应中使用的最佳 DNA 量比通常认为的要低。使用纯化后的超螺旋 pUC19，在 100 pg-1 ng 范围内转化效率最高。但是，随着 DNA 用量增加到 100 ng，单次转化反应得到菌落总数会随之增加。
    热激时间对 NEB 5-alpha E.coli 感受态细胞转化效率的影响：5-alpha E. coli 感受态细胞（高效级）| DH5α |
    按照所提供的高效级转化操作流程，用 100 pg pUC19 对照 DNA 转化 50 μl 感受态细胞，热激时间的变化范围为 0 至 80 秒。
    DNA 温育时间对 NEB 5-alpha E. coli 感受态细胞转化效率的影响：5-alpha E. coli 感受态细胞（高效级）| DH5α |
    按照所提供的高效级转化操作流程，用 100 pg pUC19 对照 DNA 转化 50 μl 感受态细胞，DNA 温育时间的变化范围为 0 至 40 分钟。
    细胞复苏培养基对转化效率的影响：5-alpha E. coli 感受态细胞（高效级）| DH5α |
    按照所提供的高效级转化操作流程，用 100 pg pUC19 对照 DNA 转化 50 μl NEB 5-alpha E.coli 感受态细胞，不同反应之间使用的复苏培养基不同。NEB SOC Outgrowth 培养基的转化效率最高。
    从 NEB 5-alpha 的高转化效率中获益：5-alpha E. coli 感受态细胞（高效级）| DH5α |
    比较 NEB 5-alpha 与 DH5α 的转化效率，按照生产厂家推荐的操作说明进行操作。图中数值取自三次平行实验的平均值。

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    • NEB® 5-alpha E. coli 感受态细胞（亚克隆效级）
    • NEB® 5-alpha F’ Iq E. coli 感受态细胞（高效级）
    • t1010-monarch-plasmid-miniprep-kit
    • Monarch® DNA 胶回收试剂盒
    • Monarch® PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）

    单独销售的组分

    • SOC Outgrowth 培养基

  • 注意事项

    1. 针对 C2987H、C2987I、C2987P 和 C2987U 提供 SOC Outgrowth 培养基。
      针对 C2987R 提供 Outgrowth 培养基 1.5。
    2. 注意：本产品含危险物质 DMSO。处理前请先查看 MSDS。
    3. 贮存和处理：
      感受态细胞应在 -80℃ 条件下贮存。-20℃ 条件下贮存会显著降低转化效率。当细胞温度高于 -80℃ 时，即使不融化，细胞也会失去效率。

      SOC 培养基可以在 4℃ 或室温下贮存，具体视使用速度而定。在室温下贮存方便，适合短期内使用贮存（数周到数月）。如需长期贮存，我们建议在 4℃ 条件下贮存。请注意，随 C2987R（1 x 384 孔板包装）提供的 Outgrowth 培养基 1.5 只能在室温下贮存，否则会形成晶体。

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. 5 Minute Transformation Protocol (C2987H/C2987I)
    2. High Efficiency Transformation Protocol (C2987H/C2987I)
    3. High Efficiency Transformation Protocol for 96-well format (C2987P)
    4. 14 Minute Transformation Protocol (C2987H/C2987I)
    5. High Efficiency Transformation Protocol for 96-tube format (C2987U)
    6. High Efficiency Transformation Protocol for 384-well format (C2987R)

  • 使用指南

    • Additional E. coli Strain Genotypes
    • Chemical Transformation Tips
    • Competent E. coli Genome Sequences Tool
    • Genetic Markers
    • McrA, McrBC and EcoKI Strain Phenotypes
    • Restriction of Foreign DNA by E. coli K-12

  • 应用实例

    • Enhancing Transformation Efficiency

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Characteristics of Select E.coli Strains
    • Competent Cell Product Comparison
    • Competent Cell Selection Guide

  • Web 工具

    • Competitor Cross-Reference Tool
    • NEBcloner®

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Which competent cell strains are compatible with Gateway® Cloning?
    2. Can I store competent cells at -20°C instead of -80°C?
    3. How can I increase transformation efficiency?
    4. How long should I incubate cells on ice after DNA has been added (NEB #C2987H and NEB #C2987I)?
    5. How should I calculate the transformation efficiency (C2987)?
    6. What are the solutions/recipes (C2987)?
    7. What are the strain properties (C2987)?
    8. What is the difference between NEB #C2987H and NEB #C2987I?
    9. What is the difference between NEB #C2988J and NEB #C2987H?
    10. What is the optimal heat shock time for this strain (NEB #C2987H and NEB #C2987I)?
    11. What type of competent cells are suitable for transformation of DNA constructs created using Gibson Assembly?
    12. Which strain of Competent E.coli should I use for general cloning?
    13. Which kind of transformation tubes should be used?
    14. What volume of DNA can be added into competent cells?
    15. Are NEB’s competent cells compatible with the “Mix & Go” protocol?
    16. What is the shelf life for this strain (NEB #C2987H and NEB #C2987I)?
    17. How does the transformation efficiency of the 96-well plate format (NEB #C2987P) compare to the other formats?
    18. What is the optimal heat shock time for the 96-well plate format NEB 5-alpha Competent E.coli (NEB #C2987P)?
    19. I am competing in the iGEM competition. Do you have any products that I should consider from NEB?
    20. What is the optimal heat shock time for the 384-well plate format NEB 5-alpha Competent E. coli (NEB #C2987R)?
    21. What is the optimal heat shock time for the 96-tube format NEB 5-alpha Competent E. coli (NEB #C2987U)?
    22. What type of competent cells are suitable for transformation of DNA constructs created using NEBuilder HiFi DNA Assembly Master Mix?
    23. How should I store SOC Outgrowth Medium? The SOC I received with my competent cells recommends storage at either room temperature or 4°C, however, when I purchase it as a stand alone product, it recommends storing it at 4°C. Which is better?
    24. How should fragments be prepared for assembly using NEBuilder HiFi?

5-alpha E. coli 感受态细胞（亚克隆效级） |NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

适用于亚克隆效级转化的 E. coli 化学感受态细胞， 如质粒转化或常规亚克隆 （例如将 1 kb 的片段插入 2 kb 的载体中）。对大多数其它克隆实验而言， 这些细胞的转化效率还不够高。 对于这些实验，我们推荐使用 NEB® 5-alpha E. coli 感受态细胞（高效级）（NEB #C2987）， 其转化效率高出 1,000 倍。

重点

  • 去除了非特异性核酸内切酶 I（endA1）的活性，以获得最高质量的质粒制备
  • 可高效转化 PCR、cDNA 或其它来源的非甲基化 DNA（hsdR）
  • 减少克隆 DNA 的重组（recA1）
  • 抗 T1 噬菌体（fhuA2）
  • 适用于蓝白斑筛选，通过 β-半乳糖苷酶基因的 α-互补实现
  • K12 菌株
  • DH5α™ 衍生菌株
  • 无动物来源

基因型

fhuA2Δ(argF-lacZ)U169 phoA glnV44 Φ80Δ(lacZ)M15 gyrA96 recA1 relA1 endA1 thi-1 hsdR17

产品类别:
Cloning Competent Cell Strains Products

应用:
Transformation

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • C2988J     -80    
        NEB® 5-alpha Competent E. coli (Subcloning Efficiency) C2988JVIAL -80 6 x 0.4 ml Not Applicable

  • 特性和用法

    Antibiotic for Plasmid Selection

    用于质粒筛选的抗生素 使用浓度
    Ampicillin 100 µg/ml
    Carbenicillin 100 µg/ml
    Chloramphenicol 33 µg/ml
    Kanamycin 30 µg/ml
    Streptomycin 25 µg/ml
    Tetracycline 15 µg/ml

    货运单

    • Ships on dry ice

  • 优势和特性

    Features

    转化操作流程的优化
    解冻：细胞最好在冰上解冻，并在试管中最后一点冰消失后立即加入 DNA。细胞也可以用手解冻，但温度超过 0℃ 会降低转化效率。

    将细胞与 DNA 置于冰上温育：为达到最高转化效率，应将细胞和 DNA 放在冰上一起温育 30 分钟。该步骤每缩短 10 分钟，转化效率预计降低一半。

    热激：热激步骤的温度和时间都很重要，并且与转化体积和器皿息息相关。使用随附的转化管，在 42℃ 条件下热激 30 秒为最佳。

    生长复苏：在 37℃ 条件下培养 1 小时，最有利于细胞复苏和抗生素耐药性的表达。该步骤每缩短 15 分钟，转化效率预计降低一半。SOC 培养基的转化效率是 LB 培养基的 2 倍；与不进行摇动的温育相比，温育时摇动或旋转试管可让转化效率提高 1 倍。

    涂板：使用温热或冷、湿润或干燥的筛选平板，不会显著影响转化效率。不过，温热且干燥的筛选板更便于涂板，并且能够最快地形成菌落。

    应用特性

    DNA 纯度对转化效率和菌落产量的影响：5-alpha E. coli 感受态细胞（亚克隆效级） |
    用小提质粒 DNA 对 NEB 5-alpha E.coli 感受态细胞（亚克隆效级）进行转化，单次反应得到的菌落总数并未显著减少。使用 10 ng-1,000 ng 纯化后的超螺旋 pUC19 或通过市售小提试剂盒纯化的 pUC19 转化时，菌落总数随 DNA 浓度的增加而增加。
    5-alpha E. coli 感受态细胞（亚克隆效级） |
    *理想情况下，用于转化的 DNA 应进行纯化并重悬于水或 TE 中。然而，最多只能使用10 µl 的连接混合液 DNA 直接转化感受态细胞，而转化效率也将降低为原来的一半。当需要最大限度地增加总转化子数量时，应进行一步纯化，可以是离心柱纯化（NEB #T1030），或使用酚/氯仿抽提和乙醇沉淀。
    热激时间对 NEB 5-alpha E.coli 感受态细胞转化效率的影响：5-alpha E. coli 感受态细胞（亚克隆效级） |
    按照所提供的高效级转化操作流程，用 100 pg pUC19 对照 DNA 转化 50 μl 感受态细胞，热激时间的变化范围为 0 至 80 秒。
    DNA 温育时间对 NEB 5-alpha E. coli 感受态细胞转化效率的影响：5-alpha E. coli 感受态细胞（亚克隆效级） |
    按照所提供的高效级转化操作流程，用 100 pg pUC19 对照 DNA 转化 50 μl 感受态细胞，DNA 温育时间的变化范围为 0 至 40 分钟。
    细胞复苏培养基对转化效率的影响：5-alpha E. coli 感受态细胞（亚克隆效级） |
    按照所提供的高效级转化操作流程，用 100 pg pUC19 对照 DNA 转化 50 μl NEB 5-alpha E.coli 感受态细胞，不同反应之间使用的复苏培养基不同。NEB SOC Outgrowth 培养基的转化效率最高。

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    • t1010-monarch-plasmid-miniprep-kit
    • Monarch® DNA 胶回收试剂盒
    • Monarch® PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）

    单独销售的组分

    • SOC Outgrowth 培养基

  • 注意事项

    1. NEB 5-alpha E. coli 感受态细胞（亚克隆效级）不随附 SOC Outgrowth 培养基或 pUC19 对照 DNA 。

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. 5 Minute Transformation Protocol (C2988)
    2. Subcloning Competent E.coli Transformation Protocol (C2988)

  • 使用指南

    • Additional E. coli Strain Genotypes
    • Chemical Transformation Tips
    • Genetic Markers
    • McrA, McrBC and EcoKI Strain Phenotypes

  • 应用实例

    • Enhancing Transformation Efficiency

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Characteristics of Select E.coli Strains
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FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Can LB medium be used instead of SOC in the outgrowth step (C2988)?
    2. Can NEB 5-alpha competent E.coli (Subcloning Efficiency) (NEB #C2988J) be used for large fragment cloning?
    3. What is the difference between NEB #C2988J and NEB #C2987H?
    4. What is the optimal heat shock time for this strain (NEB #C2988J)?
    5. How long should I incubate cells on ice after DNA has been added (NEB #C2988J)?
    6. How should I calculate the transformation efficiency of NEB 5-alpha Competent E. coli (Subcloning Efficiency)?
    7. What are the solutions/recipes that I need for transforming NEB 5-alpha Competent E. coli (Subcloning Efficiency)?
    8. What are the strain properties of NEB 5-alpha Competent E. coli (Subcloning Efficiency)?
    9. Can I store competent cells at -20°C instead of -80°C?
    10. Which kind of transformation tubes should be used?
    11. What volume of DNA can be added into competent cells?
    12. What is the shelf life for this strain (NEB #C2988J)?
    13. Are NEB’s competent cells compatible with the “Mix & Go” protocol?
    14. How should fragments be prepared for assembly using NEBuilder HiFi?

5-alpha F’ Iq E. coli 感受态细胞（高效级） |NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

E. coli 化学感受态细胞适用于多种应用中的高效转化。

重点

  • DH5α™ 衍生菌株
  • 无动物来源
  • 可高效转化 PCR、cDNA 或其它来源的非甲基化 DNA（hsdR）
  • 通过 laclq 严格控制表达，从而能够克隆潜在的毒性基因
  • 去除了非特异性核酸内切酶 I（endA1）的活性，以获得最高质量的质粒制备
  • 抗 T1 噬菌体（fhuA2）
  • 适用于蓝白斑筛选，通过 β-半乳糖苷酶基因的 α-互补实现
  • F’ 让细胞能够被噬菌体 M13 感染产生单链 DNA
  • 减少克隆 DNA 的重组（recA1）
  • K12 菌株

基因型

F´ proA+B+ lacIq ∆(lacZ)M15 zzf::Tn10 (TetR) / fhuA2∆(argF-lacZ)U169 phoA glnV44 Φ80Δ(lacZ)M15 gyrA96 recA1 relA1 endA1 thi-1 hsdR17

产品类别:
Cloning Competent Cell Strains Products

应用:
High-throughput cloning and automation solutions,
Transformation

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • C2992H     -80    
        SOC Outgrowth Medium B9020SVIAL 4 1 x 25 ml Not Applicable
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl
        NEB® 5-alpha F'Iq Competent E. coli (High Efficiency) C2992HVIAL -80 20 x 0.05 ml Not Applicable
    • C2992I     -80    
        SOC Outgrowth Medium B9020SVIAL 4 1 x 25 ml Not Applicable
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl
        NEB® 5-alpha F'Iq Competent E. coli (High Efficiency) C2992IVIAL -80 6 x 0.2 ml Not Applicable

  • 特性和用法

    Antibiotic for Plasmid Selection

    用于质粒筛选的抗生素 使用浓度
    Ampicillin 100 µg/ml
    Carbenicillin 100 µg/ml
    Chloramphenicol 33 µg/ml
    Kanamycin 30 µg/ml
    Streptomycin 25 µg/ml

    货运单

    • Ships on dry ice

    抗生素耐药性

    • 四环素

  • 优势和特性

    Features

    • 克隆毒性基因
    • 含 F´ 因子的菌株，具有极高的转化效率

    应用特性

    DNA 对转化效率和菌落产量的影响：

    5-alpha F’ Iq E. coli 感受态细胞（高效级） |

    在转化反应中使用的最佳 DNA 量比通常认为的要低。使用纯化后的超螺旋 pUC19，在 100 pg-1 ng 范围内转化效率最高。但是，随着 DNA 用量增加到 100 ng，单次转化反应得到菌落总数会随之增加。
    热激时间对 NEB 5-alpha F´Iq E.coli 感受态细胞转化效率的影响：

    5-alpha F’ Iq E. coli 感受态细胞（高效级） |

    按照所提供的高效级转化操作流程，用 100 pg pUC19 对照 DNA 转化 50 μl 感受态细胞，热激时间的变化范围为 0 至 80 秒。
    DNA 温育时间对 NEB 5-alpha F´Iq E. coli 感受态细胞转化效率的影响：

    5-alpha F’ Iq E. coli 感受态细胞（高效级） |

    按照所提供的高效级转化操作流程，用 100 pg pUC19 对照 DNA 转化 50 μl 感受态细胞，DNA 温育时间的变化范围为 0 至 40 分钟。
    细胞复苏培养基对转化效率的影响：

    5-alpha F’ Iq E. coli 感受态细胞（高效级） |

    按照所提供的高效级转化方案，用 100 pg pUC19 对照 DNA 转化 50 μl NEB 5-alpha F´Iq E.coli 感受态细胞，仅使用的复苏培养基不同。NEB SOC Outgrowth 培养基的转化效率最高。

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    单独销售的组分

    • SOC Outgrowth 培养基

  • 注意事项

    1. 注意：本产品含危险物质 DMSO。处理前请先查看 MSDS。
    2. 贮存和处理：感受态细胞应在 -80℃ 条件下贮存。-20℃ 条件下贮存会显著降低转化效率。当细胞温度高于 -80℃ 时，即使不融化，细胞也会失去效率。

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. 5 Minute Transformation Protocol (C2992)
    2. High Efficiency Transformation Protocol (C2992)

  • 使用指南

    • Additional E. coli Strain Genotypes
    • Chemical Transformation Tips
    • Competent E. coli Genome Sequences Tool
    • Genetic Markers
    • McrA, McrBC and EcoKI Strain Phenotypes
    • Restriction of Foreign DNA by E. coli K-12

  • 应用实例

    • Enhancing Transformation Efficiency

工具 & 资源

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FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Which competent cell strains are compatible with Gateway® Cloning?
    2. Does plasmid size affect transformation efficiency (C2992)?
    3. How long should I incubate cells on ice after DNA has been added (NEB #C2992H and NEB #C2992I)?
    4. How should I calculate the transformation efficiency (C2992)?
    5. What are the solutions/recipes (C2992)?
    6. What are the strain properties (C2992)?
    7. What is the difference between NEB #C2992H and NEB #C2992I?
    8. What is the optimal heat shock time for this strain (NEB #C2992H and NEB #C2992I)?
    9. Which strain of Competent E.coli should I use for general cloning?
    10. Can I store competent cells at -20°C instead of -80°C?
    11. Which kind of transformation tubes should be used?
    12. What volume of DNA can be added into competent cells?
    13. What is the shelf life for this strain (NEB #C2992H and NEB #C2992I)?
    14. Are NEB’s competent cells compatible with the “Mix & Go” protocol?
    15. How should I store SOC Outgrowth Medium? The SOC I received with my competent cells recommends storage at either room temperature or 4°C, however, when I purchase it as a stand alone product, it recommends storing it at 4°C. Which is better?
    16. How should fragments be prepared for assembly using NEBuilder HiFi?