5-alpha E. coli 感受态细胞（高效级）| DH5α |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

E. coli 化学感受态细胞适用于多种应用中的高效转化。提供 5 种方便的包装类型：

  • 一次性使用 50 μl/管
  • 200 μl/管
  • 96 孔板
  • 384 孔板
  • 12 x 8 联管：以 12 x 8 联管微孔板集束管包装（Costar™ Cluster Tube System）

 

5-alpha E. coli 感受态细胞（高效级）| DH5α |

5-alpha E. coli 感受态细胞（高效级）| DH5α |

针对 C2987H、C2987I、C2987P 和 C2987U 提供 SOC Outgrowth 培养基。
针对 C2987R 提供 Outgrowth 培养基 1.5。

重点

  • DH5α™ 衍生菌株
  • 无动物来源
  • 可高效转化 PCR、cDNA 或其它来源的非甲基化 DNA（hsdR）
  • 去除了非特异性核酸内切酶 I（endA1）的活性，以获得最高质量的质粒制备
  • 抗 T1 噬菌体（fhuA2）
  • 适用于蓝白斑筛选，通过 β-半乳糖苷酶基因的 α-互补实现
  • 减少克隆 DNA 的重组（recA1）
  • K12 菌株

基因型

fhuA2Δ(argF-lacZ)U169 phoA glnV44 Φ80Δ(lacZ)M15 gyrA96 recA1 relA1 endA1 thi-1 hsdR17

产品类别:
Cloning Competent Cell Strains Products

应用:
USER® Cloning,
Applications of USER® and Thermolabile USER II Enzymes,
High-throughput cloning and automation solutions,

Transformation

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • C2987H     -80    
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl
        SOC Outgrowth Medium B9020SVIAL 4 1 x 25 ml Not Applicable
        NEB® 5-alpha Competent E. coli (High Efficiency) C2987HVIAL -80 20 x 0.05 ml Not Applicable
    • C2987I     -80    
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl
        SOC Outgrowth Medium B9020SVIAL 4 1 x 25 ml Not Applicable
        NEB® 5-alpha Competent E. coli (High Efficiency) C2987IVIAL -80 6 x 0.2 ml Not Applicable
    • C2987P     -80    
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl
        SOC Outgrowth Medium B9020SVIAL 4 1 x 25 ml Not Applicable
        NEB® 5-alpha Competent E. coli (High Efficiency) C2987PVIAL -80 1 x 96-well plate
      (20 μl/well)       		Not Applicable
    • C2987R     -80    
        NEB® 5-alpha Competent E. coli (High Efficiency) C2987RVIAL -80 1 x 384-well plate
      (10 μl/well)       		Not Applicable
        Outgrowth Medium 1.5 B9040AVIAL 4 1 x 10 ml Not Applicable
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl
    • C2987U     -80    
        SOC Outgrowth Medium B9020SVIAL 4 2 x 25 ml Not Applicable
        NEB® 5-alpha Competent E. coli (High Efficiency) C2987UVIAL -80 1 x 96 x 0.05 ml
      (12 8-well strip)       		Not Applicable
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl

  • 特性和用法

    Antibiotic for Plasmid Selection

    用于质粒筛选的抗生素 使用浓度
    Ampicillin 100 µg/ml
    Carbenicillin 100 µg/ml
    Chloramphenicol 33 µg/ml
    Kanamycin 30 µg/ml
    Streptomycin 25 µg/ml
    Tetracycline 15 µg/ml

    货运单

    • Ships on dry ice

    抗生素耐药性

    • 无

  • 优势和特性

    Features

    • 通用克隆菌株
    • DH5α™ 衍生菌株

    应用特性

    DNA 对转化效率和菌落产量的影响： 5-alpha E. coli 感受态细胞（高效级）| DH5α |
    在转化反应中使用的最佳 DNA 量比通常认为的要低。使用纯化后的超螺旋 pUC19，在 100 pg-1 ng 范围内转化效率最高。但是，随着 DNA 用量增加到 100 ng，单次转化反应得到菌落总数会随之增加。
    热激时间对 NEB 5-alpha E.coli 感受态细胞转化效率的影响：5-alpha E. coli 感受态细胞（高效级）| DH5α |
    按照所提供的高效级转化操作流程，用 100 pg pUC19 对照 DNA 转化 50 μl 感受态细胞，热激时间的变化范围为 0 至 80 秒。
    DNA 温育时间对 NEB 5-alpha E. coli 感受态细胞转化效率的影响：5-alpha E. coli 感受态细胞（高效级）| DH5α |
    按照所提供的高效级转化操作流程，用 100 pg pUC19 对照 DNA 转化 50 μl 感受态细胞，DNA 温育时间的变化范围为 0 至 40 分钟。
    细胞复苏培养基对转化效率的影响：5-alpha E. coli 感受态细胞（高效级）| DH5α |
    按照所提供的高效级转化操作流程，用 100 pg pUC19 对照 DNA 转化 50 μl NEB 5-alpha E.coli 感受态细胞，不同反应之间使用的复苏培养基不同。NEB SOC Outgrowth 培养基的转化效率最高。
    从 NEB 5-alpha 的高转化效率中获益：5-alpha E. coli 感受态细胞（高效级）| DH5α |
    比较 NEB 5-alpha 与 DH5α 的转化效率，按照生产厂家推荐的操作说明进行操作。图中数值取自三次平行实验的平均值。

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    单独销售的组分

    • SOC Outgrowth 培养基

  • 注意事项

    1. 针对 C2987H、C2987I、C2987P 和 C2987U 提供 SOC Outgrowth 培养基。
      针对 C2987R 提供 Outgrowth 培养基 1.5。
    2. 注意：本产品含危险物质 DMSO。处理前请先查看 MSDS。
    3. 贮存和处理：
      感受态细胞应在 -80℃ 条件下贮存。-20℃ 条件下贮存会显著降低转化效率。当细胞温度高于 -80℃ 时，即使不融化，细胞也会失去效率。

      SOC 培养基可以在 4℃ 或室温下贮存，具体视使用速度而定。在室温下贮存方便，适合短期内使用贮存（数周到数月）。如需长期贮存，我们建议在 4℃ 条件下贮存。请注意，随 C2987R（1 x 384 孔板包装）提供的 Outgrowth 培养基 1.5 只能在室温下贮存，否则会形成晶体。

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. 5 Minute Transformation Protocol (C2987H/C2987I)
    2. High Efficiency Transformation Protocol (C2987H/C2987I)
    3. High Efficiency Transformation Protocol for 96-well format (C2987P)
    4. 14 Minute Transformation Protocol (C2987H/C2987I)
    5. High Efficiency Transformation Protocol for 96-tube format (C2987U)
    6. High Efficiency Transformation Protocol for 384-well format (C2987R)

  • 使用指南

    • Additional E. coli Strain Genotypes
    • Chemical Transformation Tips
    • Competent E. coli Genome Sequences Tool
    • Genetic Markers
    • McrA, McrBC and EcoKI Strain Phenotypes
    • Restriction of Foreign DNA by E. coli K-12

  • 应用实例

    • Enhancing Transformation Efficiency

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Characteristics of Select E.coli Strains
    • Competent Cell Product Comparison
    • Competent Cell Selection Guide

  • Web 工具

    • Competitor Cross-Reference Tool
    • NEBcloner®

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Which competent cell strains are compatible with Gateway® Cloning?
    2. Can I store competent cells at -20°C instead of -80°C?
    3. How can I increase transformation efficiency?
    4. How long should I incubate cells on ice after DNA has been added (NEB #C2987H and NEB #C2987I)?
    5. How should I calculate the transformation efficiency (C2987)?
    6. What are the solutions/recipes (C2987)?
    7. What are the strain properties (C2987)?
    8. What is the difference between NEB #C2987H and NEB #C2987I?
    9. What is the difference between NEB #C2988J and NEB #C2987H?
    10. What is the optimal heat shock time for this strain (NEB #C2987H and NEB #C2987I)?
    11. What type of competent cells are suitable for transformation of DNA constructs created using Gibson Assembly?
    12. Which strain of Competent E.coli should I use for general cloning?
    13. Which kind of transformation tubes should be used?
    14. What volume of DNA can be added into competent cells?
    15. Are NEB’s competent cells compatible with the “Mix & Go” protocol?
    16. What is the shelf life for this strain (NEB #C2987H and NEB #C2987I)?
    17. How does the transformation efficiency of the 96-well plate format (NEB #C2987P) compare to the other formats?
    18. What is the optimal heat shock time for the 96-well plate format NEB 5-alpha Competent E.coli (NEB #C2987P)?
    19. I am competing in the iGEM competition. Do you have any products that I should consider from NEB?
    20. What is the optimal heat shock time for the 384-well plate format NEB 5-alpha Competent E. coli (NEB #C2987R)?
    21. What is the optimal heat shock time for the 96-tube format NEB 5-alpha Competent E. coli (NEB #C2987U)?
    22. What type of competent cells are suitable for transformation of DNA constructs created using NEBuilder HiFi DNA Assembly Master Mix?
    23. How should I store SOC Outgrowth Medium? The SOC I received with my competent cells recommends storage at either room temperature or 4°C, however, when I purchase it as a stand alone product, it recommends storing it at 4°C. Which is better?
    24. How should fragments be prepared for assembly using NEBuilder HiFi?