产品信息

• 产品组分信息

  本产品提供以下试剂或组分：

  NEB #	名称	组分货号	储存温度	数量	浓度
  M0294S     -20       Tth Endonuclease IV M0294SVIAL -20 1 x 0.05 ml 10,000 units/ml   ThermoPol® Reaction Buffer B9004SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X

• 特性和用法

  单位定义

  1 单位指在 10 μl 反应体系中，65℃ 条件下，1 小时能切割 1 pmol 含一个 AP 位点* 的 60 bp 寡核苷酸双链所需的酶量。

  * AP 位点创建方法：37℃ 条件下，用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）处理 10 pmol 含一个尿嘧啶碱基的 60 bp 寡核苷酸双链 2 分钟。

  反应条件

  1X ThermoPol^® 反应缓冲液套装
  Incubate at 65°C

  1X ThermoPol^® 反应缓冲液套装
  20 mM Tris-HCl
  10 mM (NH₄)₂SO₄
  10 mM KCl
  2 mM MgSO₄
  0.1% Triton® X-100
  (pH 8.8 @ 25°C)

  使用浓度

  10,000 units/ml

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  100 mM KCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  50% Glycerol
  0.1% Triton® X-100
  pH 7.4 @ 25°C

  热失活

  否

  单位活性检测条件

  10 μl 总反应体系，含 1X ThermoPol 反应缓冲液和 5 pmol 荧光标记寡核苷酸双链。

• 优势和特性

  应用特性

  • 碱洗脱（1）
  • 碱解旋（2）

• 相关产品

  单独销售的组分

  • ThermoPol® 反应缓冲液套装

• 注意事项

  1. 将反应体系置于热循环仪中，或用矿物油覆盖，以减少蒸发。
  2. 反应体系中加入终浓度为 25 μM 的 ZnCl₂，以确保酶在超过 80℃ 的条件下保持稳定。
  3. 不建议在 NEBuffer 1 – 4 和 ThermoPol® II 反应缓冲液中使用。
  4. 稀释液兼容性：稀释液 D：       
     100 mM KCl、10 mM Tris-HCl（pH 7.4 @ 25℃）、0.1 mM EDTA、1 mM DTT、0.1% Triton X-100 和 50% 甘油。

• 参考文献

  1. Pflaum, M. et al. (1998). FreeRad. Res.. 29, 585-594.
  2. Hartwig, A. et al. (1996). Toxicology Letters. 88, 85-90.

操作说明、说明书 & 用法

• 使用指南

  • DNA Damage and PreCR

工具 & 资源

• 选择指南

  • Activities of DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases
  • DNA Repair Enzymes on Damaged and Non-standard Bases
  • Properties of DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases

FAQs & 问题解决指南

• FAQs

  1. How does Tth Endonuclease IV perform in PCR?