RNA稳定剂,RNase不可逆灭活剂 RNAstabilizer,Irrevesible RNase Inactivation Reagent

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  • 参考文献

RNA稳定剂,RNase不可逆灭活剂                              RNAstabilizer,Irrevesible RNase Inactivation Reagent

RNA稳定剂,RNase不可逆灭活剂

RNAstabilizer,Irrevesible RNase Inactivation Reagent

基因研究用 for Genetic Research

规格含量:3.5 mL(甲醇溶液)×1

制造商:FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation

储存条件:冷冻(干冰运输)

 


◆概述/使用案例

稳定剂是一种用于提高从肝脏、胰脏、肾脏等RNase含量丰富的器官组织中纯化的RNA储存稳定性的试剂。本品溶于甲醇,可配合二氧化硅载体等的核酸吸附过滤法的RNA纯化试剂使用,使样品来源RNase不可逆性地灭活,获得拥有优秀储存稳定性的高品质RNA。



特点


● 抑制巯基乙醇等还原剂重新活化失活RNase,使RNase不可逆性地灭活;

● 实现从肝脏、胰脏、肾脏等RNase含量丰富的器官中纯化储存稳定性高的RNA;

● 适用于现有的利用二氧化硅载体等的核酸吸附过滤法的RNA纯化试剂(Invitek公司、QIAGEN公司等),不影响回收率,可获得高品质RNA。



使用方法


1. 在通常的两个洗涤步骤中,向第一步洗涤液中添加容量1/10的RNA稳定剂溶液;

2. 吸附样品(RNA)前的操作,请依照试剂盒说明书进行;

3. 在吸附后的首次洗涤操作中,将添加了RNA稳定剂的洗涤液(用量请参照试剂盒说明书)加入核酸纯化柱中;

4. 静置20 min后,请按照试剂盒说明书所要求的条件进行离心过滤;

5. 第二次的洗涤液无需添加RNA稳定剂并依照试剂盒随附实验方案洗涤柱子,请务必进行两次RNA吸附后的柱洗(分别用含与不含RNA稳定剂

5. 的洗涤液各洗涤一次);

6. 随后,请按照试剂盒附带的实验步骤进行操作直至洗脱。


使用注意


适用于使用二氧化硅等的核酸吸附载体的过滤法的RNA纯化试剂盒的洗涤操作。


◆物性信息

外观:无色透明液体



◆产品列表


产品编号

产品名称

规格

包装

180-01891

RNAstabilizer,Irrevesible RNase Inactivation Reagent
RNA稳定剂

基因研究用

50 tests


◆相关产品


产品编号

产品名称

规格

包装

181-03381

RNase Knockout
RNase Knockout RNA酶清除喷雾

基因研究用

475 mL

315-08121

RNase Inhibitor
RNase抑制剂

基因研究用

2000 units


※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级

Gene Keeper RNA & DNA stabilization solution 核酸提取用样品保存溶液

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Gene Keeper RNA & DNA stabilization solution                              核酸提取用样品保存溶液

核酸提取用样品保存溶液

Gene Keeper RNA & DNA stabilization solution

 

Gene Keeper RNA & DNA stabilization solution是核酸提取样品用的保存液。由于本产品能够迅速浸透提取出的组织或细胞等样品,并稳定细胞内的RNA与DNA,因此可将样品稳定保存于常温下直至进行核酸提取。

 


◆特点


● 迅速浸透样品,稳定组织、细胞内的RNA与DNA

● 提取时无需清洗保存液

● 在-20°C环境下不易冻结与结晶

● 同样适合用于非液氮和干冰环境下的样品运输

● 不含有毒物质

 


◆样品存储时间


37°C——2天

25℃——2周

4℃——1个月

-20℃——6个月

 


◆操作方法

Gene Keeper RNA & DNA stabilization solution                              核酸提取用样品保存溶液

◆应用实例


1. 从室温下使用保存溶液保存的人类口腔细胞中提纯RNA


使用药勺轻轻刮过口腔黏膜表面并将附着物用PBS悬浮后,分装到两根试管中。

离心去除上清液后,将沉淀物分别加入Gene Keeper(本产品)与其他公司的保存液,混合后保存。使用RNA提取试剂盒“ISOSPIN Cell & Tissue RNA”(无DNase处理)从在室温(25°C)下保存了10天的样品中提取RNA(图1)。



结果


从Gene Keeper溶液保存的样品中纯化的RNA能够观察到清晰的18S rRNA 与28S rRNA条带。另外,在凝胶上半部分也观察到了基因组DNA的条带。

Gene Keeper RNA & DNA stabilization solution                              核酸提取用样品保存溶液

图1. 人口腔细胞中纯化的RNA(室温保存10日)

2. 使用保存液从室温下保存的小鼠肝脏中纯化RNA与DNA


切取提取的小鼠肝脏并浸入10倍量的Gene Keeper中,在室温(25°C)下保存。使用ISOSPIN Cell & Tissue RNA提取试剂盒提取RNA,使用ISOSPIN Tissue DNA提取试剂盒提取DNA。为方便比较,对从提取后立刻使用液氮冷冻并在-80℃下保存的样品(C),与其他公司产品处理后在室温下保存的样品中提取的核酸进行了电泳(图2,3)。

Gene Keeper RNA & DNA stabilization solution                              核酸提取用样品保存溶液

图2. 小鼠肝脏中提取的RNA



Gene Keeper RNA & DNA stabilization solution                              核酸提取用样品保存溶液

图3. 小鼠肝脏中提取的DNA

结果


从Gene Keeper溶液保存的样品中提取的RNA与DNA与其他公司产品和对照(C)比较可观察到相同的条带。

◆产品列表


产品编号

产品名称

包装

319-08901

Gene Keeper RNA & DNA stabilization solution
Gene Keepe样品保存液

100 mL

◆相关产品


产品编号

产品名称

包装

317-07363

ISOGEN Ⅱ
总RNA及小RNA提取试剂

10 mL

311-07361

100 mL

314-08211

ISOSPIN Cell & Tissue RNA
动物细胞·组织RNA提取试剂盒

50 tests

310-08171

ISOSPIN PLANT RNA
植物RNA提取试剂盒

50 tests

316-08891

ISOSPIN Tissue DNA
组织DNA提取试剂盒

50 tests

312-08131

ISOSPIN Blood and Plasma DNA
全血及血浆DNA提取试剂盒

50 tests

312-08631

ISOSPIN Plant DNA
植物DNA提取试剂盒

50 tests

※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。


产品编号 产品名称 产品规格 产品等级

ISOSPIN Plant RNA 从植物组织提取RNA试剂盒

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  • 参考文献

从植物组织提取RNA试剂盒ISOSPIN Plant RNA                              从植物组织提取RNA试剂盒

ISOSPIN Plant RNA


ISOSPIN Plant RNA                              从植物组织提取RNA试剂盒

  ISOSPIN Plant RNA用于从植物组织提取和纯化RNA。本产品的原理是在离液剂离子条件下,RNA吸附于二氧化硅。无需苯酚和氯仿等有毒有机溶剂。所使用的离心柱最大限度地确保了柱容积,内封的硅胶模确保足够的RNA吸附容量和高洗脱率。
  本试剂盒采用离心法去除杂物,在硅胶模上进行 DNase I 处理,提取和纯化高纯度RNA用时仅约1小时。



◆特点


  • 高纯度 RNA

       离心法去除杂物和硅基质膜上的 DNase I 处理能提取出高纯度RNA。

  • 无需使用过滤器

       无需使用过滤器样品均匀化或过滤时后。本试剂盒用离心法去除杂物沉淀。

  • 无需苯酚、氯仿

       无需使用苯酚、氯仿等有毒有机溶剂。

  • 包装附有 DNase I

       试剂盒内含有 DNase I (RNase free),不需另外购买。


◆产品列表

ISOSPIN Plant RNA (50次用量)

产品

容量

保存

备注

PT Extraction Buffer

30 mL x 1支

室温

PT Binding Buffer

40 mL x 1支

室温

含乙醇

PT Wash1 Buffer

40 mL x 1支

室温

含乙醇(清洗液)

PT Wash2 Buffer

40 mL x 1支

室温

含乙醇(清洗液)

DNase I (RNase free)

2,000 units x 1支

-20°C

10× DNase I Buffer

1 mL x 1支

-20°C

ddWater (RNase free)

1 mL x 8支

室温

调制DNase I 溶液・洗提

离心柱

50 支 x 1袋

冷藏

上端组成:吸附柱
下端组成:收集管

运送方法


  NIPPON GENE提供直送服务,将室温品和冷藏品的试剂盒、-20°C的产品、放入干冰的泡沫箱一同放入纸箱,在常温下进行运输。



◆使用实例


ISOSPIN Plant RNA                              从植物组织提取RNA试剂盒


Data.1 RNA的回收量标准

  本产品可提取的RNA的回收量标准如下表。

样品


菠菜(叶)

0.5 μg RNA/mg 组织

青花菜(芽)

1.0 μg RNA/mg组织

卷心菜(种子)

1.3 μg RNA/mg组织

卷心菜(芽)

1.4 μg RNA/mg组织

卷心菜(叶)

0.1 μg RNA/mg组织

竹子(叶)

0.3 μg RNA/mg组织

郁金香(球根)

0.2 μg RNA/mg组织

Data.2 从卷心菜(十字花科)种子及从叶子提取RNA

  使用ISOSPIN Plant RNA与其他公司产品按照步骤提取卷心菜的种子(约 4 mg)和叶(约 30 mg)的RNA。用吸收光谱和凝胶电泳对提取出的RNA进行比较。以提取出的总RNA为模板逆进行转录,使用GeneAce SYBRR qPCR Mix α Low ROX对获得的cDNA进行实时qPCR。

实验条件

1.  样品量
  ・种子(约4 mg)
  ・叶(约30 mg)

2.  变性凝胶电泳
  ・凝胶:1% Agarose S(甲醛变性)
  ・RNA添加量:种子(1 μg)/叶(0.5 μg)
  ・RNA Ladder:与RNA添加量等量

3.  实时qPCR
  ・试剂:GeneAce SYBRR qPCR Mix α Low ROX
  ・装置:ABI 7500 Fast
  ・模板cDNA:以提取出的总RNA为模板进行逆转录
  ・扩增片段长度:441 bp
  ・实验次数: n=3

结果

  从吸收光谱结果看,在A230峰值上ISOSPIN Plant RNA比A公司低,说明本产品更能有效去除多糖类杂物(图1)。

卷心菜种子

卷心菜叶

ISOSPIN Plant RNA                              从植物组织提取RNA试剂盒

ISOSPIN Plant RNA                              从植物组织提取RNA试剂盒

图1 吸收光谱

ISOSPIN Plant RNA                              从植物组织提取RNA试剂盒

ISOSPIN Plant RNA                              从植物组织提取RNA试剂盒

【RNA添加量】

  种子(1 μg)/叶子(0.5 μg)


【Marker】
  RNA Ladder(与RNA的添加量等量)
  1% Agarose S(甲醛变性)

图2 变性凝胶电泳

卷心菜种子

卷心菜叶

ISOSPIN Plant RNA                              从植物组织提取RNA试剂盒

ISOSPIN Plant RNA                              从植物组织提取RNA试剂盒

图3 实时qPCR

【试剂】

  GeneAce SYBR® qPCR Mix α Low ROX

【模板】

  以提取出的总RNA为模板进行逆转录

【装置】ABI 7500 Fast

【扩增片段长度】441 bp

【循环数】n=3

红色: ISOSPIN Plant RNA
绿色: A公司产品



Data.3 从竹子(禾本科)愈伤组织提取RNA

ISOSPIN Plant RNA                              从植物组织提取RNA试剂盒

竹子愈伤组织

(淡竹培养细胞系Pn(rpc00047)形成)

  

使用ISOSPIN Plant RNA与其他公司产品,按照步骤对各样品量竹子愈伤组织提取RNA。通过吸收光谱和凝胶电泳对提取出的RNA进行比较。以提取出的总RNA为模板进行逆转录,使用 GeneAce SYBRR qPCR Mix α Low ROX 对获得的 cDNA 进行实时 qPCR。

  ※本实验使用的竹子愈伤组织由富山县立大学荻田信二郎博士(现公立大学法人县立广岛大学)提供。竹子愈伤组织委托理化学研究所 BioResource Center 获得的淡竹培养细胞系Pn(rpc00047)培养形成的。

实验条件

1.  样品量
  ① 约 65 mg
  ② 约 50 mg
  ③ 约 40 mg


2.  琼脂糖凝胶电泳
  ・凝胶:0.8% 琼脂糖 S/TAE
  ・RNA添加量:最终提取量的1/10(5 μL)
  ・Marker:OneSTEP Marker6(5 μL)


3.  实时qPCR
  ・试剂:GeneAce SYBR® qPCR Mix α Low ROX
  ・装置:ABI 7500 Fast
  ・模板cDNA:以提取的总RNA为模板进行逆转录
  ・扩增片段长度:197 bp
  ・循环数: n=3

结果

  从吸收光谱结果看,在A230峰值上ISOSPIN Plant RNA比A公司低,说明更能有效去除多糖类杂物(图1)。根据琼脂糖凝胶电泳比较结果显示,ISOSPIN Plant RNA更有效提取出RNA(图2)。

ISOSPIN Plant RNA                              从植物组织提取RNA试剂盒

ISOSPIN Plant RNA                              从植物组织提取RNA试剂盒

图1 吸收光谱

图2 变性凝胶电泳

【凝胶】

  0.8% 琼脂糖 S/TAE

【RNA添加量】

  最终提取量的1/10(5 μL)

【Marker】

  OneSTEP Marker6(5 μL)

ISOSPIN Plant RNA                              从植物组织提取RNA试剂盒



【试剂】GeneAce SYBR® qPCR Mix α Low ROX


【装置】ABI 7500 Fast


模板cDNA】以提取出的总RNA为模板进行逆转录


【扩增片段长度】197 bp


【循环数】n=3

图3 实时qPCR

Data.4 从郁金香(百合科)球根中提取RNA


ISOSPIN Plant RNA                              从植物组织提取RNA试剂盒

ISOSPIN Plant RNA                              从植物组织提取RNA试剂盒

     

提取液的粘性状态
左:ISOSPIN Plant RNA
右:B公司产品

  使用 ISOSPIN Plant RNA 与B公司产品,按照步骤对郁金香球根(100 mg)提取RNA。通过吸收光谱和凝胶电泳对提取出的RNA进行比较。以提取出的总RNA为模板进行逆转录,使用 GeneAce SYBRR qPCR Mix α Low ROX 对获得的 cDNA 进行实时qPCR。

  郁金香球根样品粘性高,提取困难。郁金香球根在液氮中碎成粉末状后,取1.5 mL移至离心管,并在各公司提取Buffer中用研磨棒磨碎,右图将离心管倒置比较溶液的粘性。

实验条件

1.  样品量

  100 mg

2.  琼脂糖凝胶电泳
  RNA添加量:最终提取量的1/10(5 μL)

结果

  ISOSPIN Plant RNA 也能从粘性高的郁金香球根提取出RNA。

ISOSPIN Plant RNA                              从植物组织提取RNA试剂盒

ISOSPIN Plant RNA                              从植物组织提取RNA试剂盒

 最终提取量的1/10(5 μl)

图1吸收光谱

图2 琼脂糖凝胶电泳

◆备注

  

  · 本产品仅用于实验研究,不能作医药及其他目的使用。

◆资料 Data Sheet

产品指南

  ·ISOSPIN Plant RNA(PDF 299KB)


SDS(Safety Data Sheet)

  ·ISOSPIN Plant RNA (PDF)


宣传册子

  ·ISOSPIN Plant RNA宣传册子(PDF 2.7MB)

◆相关产品

  ·Collection Tube(收集管单品套装)

  ·ISOSPIN Cell & Tissue RNA (提取动物细胞、动物组织的RNA)

  ·ISOSPIN Plasmid (提取大肠杆菌质粒)

  ·ISOSPIN PCR Product (纯化PCR产物)

  ·ISOSPIN Agarose Gel (纯化琼脂糖凝胶的DNA)

  ·ISOSPIN Blood & Plasma DNA (提取血液、血清、血浆的DNA)

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
310-08171 ISOSPIN Plant RNA 50次用量

2X RNA 上样染料 |NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

2X RNA 上样染料是一种预混上样染料,适用于变性和非变性聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)/琼脂糖凝胶。

产品类别:
Gel Loading Buffers,
RNA Markers & Ladders Products,
RNA Markers and Ladders,

Buffers Products

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分:

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • B0363S     -20    
        RNA Loading Dye, (2X) B0363AVIAL -20 4 x 1 ml 2 X

  • 特性和用法

    1X 缓冲液组分

    47.5% Formamide
    0.01% SDS
    0.01% bromophenol blue
    0.005% Xylene Cyanol
    0.5 mM EDTA
    pH @°C

  • 注意事项

    1. 2X RNA 上样染料分装为 4 管,方便使用。该染料在室温条件下可贮存一周,在 4℃ 条件下可贮存一个月,在 -20℃ 条件下可贮存 2 年。
    2. 该染料还可用作酶反应的终止液。凝胶分析前,混合了上样染料的样品可在 -20℃ 条件下贮存至少 3 天。

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Denaturing PAGE/Urea or Denaturing Agarose Gel (NEB #B0363)