Vistech 无外泌体胎牛血清,SE300-EXO

Vistech 无外泌体胎牛血清,SE300-EXO

无外泌体胎牛血清,SE300-EXO,Exosome-Depleted Fetal Bovine Serum, Qualified

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货号:SE300-EXO

规格:50ml / 500ml

无外泌体胎牛血清去除了98%以上的供体外泌体,同时无可检测到的供体microRNAs,避免FBS中的外泌体对实验的干扰,适用于外泌体相关研究。外泌体含有独特的蛋白质与核酸分子,所含成份与其细胞来源密切相关,具有功能特异性。

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Exo-CIP™ 快速 PCR 纯化试剂盒 |NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

Exo-CIP 快速 PCR 纯化试剂盒将含有的热敏核酸外切酶 I 和热敏小牛肠碱性磷酸酶(CIP)进行配方优化,用于在扩增后快速降解残留 PCR 引物,并对多余的 dNTP 去磷酸化。在 37℃ 条件下温育 4 分钟即可完成处理,然后在 80℃ 条件下加热 1 分钟对酶进行快速灭活。整个反应过程仅需 5 分钟,PCR 产物就可用于下游实验,例如 Sanger 测序、SNP 检测或 NGS 文库制备。Exo-CIP 快速 PCR 纯化试剂盒兼容于几乎所有常见的 PCR 反应缓冲液。

标题:Exo-CIP 快速 PCR 纯化试剂盒实验流程

Exo-CIP™ 快速 PCR 纯化试剂盒 |

向 PCR 产物中加入 1 µl Exo-CIP 管 A(热敏核酸外切酶 I)和 1 µl Exo-CIP 管 B(热敏 CIP),降解多余的引物和 dNTP。混合液在 37℃ 条件下温育 4 分钟,然后在 80℃ 条件下温育 1 分钟,对酶进行灭活。纯化后的 PCR 产物即可适用于下游应用或分析。
使用 Exo-CIP 快速 PCR 纯化试剂盒处理不同长度的扩增子,均可获得均一的测序读长

Exo-CIP™ 快速 PCR 纯化试剂盒 |

使用 Exo-CIP 快速 PCR 纯化试剂盒或 ExoSAP-IT PCR 产物纯化试剂处理不同长度的 PCR 产物,按照生产厂商推荐的实验流程(5 分钟和 30 分钟)操作。取 3 µl 纯化后的样品,在 ABI 3730 DNA Analyzer 上使用 BigDye Terminator chemistry(v3.1)进行 Sanger 测序。样品经 Exo-CIP 快速 PCR 纯化试剂盒处理后,测序读长超过 650 个碱基,与 ExoSAP-IT PCR 产物纯化试剂的效果一致。
使用 Exo-CIP 快速 PCR 纯化试剂盒处理后的测序结果对比

Exo-CIP™ 快速 PCR 纯化试剂盒 |

与未经处理的样品相比,1.5 kb 扩增子经 Exo-CIP 快速 PCR 纯化试剂盒处理后测序,消除了测序错误,并降低了背景干扰。在引物结合位点的不同位置验证测序结果。结果显示,Exo-CIP 快速 PCR 纯化试剂盒和 ExoSAP-IT PCR 产物纯化试剂的效果相当。
产品类别:
DNA Cleanup Products,
Nucleic Acid Purification Products

应用:
PCR & Reaction Cleanup,
DNA Amplification, PCR & qPCR

  • 试剂盒组成

    本产品提供以下试剂或组分:

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • E1050S     -20    
        Exo-CIP Tube A M1051AVIAL -20 1 x 0.1 ml 5,000 units/ml
        Exo-CIP Tube B M1052AVIAL -20 1 x 0.1 ml 1,250 units/ml
    • E1050L     -20    
        Exo-CIP Tube A M1051AAVIAL -20 1 x 0.4 ml 5,000 units/ml
        Exo-CIP Tube B M1052AAVIAL -20 1 x 0.4 ml 1,250 units/ml

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for Exo-CIP™ Rapid PCR Cleanup (#E1050)
    2. Enzymatic PCR Cleanup Protocol (NEB #M0525)
    3. Enzymatic PCR Cleanup Protocol (NEB #M0371)

  • 应用实例

    • Rapid Analysis of Genome Editing Efficiency using PCR Amplicons processed by the Exo-CIP™ Rapid PCR Cleanup Kit followed by Sanger sequencing

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Do I have to purify my PCR amplicon after cleanup?
    2. How should I store my treated samples after the enzymatic cleanup reaction?
    3. Why are my sequence reads less than 600 bases even when the electropherogram looks great?
    4. Why do I see two peaks (one large and one small) overlapping in one position of the electropherogram?
    5. Is my master mix / PCR buffer compatible with the Exo-CIP Rapid PCR Cleanup Kit?

Klenow 片段(3´→5´ exo-) |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

Klenow 片段(3´→5´ exo-)是 DNA 聚合酶 I 的 N 末端截短物,它保留了 DNA 聚合酶活性,但失去了 5´→3´ 核酸外切酶活性。该酶经突变(D355A、E357A)去除了其 3´→5´核酸外切酶活性(1)。


重点

  • 从重组酶中分离
  • 用随机引物制备探针
  • 双脱氧法 DNA 测序
  • 随附 10X 反应缓冲液
  • 中等链置换活性

产品来源

大肠杆菌菌株,其携带的质粒上含有E. coli polA(D355A、E357A)基因的片段,片段起始位置在密码子 324 处。

产品类别:
DNA Labeling Products,
DNA Manipulation Products,
Isothermal Amplification & Strand Displacement Products

应用:
Strand Displacement Amplification & Nicking Enzyme,
A-tailing,
DNA Sequencing,

Polymerases for DNA Manipulation,
RT-PCR & cDNA Synthesis,

PCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分:

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0212V     -20    
        Klenow Fragment (3’→5′ exo-) M0212VVIAL -20 1 x 0.02 ml 5,000 units/ml
        NEBuffer™ 2 B7002SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X
    • M0212S     -20    
        Klenow Fragment (3’→5′ exo-) M0212SVIAL -20 1 x 0.04 ml 5,000 units/ml
        NEBuffer™ 2 B7002SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X
    • M0212L     -20    
        Klenow Fragment (3’→5′ exo-) M0212LVIAL -20 1 x 0.2 ml 5,000 units/ml
        NEBuffer™ 2 B7002SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X
    • M0212M     -20    
        Klenow Fragment (3’→5′ exo-) M0212MVIAL -20 1 x 0.02 ml 50,000 units/ml
        NEBuffer™ 2 B7002SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位是指在 37℃ 条件下,30 分钟能使 10 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶物所需的酶量。

    反应条件

    1X NEBuffer™ 2
    Incubate at 37°C

    1X NEBuffer™ 2
    50 mM NaCl
    10 mM Tris-HCl
    10 mM MgCl2
    1 mM DTT
    (pH 7.9 @ 25°C)

    贮存溶液

    25 mM Tris-HCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    75°C for 20 minutes

    分子量

    理论上的: 68000 道尔顿

    5′ – 3′ 核酸外切酶

    No

    3′ – 5′ 核酸外切酶

    No

    链置换

    +++

    单位活性检测条件

    1X NEBuffer 2,33 µM dNTP(含 [3H]-dTTP)和 70 µg/ml 变性鲱鱼精子 DNA。

    错配率

    ~ 100×10-6bases

  • 优势和特性

    应用特性

    • 随机引物法标记
    • Sanger 双脱氧法 DNA 测序(2)
    • cDNA 第二条链的合成
    • 突变反应中第二条链的合成(3)。

  • 相关产品

    相关产品

    • dNTP 套装
    • dNTP 混合液
    • t1010-monarch-plasmid-miniprep-kit
    • Monarch® DNA 胶回收试剂盒
    • Monarch® PCR & DNA 纯化试剂盒(5 μg)

    单独销售的组分

    • NEBuffer 2

  • 注意事项

    1. Klenow 片段(3´→5´ exo-)因去除了 3´→5´ 核酸外切酶的活性不能去除 3´ 突出端,故不适用于生成平末端的反应。
    2. 加入 dNTP 后,Klenow 片段(3´→5´ exo-)在四种 NEBuffer 缓冲液中均有活性。
    3. 在使用双脱氧法(Sanger 等)进行 DNA 测序时,推荐每 5 µl 反应体系中加入 1 单位的 Klenow 片段(3´→5´ exo-)。

  • 参考文献

    1. Derbyshire, V. et al. (1988). Science. 240, 199-201.
    2. Sanger, F. et al. (1977). Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 74, 5463-5467.
    3. Gubler, U. (1987). In S.L. Berger & A.R. Rimmel(Ed.), Methods in Enzymology. 152, 330-335. San Diego: Academic Press.
    4. Bebenek, K., Joyce, C.M., Fitzgerald, M.P. and Kunkel, T.A. (1990). J. Biol. Chem.. 265, 13878-13887.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. A-Tailing with Klenow Fragment (3’→5′ exo-)

  • 使用指南

    • Activity of DNA Modifying Enzymes in rCutSmart™ Buffer

工具 & 资源

  • 选择指南

    • A-tailing Selection Chart
    • Common Applications for Exonucleases and Endonucleases
    • DNA Polymerase Selection Chart

  • Web 工具

    • NEBcloner®

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Can Klenow Fragment (3’→5′ exo-) be used in other NEBuffers, including rCutSmart?
    2. Can Klenow Fragment (3’→5′ exo-) be used to blunt DNA?
    3. Can Klenow Fragment (3’→5′ exo-) be used to fill in 3′ overhangs?
    4. Can Klenow Fragment (3’→5′ exo-) be used to remove 5′ overhangs?
    5. Can Klenow Fragment (3’→5′ exo-) be heat inactivated?
    6. Can Klenow Fragment (3’→5′ exo-) be used in labeling reactions and partial fill in reactions?
    7. Are there other methods for making probes?
    8. What is the enzyme of choice for chewing back 3′ overhangs and filling in 5′ overhangs (3′ recessed ends)?
    9. Are NEB DNA Polymerases supplied with dNTPs?

Deep Vent® (exo-) DNA 聚合酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

Deep Vent (exo-) DNA 聚合酶经过基因工程改造,去除了 Deep Vent DNA 聚合酶带有的 3´→5´ 核酸外切酶校读活性。Deep Vent (exo-) DNA 聚合酶比 Vent® (exo-) DNA 聚合酶的稳定性更好:95℃ 的半衰期为 23 小时;100℃ 的半衰期为 8 小时。Deep Vent (exo-) 和 Vent (exo-) DNA 聚合酶均适用于引物延伸和高温(72℃)DNA 测序。

Deep Vent DNA 聚合酶晶体(Ira Schildkraut 和 Rebecca Kucera,来自 NEB 公司)

Deep Vent® (exo-) DNA 聚合酶 |

产品来源

大肠杆菌菌株,携带有克隆自 Pyrococcus GB-D 的 Deep Vent(D141A/E143A)DNA 聚合酶基因,此酶为天然 DNA 聚合酶,并经过基因工程改造。这种原生生物是从 2,010 米(1)的海底热喷口分离出来的,能够在高达 104℃ 的温度下生长。

产品类别:
Other PCR Polymerases Products

应用:
Routine PCR,
PCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分:

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0259V     -20    
        Deep Vent® (exo-) DNA Polymerase M0259VVIAL -20 1 x 0.05 ml 2,000 units/ml
        ThermoPol® Reaction Buffer B9004SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X
        Magnesium Sulfate (MgSO4) Solution B1003SVIAL -20 1 x 1.5 ml 100 mM
    • M0259S     -20    
        Deep Vent® (exo-) DNA Polymerase M0259SVIAL -20 1 x 0.1 ml 2,000 units/ml
        ThermoPol® Reaction Buffer B9004SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X
        Magnesium Sulfate (MgSO4) Solution B1003SVIAL -20 1 x 1.5 ml 100 mM
    • M0259L     -20    
        Deep Vent® (exo-) DNA Polymerase M0259LVIAL -20 1 x 0.5 ml 2,000 units/ml
        ThermoPol® Reaction Buffer B9004SVIAL -20 3 x 1.5 ml 10 X
        Magnesium Sulfate (MgSO4) Solution B1003SVIAL -20 1 x 1.5 ml 100 mM

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指在 75℃ 条件下,30 分钟能使 10 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶物所需的酶量。

    反应条件

    1X ThermoPol® 反应缓冲液套装

    1X ThermoPol® 反应缓冲液套装
    20 mM Tris-HCl
    10 mM (NH4)2SO4
    10 mM KCl
    2 mM MgSO4
    0.1% Triton® X-100
    (pH 8.8 @ 25°C)

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    100 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    0.1% Triton® X-100
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    分子量

    理论上的: 89000 道尔顿

    5′ – 3′ 核酸外切酶

    No

    3′ – 5′ 核酸外切酶

    No

    链置换

    +++

    产物末端

    • Single-base 3´ Overhangs

    单位活性检测条件

    1X ThermoPol 反应缓冲液、每种浓度为 200 µM 的 dNTP(含 [3H]-dTTP)、15 nM 已结合引物的 M13 DNA。

  • 优势和特性

    应用特性

    • PCR
    • 引物延伸

  • 相关产品

    相关产品

    • dNTP 混合液
    • dNTP 套装

    单独销售的组分

    • ThermoPol® 反应缓冲液套装
    • Magnesium Sulfate (MgSO4) Solution

  • 注意事项

    1. 该酶不提供 BSA,因为大多数引物延伸反应不需要 BSA。但如果需要,在售有 NEB #B9001。乙酰化的 BSA 不能用于引物延伸反应。
    2. 在售稀释液 D(#B8004)。推荐使用此缓冲液稀释 Deep Vent (exo-) DNA 聚合酶。
    3. 还提供其它 ThermoPol 反应缓冲液套装(#B9004)。每种缓冲液套装包含 4 管 10X 缓冲液(1.5 ml/管)和 1 管 MgSO4(100 mM)。

  • 参考文献

    1. Jannasch, H.W. et al. (1992). Appl. Environ. Mircobiol. 58, 3472-3481.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Guidelines for PCR Optimization for Deep Vent® DNA Polymerase
    2. Protocol for a Routine Deep Vent® (exo-) PCR

  • 使用指南

    • Guidelines for PCR Optimization with Thermophilic DNA Polymerases

工具 & 资源

  • 选择指南

    • DNA Polymerase Selection Chart
    • Thermophilic DNA Polymerases

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Are the DNA fragments produced by Deep Vent (exo-) DNA Polymerase blunt-ended or do they have the single-base 3′ overhang that Taq DNA Polymerase yields?
    2. Can Deep Vent (exo-) DNA Polymerase be used in other buffers?
    3. I can’t get Deep Vent (exo-) DNA Polymerase to work yet Taq DNA Polymerase works fine.

  • 问题解决指南

    • PCR Troubleshooting Guide

  • 实验技巧

    反应中的酶量至关重要。尝试在反应中加入终浓度为 0.02 – 0.04 U/µl 的 Deep Vent (exo-) DNA 聚合酶。