Exo-CIP™ 快速 PCR 纯化试剂盒 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

Exo-CIP 快速 PCR 纯化试剂盒将含有的热敏核酸外切酶 I 和热敏小牛肠碱性磷酸酶（CIP）进行配方优化，用于在扩增后快速降解残留 PCR 引物，并对多余的 dNTP 去磷酸化。在 37℃ 条件下温育 4 分钟即可完成处理，然后在 80℃ 条件下加热 1 分钟对酶进行快速灭活。整个反应过程仅需 5 分钟，PCR 产物就可用于下游实验，例如 Sanger 测序、SNP 检测或 NGS 文库制备。Exo-CIP 快速 PCR 纯化试剂盒兼容于几乎所有常见的 PCR 反应缓冲液。

标题：Exo-CIP 快速 PCR 纯化试剂盒实验流程

Exo-CIP™ 快速 PCR 纯化试剂盒 |

向 PCR 产物中加入 1 µl Exo-CIP 管 A（热敏核酸外切酶 I）和 1 µl Exo-CIP 管 B（热敏 CIP），降解多余的引物和 dNTP。混合液在 37℃ 条件下温育 4 分钟，然后在 80℃ 条件下温育 1 分钟，对酶进行灭活。纯化后的 PCR 产物即可适用于下游应用或分析。
使用 Exo-CIP 快速 PCR 纯化试剂盒处理不同长度的扩增子，均可获得均一的测序读长

Exo-CIP™ 快速 PCR 纯化试剂盒 |

使用 Exo-CIP 快速 PCR 纯化试剂盒或 ExoSAP-IT PCR 产物纯化试剂处理不同长度的 PCR 产物，按照生产厂商推荐的实验流程（5 分钟和 30 分钟）操作。取 3 µl 纯化后的样品，在 ABI 3730 DNA Analyzer 上使用 BigDye Terminator chemistry（v3.1）进行 Sanger 测序。样品经 Exo-CIP 快速 PCR 纯化试剂盒处理后，测序读长超过 650 个碱基，与 ExoSAP-IT PCR 产物纯化试剂的效果一致。
使用 Exo-CIP 快速 PCR 纯化试剂盒处理后的测序结果对比

Exo-CIP™ 快速 PCR 纯化试剂盒 |

与未经处理的样品相比，1.5 kb 扩增子经 Exo-CIP 快速 PCR 纯化试剂盒处理后测序，消除了测序错误，并降低了背景干扰。在引物结合位点的不同位置验证测序结果。结果显示，Exo-CIP 快速 PCR 纯化试剂盒和 ExoSAP-IT PCR 产物纯化试剂的效果相当。
产品类别:
DNA Cleanup Products,
Nucleic Acid Purification Products

应用:
PCR & Reaction Cleanup,
DNA Amplification, PCR & qPCR

  • 试剂盒组成

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • E1050S     -20    
        Exo-CIP Tube A M1051AVIAL -20 1 x 0.1 ml 5,000 units/ml
        Exo-CIP Tube B M1052AVIAL -20 1 x 0.1 ml 1,250 units/ml
    • E1050L     -20    
        Exo-CIP Tube A M1051AAVIAL -20 1 x 0.4 ml 5,000 units/ml
        Exo-CIP Tube B M1052AAVIAL -20 1 x 0.4 ml 1,250 units/ml

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for Exo-CIP™ Rapid PCR Cleanup (#E1050)
    2. Enzymatic PCR Cleanup Protocol (NEB #M0525)
    3. Enzymatic PCR Cleanup Protocol (NEB #M0371)

  • 应用实例

    • Rapid Analysis of Genome Editing Efficiency using PCR Amplicons processed by the Exo-CIP™ Rapid PCR Cleanup Kit followed by Sanger sequencing

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Do I have to purify my PCR amplicon after cleanup?
    2. How should I store my treated samples after the enzymatic cleanup reaction?
    3. Why are my sequence reads less than 600 bases even when the electropherogram looks great?
    4. Why do I see two peaks (one large and one small) overlapping in one position of the electropherogram?
    5. Is my master mix / PCR buffer compatible with the Exo-CIP Rapid PCR Cleanup Kit?