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T7 RNA 聚合酶（高浓度） |NEB酶试剂 New England Biolabs

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上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

T7 RNA 聚合酶（高浓度）的浓度为标准 T7 RNA 聚合酶（NEB #M0251）的 20 倍，是希望自己建立和优化体外转录反应体系的有经验用户的理想选择。该酶配有 RNA 聚合酶反应缓冲液和氯化镁溶液，可进一步调试不同条件，例如核苷酸浓度。

对于标准 RNA 合成和高产量反应，我们推荐使用 T7 RNA 聚合酶（NEB #M0251）和 HiScribe®; 试剂盒。HiScribe 试剂盒特别适合在短时间内以最少的优化，合成出高质量、高产量的 RNA。

体外转录除了 T7 RNA 聚合酶外，还涉及多种成分，包括核糖核苷酸、无机焦磷酸酶和 RNase 抑制剂，这些均可单独购买。详细信息请参考“相关产品”部分。如需更多转录优化方案，请参阅相关文献。

噬菌体 T7 RNA 聚合酶是一种 DNA 依赖性 RNA 聚合酶，对 T7 噬菌体启动子具有高度特异性。该酶的分子量为 99 kD，它以 T7 启动子后的 DNA 序列为模板催化体外 RNA 合成。使用 T7 RNA 聚合酶合成的 RNA 适合科研和生物技术的诸多应用。

产品来源

来源于E.coli 菌株，携带 T7 RNA 聚合酶基因的质粒。

产品类别:
RNA Synthesis In vitro Transcription (IVT)

应用:
Transcription-Mediated and NASBA Amplification

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0460T     -20    
        T7 RNA Polymerase (High Concentration) M0460TVIAL -20 1 x 0.05 ml 1,000,000 units/ml
        RNAPol Reaction Buffer B9012SVIAL -20 1 x 1 ml 10 X
        MgCl2 Solution B2534AVIAL -20 1 x 0.5 ml 0.2 M

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指在 50 µl 总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能催化 1 nmol ATP 掺入酸不溶物所需的酶量。

    反应条件

    1X RNAPol 反应缓冲液
    Incubate at 37°C

    1X RNAPol 反应缓冲液
    40 mM Tris-HCl
    6 mM MgCl2
    1 mM DTT
    2 mM spermidine
    (pH 7.9 @ 25°C)

    贮存溶液

    50 mM Tris-HCl
    100 mM NaCl
    20 mM β-ME
    1 mM EDTA
    50% Glycerol
    0.1% (w/v) Triton® X-100
    pH 7.9 @ 25°C

    单位活性检测条件

    50 µl 含有 1X RNAPol 反应缓冲液的反应体系中，添加每种 ATP、UTP、GTP、CTP 各 0.5 mM，以及 1 µg T7 DNA。

  • 优势和特性

    应用特性

    • mRNA 用于体外翻译和显微注射
    • 放射标记的 RNA 探针
    • 非同位素 RNA 标记
    • 制备 RNA 疫苗
    • 靶基因的向导 RNA
    • RNA 的结构、加工以及催化作用的研究
    • 基因表达实验中的反义 RNA
    • RNA 扩增
    • 等温扩增

  • 相关产品

    相关产品

    • rNTP 套装
    • rNTP 混合液
    • 小鼠 RNase 抑制剂
    • 无机焦磷酸酶（大肠杆菌）

  • 参考文献

    1. Yin, Y and Carter, C.W. (1996). Nucl. Acids Res. 24, 7, 1279–1286.
    2. Schenborn, E.T. and Meirendorf, R.C. (1985). Nucl. Acids Res. 13, 6223-6236.
    3. Davanloo, P., et al. (1984). Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 81, 2035-2039.
    4. Sambrook, J., Fritsch, E.F. and Maniatis, T. (1989). Molecular Cloning: A Laboratory Manual. 2nd Ed, 10.27-10.37.
    5. Sambrook, J., Fritsch, E.F. and Maniatis, T. (1989).  Molecular Cloning: A Laboratory Manual. 2nd Ed, 18.82-18.84.
    6. Melton, D.A., et al. (1984). Nucl. Acids Res. 12, 7035-7056.
    7. Milligan, J.F., et al. (1987). Nucl. Acids Res. 15, 8783.
    8. Noren, C.J. et al. (1990). Nucl. Acids Res. 18, 83-88.
    9. Kreig, P.A. and Melton, D.A. (1984). Nucl. Acids Res. 12, 7057-7070.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for Standard RNA Synthesis

  • 应用实例

    • Scaling of High-Yield In vitro Transcription Reactions for Linear Increase of RNA Production

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is the promoter sequence of T7 RNA Polymerase?
    2. Is it possible to start transcription with an A?
    3. Does the transcription reaction with T7 RNA Polymerase require a primer?
    4. Does T7 RNA Polymerase leave an extra base at the end of a transcript?
    5. Will T7 RNA Polymerase work on single stranded substrate?
    6. Will T7 RNA Polymerase work on uncut plasmid DNA?
    7. Can aberrant RNA be produced when using T7 RNA Polymerase?
    8. How can the yield of RNA be maximized when using T7 RNA Polymerase?
    9. Can I use T7 RNA Polymerase to make high specific activity radiolabeled probes?
    10. What are the main causes of reaction failure using T7 RNA Polymerase?
    11. Why is the specific activity of the probe low?

Gene Taq rTaqDNA聚合酶

发表于由

Gene Taq

rTaqDNA聚合酶

品牌：Nippon Gene
CAS No.：
储存条件：-20℃
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

314-02873

 – 250U×4 – 咨询 – –


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

DNA 聚合酶 I（E. coli） |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

DNA 聚合酶 I（E. coli）是依赖于 DNA 的 DNA 聚合酶，具有 3´→5´ 和 5´→3´ 核酸外切酶活性（1）。该酶的 5´→3´ 核酸外切酶活性能够切除位于延伸链前端的核苷酸，从而使切刻平移成为可能。

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有过表达 polA 基因。

产品类别:
DNA Labeling Products,
DNA Manipulation Products,
cDNA Synthesis & Reverse Transcriptases Products

应用:
Polymerases for DNA Manipulation,
PCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0209V     -20    
        DNA Polymerase I (E. coli) M0209VVIAL -20 1 x 0.025 ml 10,000 units/ml
        NEBuffer™ 2 B7002SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X
    • M0209S     -20    
        DNA Polymerase I (E. coli) M0209SVIAL -20 1 x 0.05 ml 10,000 units/ml
        NEBuffer™ 2 B7002SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X
    • M0209L     -20    
        DNA Polymerase I (E. coli) M0209LVIAL -20 1 x 0.25 ml 10,000 units/ml
        NEBuffer™ 2 B7002SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位是指在 37℃ 条件下，30 分钟能使 10 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶物所需的酶量。

    反应条件

    1X NEBuffer™ 2
    Incubate at 37°C

    1X NEBuffer™ 2
    50 mM NaCl
    10 mM Tris-HCl
    10 mM MgCl2
    1 mM DTT
    (pH 7.9 @ 25°C)

    贮存溶液

    25 mM Tris-HCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    75°C for 20 minutes

    分子量

    理论上的: 103000 道尔顿

    5′ – 3′ 核酸外切酶

    Yes

    3′ – 5′ 核酸外切酶

    Yes

    链置换

    No

    单位活性检测条件

    1X NEBuffer 2，33 μM dNTP（含 [3H]-dTTP）和 70 μg/ml 变性鲱鱼精子 DNA。

    错配率

    < 9x10-6bases

  • 优势和特性

    应用特性

    • DNA 切刻平移，获得高比活性的探针（2）
    • cDNA 第二条链的合成（3,4）

  • 相关产品

    相关产品

    • dNTP 混合液
    • dNTP 套装
    • m0303-dnase-i-rnase-free
    • t1010-monarch-plasmid-miniprep-kit
    • Monarch® DNA 胶回收试剂盒
    • Monarch® PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）

    单独销售的组分

    • NEBuffer 2

  • 注意事项

    1. 该酶不含DNase I，因此切刻平移反应时需额外添加 DNase I。
    2. 加入 dNTP（未随产品提供）后，DNA 聚合酶 I（E.coli）在四种 NEBuffer 中均有活性。

  • 参考文献

    1. Lehman, I.R. (1981). In P.D. Boyer(Ed.), The Enzymes. 14A, 16-38. San Diego: Academic Press.
    2. Meinkoth, J. and Wahl, G.M (1987). S.L. Berger and A.R. Kimmel(Ed.), Methods Enzymol.. 152, 91-94. San Diego: Academic Press.
    3. Gubler, U. and Hoffmann, B.J. (1983). Gene. 25, 263-269.
    4. D’Alessio, J.M. and Gerard, G.F. (1988). Nucl. Acids Res.. 16, 1999-2014.
    5. Kunkel, T.A., Loeb, L.A. and Goodman, M.F. (1984). J. Biol. Chem. . 259, 1539-1545.

操作说明、说明书 & 用法

  • 使用指南

    • Activity of DNA Modifying Enzymes in rCutSmart™ Buffer

工具 & 资源

  • 选择指南

    • DNA Polymerase Selection Chart

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Can DNA Polymerase I (E. coli) be used in other NEBuffers, including rCutSmart?
    2. Can DNA Polymerase I (E. coli) be used to blunt DNA?
    3. Can DNA Polymerase I (E. coli) be used to fill in 3′ overhangs?
    4. Why are there artifacts in my blots using the nick translated probe?
    5. Can DNA Polymerase I (E. coli) be used to remove 5′ overhangs?
    6. Can DNA Polymerase I (E. coli) be heat inactivated?
    7. Can DNA Polymerase I (E. coli) be used in nick translation protocols?
    8. Is nick translation the best way to make a labeled probe?
    9. Are NEB DNA Polymerases supplied with dNTPs?

Therminator™ DNA 聚合酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

重点

 

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自热球菌（Thermococcus）属 9°N-7 中经过基因工程改造的 9°N（D141A/E143A/A485L）DNA 聚合酶基因。

产品类别:
DNA Labeling Products

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0261S     -20    
        Therminator™ DNA Polymerase M0261SVIAL -20 1 x 0.1 ml 2,000 units/ml
        ThermoPol® Reaction Buffer B9004SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X
    • M0261L     -20    
        Therminator™ DNA Polymerase M0261LVIAL -20 1 x 0.5 ml 2,000 units/ml
        ThermoPol® Reaction Buffer B9004SVIAL -20 3 x 1.5 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位是指在 75℃ 条件下，30 分钟内能使 10 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶物所需的酶量。

    反应条件

    1X ThermoPol® 反应缓冲液套装

    1X ThermoPol® 反应缓冲液套装
    20 mM Tris-HCl
    10 mM (NH4)2SO4
    10 mM KCl
    2 mM MgSO4
    0.1% Triton® X-100
    (pH 8.8 @ 25°C)

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    100 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    否

    分子量

    理论上的: 90000 道尔顿

    5′ – 3′ 核酸外切酶

    No

    3′ – 5′ 核酸外切酶

    No

    链置换

    +

    单位活性检测条件

    1X ThermoPol 反应缓冲液，200 µM dNTP（含 [3H]-dTTP）和 15 nM 已结合引物的单链 M13mp18。

  • 优势和特性

    应用特性

    • 部分核糖核酸置换法用于 DNA 测序（3）
    • ddNTP（4）或 acyNTP（5）的链终止法用于 DNA 测序
    • ddNTP 或 acyNTP 的链终止法进行 SNP 分析（6）

  • 相关产品

    相关产品

    • acyNTP 套装
    • dNTP 混合液
    • dNTP 套装

    单独销售的组分

    • ThermoPol® 反应缓冲液套装
    • Magnesium Sulfate (MgSO4) Solution

  • 注意事项

    1. 扩增延长区域（extended regions）时可能需要优化反应条件。

  • 参考文献

    1. Gardner, A.F. and Jack, W.E. (1999). Nucl. Acids Res.. 27, 2545-2555.
    2. Gardner, A.F. and Jack, W.E. (2002). Nucl. Acids Res. 30, 605-613.
    3. Barnes, W.F. (1978). J. Mol. Biol.. 119, 83-99.
    4. Sanger, F., Nicklen, S. and Coulson, A.R. (1977). Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 74, 5463-5467.
    5. Trainor, G.L. (1996). U.S. Patent No. 5,558,991.
    6. Haff, L.A. and Simirnov, I.P. (1997). Genome Methods. 7, 378-388.

操作说明、说明书 & 用法

  • 使用指南

    • Guidelines for PCR Optimization with Thermophilic DNA Polymerases

工具 & 资源

  • 选择指南

    • DNA Polymerase Selection Chart

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is the specific activity of Therminator™ DNA Polymerase?
    2. Can Therminator™ DNA Polymerase be used in other buffers?
    3. When should Therminator™ DNA Polymerase be used?
    4. Can Therminator™ DNA Polymerase be substituted for ThermoSequenase™?
    5. Can Therminator™ DNA Polymerase be used for sequencing?
    6. Why are some of the A’s in my sequence weak when using Therminator™ DNA Polymerase?
    7. Does Therminator™ DNA Polymerase have 3’→5′ proofreading exonuclease activity?

  • 问题解决指南

    • PCR Troubleshooting Guide