DNA重亚硫酸盐转化试剂盒 EpiSight™ Bisulfite Conversion Kit Ver.2

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EpiSightTM Bisulfite Conversion Kit Ver.2DNA重亚硫酸盐转化试剂盒                              EpiSight™ Bisulfite Conversion Kit Ver.2

DNA 重亚硫酸盐转化试剂盒

 


  Enhanced Bisulfite Reaction 抑制因亚硫酸氢钠反应的 DNA 分解,扩增长链长度。

  通过添加专利产品 Bisulfite 溶液和反应促进剂(Enhancer),能抑制模板 DNA 的分解,能让胞嘧啶转化为尿嘧啶的效率大幅度上升。使用离心柱能使 DNA 纯化操作更加简便。

  结合专用的 Taq DNA Polymerase,即使是亚硫酸氢钠反应后,PCR 扩增比较困难的碱基序列也能稳定且高效地扩增。

 


◆特点


● 离心柱操作简单

● 专利的 Enhancer 抑制 DNA 分解

● 有效扩增富含 CpG 的序列

● 热启动聚合酶防止非特异性扩增


有以下需求的可以考虑使用本产品

● 扩增长链进行高效分析

● 非甲基化胞嘧啶不转换为尿嘧啶的情况

● 甲基化胞嘧啶转换为尿嘧啶的情况

● 想提高 PCR 扩增效率

 


试剂盒内容(kit 内容)


EpiSightTM Bisulfite Conversion Kit Ver.2(20次)

 

Bisulfite solution

11.8 mL×1

Enhancer

100 µL×1

吸附缓冲液

10 mL×1

洗涤液

4.8 mL×1

Desulfonation buffer(脱磺缓冲液)

1 mL×1

洗脱缓冲液

500 µL×1

离心柱

20个

 

 

EpiSightTMBisulTaqTM DNA Polymerase,recombinant,Solution Ver.2(20次)

 

BisulTaqTM DNA Polymerase,recombinant,Solution   Ver.2

10 µL×1

10×反应缓冲液

100 µL×1

dNTPs溶液(各 2 mmol/L)

100 µL×1

 


使用例1


  以小鼠 ES 细胞(胚胎干细胞)和 M1细胞(白血病衍生细胞)的基因组 DNA 为模板,经过亚硫酸盐处理后,PCR 扩增干细胞未分化标记FGF4启动子区。PCR 扩增的链长是 521bp,CpG 二核苷酸数为 61 位,对于亚硫酸氢钠 PCR 扩增链较长,因为 GC 含量高,被认为是对三维结构影响较大的区域。

  ES 细胞有干细胞未分化标记 FGF4 的 mRNA 表达,启动子区为非甲基化状态;M1 细胞没有用于体细胞分化的 Fgf4 的 mRNA 表达,被认为启动子区处于甲基化状态。

● 样本:小鼠 ES 细胞和小鼠 M1 细胞的基因组 DNA、

● PCR 扩增链长:521bp(小鼠 Fgf4 启动子区)

● CpG:61 位

● PCR 扩增区域 GenBank Accession No.

● AC_149593 : 230224–230744

 

结果


ES 细胞和 M1细胞的 PCR 扩增产物在克隆后,得到分析 11 个样本的碱基序列。小鼠 ES 细胞的 Fgf4 启动子区为非甲基化状态。小鼠 M1细胞的 Fgf4 启动子区为甲基化状态。

 

DNA重亚硫酸盐转化试剂盒                              EpiSight™ Bisulfite Conversion Kit Ver.2

DNA重亚硫酸盐转化试剂盒                              EpiSight™ Bisulfite Conversion Kit Ver.2

 


使用例2


  以 Lambda DNA 为模板,通过使用该试剂盒和 DNA 聚合酶在 Bisulfite 反应后,扩增 910bp 目的区域,分析碱基序列。Lambda DNA 中所有的胞嘧啶都是非甲基化,Bisulfite 反应后全部被转化为尿嘧啶,预测 PCR 扩增产物中不存在胞嘧啶。

● 样本:Lambda DNA

● 非甲基化胞嘧啶:150个

● PCR 扩增链长:910pb

● PCR 扩增区域 GenBank Accession No NC_001416 : 26062–269

 

结果


下图所示,不存在胞嘧啶,150 处的胞嘧啶全部转化为胸腺嘧啶。

以往的 Bisulfite 法中,DNA 分解严重,条件设置困难,本产品能简单地成功实现 900 bp 以上的 PCR 产物扩增。

 

DNA重亚硫酸盐转化试剂盒                              EpiSight™ Bisulfite Conversion Kit Ver.2

 

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
291-78501 EpiSight™BisulfiteConversion Kit Ver.2 20次 遗传因子研究用
293-78701 EpiSight™ BisulTaq™ DNA Polymerase, recombinant, Solution Ver.2 20次 遗传因子研究用

Sodium Hydrogensulfite 亚硫酸氢钠


Sodium Hydrogensulfite

亚硫酸氢钠

品牌:FUJIFILM Wako
CAS No.:7631-90-5
储存条件:25℃以下
纯度:64.0 – 67.4% (as SO2)
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

190-16461

for Molecular Biology 100g 咨询


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动,恕不另行通知,确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

Sodium Bisulfite 亚硫酸氢钠“生产专用”


Sodium Bisulfite

亚硫酸氢钠“生产专用”

品牌:FUJIFILM Wako
CAS No.:7631-90-5
储存条件:25℃以下
纯度:64.0 – 67.4% (as SO2)
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

194-13267

Japanese Pharmacopoeia 20kg 咨询


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Sodium Bisulfite 亚硫酸氢钠“生产专用”


Sodium Bisulfite

亚硫酸氢钠“生产专用”

品牌:FUJIFILM Wako
CAS No.:7631-90-5
储存条件:25℃以下
纯度:64.0 – 67.4% (as SO2)
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

198-13265

Japanese Pharmacopoeia 500g 咨询


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