标签归档：v

V8蛋白酶 V8 Protease

发表于由
  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

V8蛋白酶V8蛋白酶 V8 Protease

V8蛋白酶 V8 Protease

别名：Endoproteinase Glu C，Staphylococcal Protease Protease V8

CAS NO：66676-43-5

EC NO：3.4.21.19

分子量：约 27000

外观：白色的结晶或结晶性粉末

 

◆摘要


（蛋白质工程学试剂）（氨基酸序列分析试剂）（序列分析酶）

在温和条件下进行蛋白多肽链的切断，不会引起氨基酸残基侧链的修饰（氧化、卤化、脱酰胺等）。而且，被修饰残基（糖链、类脂体、磷酸、硫酸等的结合部位）的肽一般以完整形态被回收，而且具有良好的回收率。如果采用同样的消化条件可以实现高再现性的分段。使用底物特异性高的酶进行蛋白质的结构分析，可预测氨基酸组成的大体片段数和平均大小，并且重要的是可以避免由于部分切断（非特异性切断），导致分离的复杂化。

本品由 Drapeau 系列的 Staphylococcus aureus（ V8 菌株）分离而成，是特异性切断谷酰胺产的羧基侧链的酶。分别切断磷酸系列缓冲液中包含谷氨酸及天冬氨酸羧基侧链、氨系列缓冲液中包含谷氨酸羧基侧链的肽结合酯结合。因为其高底物特异性，本品被用于各种蛋白质序列分析时的肽分段。



◆特异性


切断氨缓冲液中包含谷氨酸羧基侧链的肽结合和酯结合。切断磷酸缓冲液中包含谷氨酸及天冬氨酸羧基侧链的肽结合和酯结合。 

活性：20 units/mg 以上

单位的定义：以 2-Phe-Leu-Glu-4-NA 为底物，在 pH 7.8，25℃ 情况下，１分钟生产１μmol ４-硝基苯胺所需酶的量为１unit。

反应：特异性切断谷氨酸的羧基侧链。

 

◆使用方法


仅切断谷氨酸羧基


在 0.01~0.1 mol/L 碳酸氢铵（pH 7.8）或者在 0.01~0.1 mol/L 醋酸铵（pH 4.0）中，酵素：底物（mol/mol）=1：30~100，在 30~37℃ 情况下，分解 2~24小时。



同时切断天冬氨酸羧基


在 0.01~0.1 mol/L 磷酸缓冲液（pH 7.8）中，以同样条件分解。


用途：各种蛋白质的序列分析的肽分段。

pH 情况：

最佳 pH：在pH 3.5~9.5 范围有蛋白酶活性。pH 4.0 及 pH 7.8 时，活性极大（以血红蛋白为底物）。

抑制情况：主要抑制剂：DFP

 

◆使用上应注意


稳定性

pH 值为 4~10 时，物质稳定。冷冻干燥或冷冻，保存时间较长。在 0.2% 的 SDS 中，具有 100% 活性：在 4 mol/L 尿素中，具有 50% 活性。

V8蛋白酶 V8 Protease

164-13982说明书

参考文献


［1］

Drapeau, G. R., Boily, Y. and Houmard, J.?J. Biol. Chem., 247, 6720 (1972)
［2］

Drapeau, G. R.?Methods in Enzymology, 47, 189 (1977)
［3］

Houmard, J. et al.Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 69, 3506 (1972)
［4］

日本生化学会编：续生化学讲座2，蛋白质化学，上，p268（东京化学同仁）
［5］

日本生化学会编：生化学，57,472（1985）
［6］

Austen, B. M. and Smith, E. L.Biochem. Biophys. Res. Commun., 72, 411 (1976)
［7］

Hitz, H., Schafer, D. and Wittmann-Liebold, B.?Eur. J. Biochem., 75, 497 (1977)
［8］

L'Italien, J. J. and Laursen, R. J.J. Biol. Chem., 256, 8092 (1981)
［9］

Emmens, M., Welling, G. W. and Beintema, J. J.Biochem. J., 157, 317 (1976)
［10］

Ovchinnikov, Yu. A., Lipkin, V. M., Modyanov, N. N., Chertov, O. Yu. and Smirnov, Yu. V.?FEBS Lett., 76, 108 (1977)

Richardson, C., Behnke, W. D., Freisheim, J. H. and Blumenthal, K. M.Biochim.
［11］

Biophys. Acta, 537, 310 (1978)
［12］

Kohmoto, K., Tsunasawa, S. and Sakiyama, F.?Eur. J. Biochem., 138, 227 (1984) Evenberg, A., Meyer, H., Gaastra, W., Verheij, H. M. and deHaas, G. H.  J. Biol. Chem., 252, 1189 (1977)
［13］

Dognin, M. J. and Wittmann-Liebold, B.FEBS Lett., 84, 342 (1977) Fleer, E. A. M., Verheij, H. M. and deHaas, G. H.Eur. J. Biochem., 82, 261 (1978)
［14］

Kitagawa, Y., Tsunasawa, S., Tanaka, N., Katsube, Y., Sakiyama, F. and Asada, K.?J.Biochem. (Tokyo), 99, 1289 (1986)

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
164-13982 V8 Protease
V8蛋白酶		 2 mg 生物化学
050-05941 Endoproteinase Glu-C, Sequencing Grade
测序级谷氨酰蛋白内切酶Glu-C		 50 μg 生物化学
056-05921 Endoproteinase Asp-N, Sequencing Grade
测序级天冬氨酰蛋白内切酶Asp-N		 2 μg 生物化学

Branson必能信 大容量超声波清洗机 DHA-1000(120V)

发表于由
Branson必能信 大容量超声波清洗机 DHA-1000(120V)

Branson必能信 大容量超声波清洗机 DHA-1000(120V)

  • 商品品牌： Branson必能信
    商品编号：DHA-1000(120V)
  • 商品价格： 请与我们联系

    • Branson必能信 大容量超声波清洗机 DHA-1000(120V)-Branson必能信-DHA-1000(120V)

    • 类型:单频
    • 样式:台式
    • 频率:40～45kHz
    • 加热功能:有
    • 排水:有
    • 品牌属性:进口
    • 容积:30.1～100L
    • 功率可调:否
    实验室常用设备|||清洗消毒|||超声波清洗机|||Branson必能信大容量超声波清洗机DHA-1000(120V)
    进口大容量超声波清洗机 必能信超声波清洗设备 Branson超声波清洗机

    Branson必能信 大容量超声波清洗机 DHA-1000(120V)

    这款超声波清洗机是专为中等或大批量清洗而设计的。

    该产品是目前同类清洗机中唯一具有工业尺寸的设备。

    超声波换能振子粘接於缸底. 排水喉为不锈钢.

    所有线路固定接驳, 不外附任何部件. 节约能源设计, 并符合国际FCC抗干扰标准.

    专为在中至高清洗量工业用的清洗器, 一体化设计, 清洗缸容量达至10加仑.

    产品采用一体式结构设计，清洗槽容量为 45.5 升，足够用来清洗大尺寸工件或批量小尺寸零部件。

    配合不同的清洗剂, 硷性, 轻度酸性, 中性及哥士的等水溶性清洗剂以清洗电子电器, 五金及塑胶零件, 玻璃制品等.

    清洗缸采用304L不锈钢原模压制, 隔离保获以减 热能损耗及噪音. 内附低密度加热器保持水溶液温度以发挥最大清洁功能.

    -配件：

    DHA清洗盖
    DHA清洗篮     		100-246-802
    CPN-916-032

    Bransonic台式超声波清洗机主要应用于以下领域：

    实验室——
    彻底去除血渍、蛋白质及其他污渍
    – 实验室玻璃器具、试管、吸液管
    – 光学镜片、隐形眼镜、眼睛框
    – 科学仪器、各种部件    		 电器 / 电子业——
    迅速、彻底地去除焊剂和污物
    – PC 板和 SMD
    – 电容器
    – 磁头
    – 接插件
    – 石英
    – 高分辨率液晶    		 珠宝手饰 ——
    彻底清洁，恢复光彩
    – 手表
    – （钟表）机芯
    – 珍贵的金属和宝石
    – 链子、饰品
    – 硬币
    工业 ——
    深层清洗，去除灰尘、油脂、蜡和油渍
    – 各种开关
    – 继电器和马达
    – 齿轮
    – 精密轴承
    – 金属及塑料工件
    – 组装件    		 医疗 / 牙科——
    可用来消毒，是一个用来清洗医疗器具的安全可靠的方法
    – 导管、注射器、手术用具
    – 牙科用具、（牙医）钻、假牙    		 光学——
    清除油脂灰尘等
    – 镜片、望远镜、相机零

    品牌简介：

    必能信是美国艾默生电气集团所属子公司，创立于1946年，至今有60多年历史。公司主要生产各类超声波清洗设备、超声波焊接设备、振动摩擦焊接设备、热板焊接设备、激光焊接设备、旋转焊接设备、超声波金属焊接设备和超声波细胞粉碎设备等。公司在全球范围内拥有70多个销售网点和近2000名员工，并在美国、加拿大、墨西哥、德国、斯洛伐克、中国、中国香港、日本以及韩国设立有研发和生产基地。
    必能信是塑料焊接和精密清洗工业领域的领导者，其无论是在设备的设计、开发、生产乃至市场营销方面，都是世界领先的。我们承诺为客户的切实需求提供解决方案，并与客户分享最先进的产品和工艺技术。我们全球化的营销组织确保了为全世界的客户提供各方面资源和服务。
    必能信是全球塑料焊接和精密清洗领域的领导者。必能信的全体员工承诺通过对以下方面的持续改进来为客户提供100%满意的服务：
    – 客户和供应商联盟
    – 技术和新产品开发
    – 市场营销
    – 生产制造
    – 产品质量
    – 服务与支持
    员工是我们最大的财富。教育、投入和团队协作是获取优质的产品和服务的基本要素。我们产品和服务中所显现的质量与诚实精确地诠释了必能信的品牌声誉。
    全面客户满意可以增加我们在全球市场的份额，带来出色的商业表现和提高员工的满意度。

    当购买必能信的产品时，你将更多的分享我们具有的优势——质量、可靠、服务、关怀、诚实和性能

    拥有近60年丰富经验的行业领导者
    可靠的产品质量，稳定的操作性能
    全球化的组织和服务网络
    ISO9001认证生产企业
    本地化的生产和技术支持
    快速服务响应和人性化的关注
    便捷的产品和服务获取途径
    前瞻性的服务，不仅为现在，更为将来

    商品属性

    • 类型:单频
    • 样式:台式
    • 频率:40～45kHz
    • 加热功能:有
    • 排水:有
    • 品牌属性:进口
    • 容积:30.1～100L
    • 功率可调:否
    商品属性
    商品名称 Branson必能信 大容量超声波清洗机 DHA-1000(120V)-DHA-1000(120V)-Branson必能信
    型号 DHA-1000(120V)
    类别 实验室常用设备|||清洗消毒|||超声波清洗机|||Branson必能信大容量超声波清洗机DHA-1000(120V)
    品牌 Branson必能信
    品牌简介 Branson必能信
    关键字 进口大容量超声波清洗机 必能信超声波清洗设备 Branson超声波清洗机,超声波,焊接设备,产品,精密,领导者,客户

    Branson必能信 大容量超声波清洗机 DHA-1000(120V)

    迅数 V1-全自动菌落计数仪

    发表于由
    迅数 V1-全自动菌落计数仪

    迅数 V1-全自动菌落计数仪

  • 商品品牌： 迅数
    商品编号：V1
  • 商品价格： 请与我们联系

    • 迅数 V1-全自动菌落计数仪-迅数-V1

    • 像素:300万
    • 分辨率:0.08mm
    • 培养皿直径:50-110mm
    • 品牌属性:国产
    生命科学仪器|||微生物学|||菌落计数仪|||迅数V1-全自动菌落计数仪
    全自动菌落计数仪/器

    迅数 V1-全自动菌落计数仪产品特点：

    1、强大的区域选择功能

    当培养皿中有局部片状菌落生长，而其他区域又分布均匀时，

    可通过区域选择工具，自动排除污染区域的菌落数。

    2、快速高效，极大地提高实验效率

    V1采用真彩动态CMOS和高速图像传输接口，常规平皿统计只需1秒，

    当原始样品菌浓较高，未做梯度稀释，直接培养形成的数千菌落，

    也可在3秒内自动计算出。

    –

    　 3、300万像素高清晰真彩CMOS，悬浮式暗视野拍摄装置；

    　V1 采用“迅数”专利的colonfast菌落智能识别技术，

    　无论是透明琼脂平板还是深色有色培养基都能轻松处理。

    　 4、“迅数”colonfast菌落智能识别技术，统计结果更精准；

    　全新设计的全封闭拍摄箱，辅以全空间、宽光带和悬浮式暗视野装置，

    　 彻底解决了因外界光线对玻璃培养皿折射光斑的干扰而影响

    　 统计精度的行业难题。

    　– 仪器规格与配置

    菌落分析软件；

    品牌商务液晶电脑（XP系统）；

    适合培养皿的直径：标准的50-110mm；

    V1型主机（CMOS=300万像素） 1台；

    商品属性

    • 像素:300万
    • 分辨率:0.08mm
    • 培养皿直径:50-110mm
    • 品牌属性:国产
    商品属性
    商品名称 迅数 V1-全自动菌落计数仪-V1-迅数
    型号 V1
    类别 生命科学仪器|||微生物学|||菌落计数仪|||迅数V1-全自动菌落计数仪
    品牌 迅数
    品牌简介 迅数
    关键字 全自动菌落计数仪/器,菌落,培养皿,像素,区域,全自动,视野

    迅数 V1-全自动菌落计数仪

    Ph.D.-7 噬菌体展示肽库试剂盒 v2 |NEB酶试剂 New England Biolabs

    发表于由

    上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

    产品信息

    噬菌体展示是一种筛选技术，可将一系列多肽或蛋白展示在噬菌体病毒颗粒的表面，而编码这些多肽或蛋白的遗传物质位于病毒颗粒的内部（1-3）。这在各展示蛋白序列与其编码 DNA 之间产生了物理关联，从而能够通过称为淘选（4）的体外筛选流程，快速筛选出与给定目标分子（抗体、酶、细胞表面受体等）亲和结合的噬菌体展示肽。最简单的淘选流程（图 1）：将展示不同肽的噬菌体库与包被在平板（或磁珠）上的靶分子进行温育，洗掉未结合的噬菌体，再洗脱特异性结合的噬菌体，然后扩增洗脱的噬菌体，并重复上述结合/扩增过程，富集表面展示有与靶分子结合的肽序列的噬菌体。经过 3–4 轮淘选后，通过 DNA 测序和结合试验得到表征单个克隆。

    Ph.D.-7 噬菌体展示肽库试剂盒 v2 的制备原理是将随机七肽组合库融合表达于 M13 噬菌体次要外壳蛋白（pIII）的 N 端（5-9）。这种肽后跟随一个直接位于野生型 pIII 序列之前的短间隔序列（Gly-Gly-Gly）。该库包含约 10 亿个电穿孔序列，在提供的 10 μl 噬菌体中经扩增一次，每个序列即可产生约 100 个拷贝。

    展示肽形式：X7-GGG-野生型 M13 pIII

    图 1：对 pIII 上展示的五价肽库进行淘选。

    Ph.D.-7 噬菌体展示肽库试剂盒 v2 |

     
    产品类别:
    Protein Tools Products,
    Phage Display Products

    应用:
    Protein Analysis Tools,
    Phage Display

    • 试剂盒组成

      本产品提供以下试剂或组分：

      NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
      • E8211S     Multi-temperature    
          Ph.D.™-7 Phage Display Peptide Library Kit v2 E8211-1 -20    
          Ph.D.™-7 Phage Display Peptide Library E8102AVIAL -20 1 x 0.1 ml 1 x 1013 pfu/ml
          E. coli K12 ER2738 E4104SVIAL -20 1 x 0.2 ml Not Applicable
          -96 glll Sequencing Primer (20-mer) S1259AAVIAL -20 1 x 0.05 ml 10 pmol/μl
          DYKDDDDK Mouse mAb E8004AVIAL -20 1 x 0.015 ml Not Applicable
          Protein G Magnetic Beads S1430V 4    
          Protein G Magnetic Beads S1430AVIAL 4 1 x 0.15 ml Not Applicable

    • 优势和特性

      Features

      • 对照淘选实验无需执行封闭步骤，可避免噬菌体与塑料结合物发生非特异性结合
      • 使用 Protein G 磁珠进行对照淘选实验，可减少繁琐的板/孔冲洗步骤
      • 即用型复杂噬菌体库理论上可以匹配所有可能的 7 个随机结合位点（207 = 1.28 x 109）；表型与基因型之间的内在关联支持在单个微孔板或 Eppendorf 试管中筛选数十亿个克隆
      • 无需使用辅助噬菌体进行扩增
      • 利用简单明了的分子生物学和无菌培养技术，可在不到一周的时间内获得肽结合序列
      • 提供的 -96 gIII 测序引物（500 pmol）可进行 50 次以上测序反应

    • 相关产品

      相关产品

      • Ph.D.™ 多肽展示克隆系统
      • PhD-12 噬菌体展示肽库试剂盒 v2
      • PhD-C7C 噬菌体展示肽库试剂盒 v2

      单独销售的组分

      • e4104-ecoli-k12-er2738
      • Protein G 磁珠

    • 注意事项

      1. 若要长期贮存（> 30 天）E. coli K12 ER2738，推荐贮存于 -80℃。
      2. Protein G 磁珠应贮存于 4℃，以防冻坏。
      3. 初代试剂盒（NEB #E8100）和二代试剂盒（简称 v2；NEB #E8211）均包含相同的 Ph.D.-7 噬菌体展示肽库组份（NEB #E8102）。
      4. M13 兼容大多数缓冲液条件；不过，洗脱缓冲液可能受制于扩增大肠杆菌所需的培养条件。如果使用二代测序方式，则无需通过扩增来富集噬菌体池。浏览现有文献了解操作流程。
      5. 提供的 -96 gIII 测序引物（500 pmol）可进行 50 次以上测序反应。

    操作说明、说明书 & 用法

    • 操作说明

      1. Quick Start Protocol PhD Phage Display Peptide Library Kit v2
      2. Panning Protocol 1: Solution-phase Panning with Affinity Bead Capture
      3. Panning Protocol 2: Surface-Phase Panning (Direct Target Coating)
      4. Phage ELISA Binding Assay with Direct Target Coating
      5. Phage Titering
      6. Plaque Amplification for ELISA Samples
      7. Post Panning Protocol 1: Rapid Purification of Single-Stranded DNA Templates for Sequencing Reactions

    • 说明书

      产品说明书包含产品使用的详细信息、产品配方和质控分析。

      • manualE8210_E8211_E8111_E8212

    • 应用实例

      • Ph.D.™ Peptide Display Cloning System

    FAQs & 问题解决指南

    • FAQs

      1. What is the difference between the original and version 2 (v2) Phage Display kits?
      2. Which of the three ready-made libraries should I choose?
      3. What is the difference between the three ready-made libraries?
      4. Can a different bacterial strain be used with the Ph.D.™ Phage Display?
      5. No plaques are visible when titering using a Ph.D.™ Phage Display Library.
      6. I am using Ph.D.™ Phage display and the amplified phage titer is low.
      7. I am using Ph.D.™ Phage Display and the phage DNA templates do not yield a readable sequence.
      8. I am using Ph.D.™ Phage Display and the sequencing templates do not run where they should on a gel.
      9. I am using Ph.D.™ Phage Display and after 4 or more rounds of panning all clones are wild-type phage (white plaques).
      10. When performing an experiment using Ph.D.™ Phage Display, the ELISA indicates that background binding to the plate is as high as binding to the target.
      11. When using the Ph.D.™ Phage Display, panning yielded a consensus sequence, but no ELISA signal.
      12. Where can I find references for Ph.D.™ phage display libraries?

    • 问题解决指南

      • Phage Display Troubleshooting Guide (NEB #E8210, #E8211, #E8212)