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Q5® 血源直扩 2X 预混液 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

Q5 血源直扩 2X 预混液可以免除 DNA 纯化步骤，直接使用干血斑或含高达 30% 的全血样品进行各种靶标扩增。该预混液包含 Q5® 热启动超保真 DNA 聚合酶，该酶热稳定性好，具有 3′→ 5′ 外切酶活性，融合了具有增强持续合成能力的 Sso7d DNA 结合域，优化的 dNTP 缓冲液有效提高了对血液中扩增抑制成分、抗凝剂以及滤纸上化学品的耐受度。该产品能够从含有 EDTA 钠盐、EDTA 钾盐、枸橼酸钠和肝素钠的全血细胞以及从保存在普通防腐滤纸上的血样品中扩增长达 7.5 kb 的片段。

Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶扩增性能卓越、保真度高。通过核酸适配体抑制酶活，可在室温条件下建立反应体系。

建议使用 NEB’s Tm Calculator 针对于感兴趣的聚合酶/缓冲液确认引物的最适退火温度，与其它 Tm 值估算系统不同，NEB Tm 值估算系统在估算最佳退火温度时，考虑了影响退火温度的缓冲液组分。

图 1：Q5 血源直扩 2X 预混液扩增性能卓越，能够直接扩增全血或干血斑 

Q5® 血源直扩 2X 预混液 |

根据说明书推荐的标准反应条件，使用 Q5 血源直扩 2X 预混液进行 35 个循环的 PCR 扩增。使用 LabChip® 微流控分析仪对产率和纯度进行定量，结果分别以圆点的大小和颜色展示：圆点面积越大、绿色越深，则表示扩增性能越强。 A. 以 10% EDTA 保存的人全血为模板，扩增人基因组不同靶标（0.3 至 7.5 kb）。结果以模拟胶图（上）和相应的点图（下）呈现。结果显示：Q5® 血源直扩 2X 预混液在较大范围的模板长度区间内均表现良好。B. 以全血（上）或滤纸干血（底部）为模板，对人类基因组靶标（604 bp）进行扩增。人全血占总反应体积 (50 µl) 的 5-30%。将未经处理的 1 mm 打孔干血斑直接添加到 25 µl 反应体系中（每个反应一个打孔样品）。结果显示：Q5 血源直扩 2X 预混液对不同的全血含量、防腐剂和各种类型的采血卡纸具有广泛的耐受性。 

图 2：Q5 血源直扩 2X 预混液对各种靶标序列均能高效扩增 

Q5® 血源直扩 2X 预混液 |

使用 Q5 血源直扩 2X 预混液和其它几种市售血液直扩聚合酶，分别对不同 GC 含量 (23-77%)（A图）和不同长度（2 -7 kb）（B 图）人类基因靶标进行 PCR。以 10% EDTA 保存的人全血为模板。根据说明书建议使用 50 µl 反应体系进行热循环。使用 LabChip® 微流控分析仪进行定量，结果分别以圆点的大小和颜色表示产量和纯度。结果显示：Q5 血源直扩 2X 预混液对于各种类型的靶标均表现优异。 

图 3：在各种滤纸，血液防腐剂、反应体系中表现稳定 

Q5® 血源直扩 2X 预混液 |

根据说明书推荐的标准反应条件，使用 Q5 血源直扩 2X 预混液对干血中的人类基因组靶标（604 bp）进行 PCR。将不同抗凝剂抗凝的血样采集于 Whatman 903 或 FTA Elute 卡纸上，在上述干血卡纸打孔，分别直接加入到 20、25 或 50 μl 反应体系中。结果显示：在各种体积的反应体系、抗凝剂或滤纸类型中，均能达到稳健扩增。

产品类别:
Q5® High-Fidelity DNA Polymerases Products,
Master Mixes Products,
PCR, qPCR & Amplification Technologies Products

应用:
Extraction-Free PCR,
qPCR & RT-qPCR,
Hot Start PCR,

High-Fidelity PCR,

DNA Amplification, PCR & qPCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0500S     -20    
        Q5® Blood Direct 2X Master Mix M0500SVIAL -20 1 x 1 ml 2 X
    • M0500L     -20    
        Q5® Blood Direct 2X Master Mix M0500SVIAL -20 5 x 1 ml 2 X

  • 特性和用法

    热失活

    否

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for Routine PCR Directly from Whole Blood or Dried Blood Spots (DBS) using Q5® Blood Direct 2X Master Mix (NEB #M0500)

工具 & 资源

  • Web 工具

    • Tm Calculator

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is the difference between Q5® Blood Direct 2X Master Mix and Hemo KlenTaq (NEB #M0332)?
    2. What types of samples/materials are compatible with the Q5® Blood Direct 2X Master Mix?
    3. What concentration of whole blood is recommended for use with Q5® Blood Direct 2X Master Mix?
    4. What blood anticoagulants can be used with Q5® Blood Direct 2X Master Mix?
    5. How do I pre-treat Dried Blood Spot Punches?
    6. What length of product can be made by Q5® Blood Direct 2X Master Mix?
    7. What ends will my PCR products have?
    8. What are Hot Start and WarmStart® polymerases and when would I use them?
    9. What are the properties of this polymerase (fidelity, product ends, max amplicon, modified base incorporation, etc.)?
    10. My results are not as expected. Where can I find troubleshooting help?
    11. When and how should I use the Q5® High GC Enhancer?

质控、安全 & 法规

  • 质控分析

    每一新批次的 NEB 产品都要经过质控，以满足指定的质量标准，对特定产品的质量标准和每一批次的检测数据可以通过产品说明表格、COA、产品信息卡或者产品手册进行查阅或下载。关于 NEB 产品质控的详细信息，可从此处查阅。

  • 产品说明与变更通知

    产品说明表包含产品的储存温度、有效期和规格，这些文件的命名规则如下：[货号]_[规格]_[版本]

    • M0500S_L_G_v1

  • CoA 文件包含单个批次产品的储存温度、有效期和质控，这些文件的命名规则如下： [货号]_[规格]_[版本]_[Lot#]

    • M0500G_v1_10157482
    • M0500L_v1_10157480
    • M0500S_v1_10157478
    • M0500G_v1_10159686
    • M0500L_v1_10189911
    • M0500S_v1_10184748
    • M0500L_v1_10204369
    • M0500G_v1_10198149
    • M0500L_v1_10207348
    • M0500L_v1_10210691
    • M0500S_v1_10211736
    • M0500L_v1_10233224

  • SDS

    以下 SDS 文件可以帮助您安全地使用该产品

    • Q5® 血源直扩 2X 预混液

Q5® 超保真 2X 预混液 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

Q5® 超保真 2X 预混液 |

 

Q5 超保真 2X 预混液采用方便的预混液形式，且高效、高保真。Q5 超保真 2X 预混液是一种热稳定的高保真 DNA 聚合酶，具有 3´→5´ 核酸外切酶活性，并且融合了具有增强持续合成能力的 Sso7d 结构域，能够进行稳定的 DNA 扩增。Q5 超保真 DNA 聚合酶的错配率不到 Taq DNA 聚合酶的二百八十分之一，是克隆的理想选择，可用于长片段或难扩增片段的扩增。这款便捷的预混液剂型浓度为 2X。 本预混液包含 dNTP、Mg++ 以及应用广泛的专有缓冲液，不论模板 GC 含量多少，仅需加入引物和 DNA 模板即可进行高效扩增。终浓度为 1X（推荐使用）时，Q5 超保真预混液含有 2 mM Mg++。 Q5 超保真 DNA 聚合酶不同于常规的较低保真度的 PCR 酶。强烈建议使用 NEB Tm Calculator，确定给定引物组的最佳退火温度。

Q5® 超保真 2X 预混液 |
Q5 超保真 2X 预混液，一种剂型即可对多种靶标进行高效扩增。

Q5® 超保真 2X 预混液 |
使用 Q5 超保真 2X 预混液扩增从低到高不同 GC 含量的人基因组 DNA。所有反应均为 30 个循环，并通过 LabChip® 微流控分析技术观察结果。

Q5® 超保真 2X 预混液 |

产品来源

大肠杆菌菌株，携带 Q5 超保真 DNA 聚合酶基因。

产品类别:
Q5® High-Fidelity DNA Polymerases Products,
Master Mixes Products

应用:
Long Range PCR,
Fast PCR,
High-Fidelity PCR,

Multiplex PCR,
Specialty PCR,
Routine PCR,
DNA Amplification, PCR & qPCR,
PCR,

Fast Cloning: Accelerate your cloning workflows with reagents from NEB

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0492S     -20    
        Q5® High-Fidelity 2X Master Mix M0492SVIAL -20 2 x 1.25 ml 2 X
    • M0492L     -20    
        Q5® High-Fidelity 2X Master Mix M0492SVIAL -20 10 x 1.25 ml 2 X

  • 特性和用法

    热失活

    否

  • 优势和特性

    应用特性

    • 超保真 PCR
    • 克隆
    • 长片段或难扩增片段的扩增
    • 高通量 PCR

  • 相关产品

    相关产品

    • dNTP 混合液
    • dNTP 套装
    • Q5® 超保真 DNA 聚合酶
    • Q5® 热启动超保真 2X 预混液
    • Q5® 热启动超保真 DNA 聚合酶
    • Q5® 反应缓冲液套装

  • 注意事项

    1. A precipitate (most noticeable after the first 1–2 freeze/thaw cycles) is not uncommon. To ensure optimal performance, the master mix should be thawed and resuspended prior to use. Stability testing using up to 15 freeze/thaw cycles has shown no negative effect on master mix performance.
    2. Product specifications for individual components in the Q5 High-Fidelity 2X Master Mix are available separately.

  • 参考文献

    1. Anastassia Voronova Erin Coyne, Ashraf Al Madhoun, Joel V. Fair, Neven Bosiljcic, Catherine St-Louis, Grace Li, Sherry Thurig, Valerie A. Wallace, Nadine Wiper-Bergeron, and Ilona S. Skerjanc. (2013). Hedgehog Signaling Regulates MyoD Expression and Activity. J Biol Chem. 288(6), 4389–4404. PubMedID: PMC3567689
    2. Lieve Naesens, Luke Guddat, Dianne Keough, André B.P. van Kuilenburg, Judith Meijer, Johan Vande Voorde and Jan Balzarini (2013). ROLE OF HUMAN HYPOXANTHINE GUANINE 
      PHOSPHORIBOSYLTRANSFERASE IN ACTIVATION 
      OF THE ANTIVIRAL AGENT T-705 (FAVIPIRAVIR). Molecular Pharmacology Fast Forward. 87247,
    3. Hicham Bouabe, Klaus Okkenhaug (2013). A Protocol for Construction of Gene Targeting Vectors and Generation of Homologous Recombinant Embryonic Stem Cells. Methods in Molecular Biology. 1064, 337-354.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for Q5® High-Fidelity 2X Master Mix

  • 使用指南

    • Activity of Restriction Enzymes in PCR Buffers
    • Guidelines for PCR Optimization with Thermophilic DNA Polymerases

工具 & 资源

  • 选择指南

    • DNA Polymerase Selection Chart

  • Web 工具

    • Tm Calculator

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What are the advantages of using Q5® High-Fidelity DNA Polymerase?
    2. What are the differences between the numerous Q5® Polymerase products available?
    3. My results are not as expected. Where can I find troubleshooting help?
    4. What ends will my PCR products have?
    5. What does exonuclease activity mean for a DNA polymerase?
    6. What are the properties of this polymerase (fidelity, product ends, max amplicon, modified base incorporation, etc.)?
    7. Does Q5® High-Fidelity DNA Polymerase exhibit a strand displacement activity?
    8. How should I determine the appropriate annealing temperature for my reaction?
    9. What should the final primer concentration be in my PCR?
    10. When and how should I use the Q5® High GC Enhancer?
    11. There is a precipitate in the bottom of the buffer tube. Is this normal?

  • 问题解决指南

    • PCR Troubleshooting Guide

Q5® 超保真 DNA 聚合酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

Q5® 超保真 DNA 聚合酶 |

 

Q5® 超保真 DNA 聚合酶是一种热稳定的高保真 DNA 聚合酶，具有 3´→5´ 核酸外切酶活性，并且融合了具有增强持续合成能力的 Sso7d 结构域，能够进行稳定的 DNA 扩增。Q5 超保真 DNA 聚合酶的错配率不到 Taq DNA 聚合酶的二百八十分之一，是克隆的理想选择，可用于长片段或难扩增的扩增子。Q5 超保真 DNA 聚合酶随附经优化的缓冲液系统，不论 GC 含量多少，都可以进行高效扩增。5X Q5 反应缓冲液按 1X 终浓度使用时含有 2 mM Mg++，可用于大多数常规应用。对于高 GC 含量的靶标（GC 含量 ≥ 65%），加入 5X Q5 High GC Enhancer 可增强扩增性能。Q5 超保真 DNA 聚合酶不同于常规的较低保真度的 PCR 酶。强烈建议使用 NEB Tm Calculator，确定给定引物组的最佳退火温度。

Q5® 超保真 DNA 聚合酶 | 
使用 Q5 超保真 DNA 聚合酶扩增从低到高不同 GC 含量的人基因组 DNA。所有反应均为 30 个循环，并通过 LabChip® 微流控分析技术观察结果。。

Q5® 超保真 DNA 聚合酶 |

产品来源

大肠杆菌菌株，携带 Q5 超保真 DNA 聚合酶基因。

产品类别:
Q5® High-Fidelity DNA Polymerases Products

应用:
Gibson Assembly®,
Long Range PCR,
Fast PCR,

High-Fidelity PCR,
Multiplex PCR,
Specialty PCR,
Routine PCR,
DNA Amplification, PCR & qPCR,
PCR,

Fast Cloning: Accelerate your cloning workflows with reagents from NEB

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0491V     -20    
        Q5® High-Fidelity DNA Polymerase M0491VVIAL -20 1 x 0.025 ml 2,000 units/ml
        Q5® Reaction Buffer Pack B9027SVIAL -20 1 x 1.5 ml 5 X
        Q5® High GC Enhancer B9028AVIAL -20 1 x 1.5 ml 5 X
    • M0491S     -20    
        Q5® High-Fidelity DNA Polymerase M0491SVIAL -20 1 x 0.05 ml 2,000 units/ml
        Q5® Reaction Buffer Pack B9027SVIAL -20 1 x 1.5 ml 5 X
        Q5® High GC Enhancer B9028AVIAL -20 1 x 1.5 ml 5 X
    • M0491L     -20    
        Q5® High-Fidelity DNA Polymerase M0491LVIAL -20 1 x 0.25 ml 2,000 units/ml
        Q5® Reaction Buffer Pack B9027SVIAL -20 4 x 1.5 ml 5 X
        Q5® High GC Enhancer B9028AVIAL -20 4 x 1.5 ml 5 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位是指在 74℃ 条件下，30 分钟能使 10 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶物所需的酶量。

    单位活性检测条件

    25 mM TAPS-HCl（25℃ 时 pH 9.3）、50 mM KCl、2 mM MgCl2、1 mM β-巯基乙醇、200 μM dNTP（含 [3H]-dTTP）和 15 nM 已结合引物的 M13 DNA。

  • 优势和特性

    应用特性

    • 超保真 PCR
    • 克隆
    • 长片段或难扩增片段的扩增
    • 高通量 PCR

  • 相关产品

    相关产品

    • dNTP 混合液
    • dNTP 套装
    • Q5® 热启动超保真 2X 预混液
    • Q5® 超保真 2X 预混液
    • Q5® 热启动超保真 DNA 聚合酶
    • Q5® 反应缓冲液套装

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. PCR Using Q5® High-Fidelity DNA Polymerase (M0491)

  • 使用指南

    • Activity of Restriction Enzymes in PCR Buffers
    • Guidelines for PCR Optimization with Thermophilic DNA Polymerases

  • 应用实例

    • AppNote_Multiplex_PCR_Using_Q5_HF_DNA_Polymerase

工具 & 资源

  • 选择指南

    • DNA Polymerase Selection Chart

  • Web 工具

    • Tm Calculator

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What are the advantages of using Q5® High-Fidelity DNA Polymerase?
    2. What are the differences between the numerous Q5® Polymerase products available?
    3. My results are not as expected. Where can I find troubleshooting help?
    4. What ends will my PCR products have?
    5. What does exonuclease activity mean for a DNA polymerase?
    6. Does Q5® High-Fidelity DNA Polymerase exhibit a strand displacement activity?
    7. What are the properties of this polymerase (fidelity, product ends, max amplicon, modified base incorporation, etc.)?
    8. How should I determine the appropriate annealing temperature for my reaction?
    9. What should the final primer concentration be in my PCR?
    10. When and how should I use the Q5® High GC Enhancer?
    11. Do other polymerases work in Q5® Reaction Buffer?
    12. There is a precipitate in the bottom of the buffer tube. Is this normal?

  • 问题解决指南

    • PCR Troubleshooting Guide

Q5® 超保真 PCR 试剂盒 |NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

Q5® 超保真 PCR 试剂盒 |  

Q5® 超保真 DNA 聚合酶是一种具有热稳定性的超高保真 DNA 聚合酶， 拥有 3´→5´ 核酸外切酶活性，并且融合了具有增强持续合成能力的 Sso7d DNA 结合域， 能够进行稳定的 DNA 扩增。Q5 超保真 DNA 聚合酶的错配率比 Taq DNA 聚合酶低约 280 倍， 是克隆的理想选择，可用于长片段或难扩增片段的扩增。Q5 超保真 2X 预混液 采用方便的预混液形式， 具有优良的高保真性。本预混液包含 dNTP、Mg++ 以及 用途广泛的专用缓冲液，不论 GC 含量多少， 仅需加入引物和 DNA 模板即可进行高效扩增。按推荐的 1X 终浓度使用时， Q5 超保真预混液含有 2 mM MgCl2。

Q5 超保真 DNA 聚合酶不同于典型的低保真 PCR 酶。 如需确认一组给定引物的最佳退火温度， 强烈推荐使用 NEB Tm Calculator。

本试剂盒包含充足的预混液和无核酶水，可进行 50 次聚合酶链式反应（NEB #E0555S）或 200 次反应（NEB #E0555L）。为提供更多便利，本试剂盒还包含凝胶上样染料和 Quick-Load DNA LAdder。

Q5® 超保真 PCR 试剂盒 |

Q5® 超保真 PCR 试剂盒 |

产品类别:
Q5® High-Fidelity DNA Polymerases Products

应用:
Long Range PCR,
Fast PCR,
High-Fidelity PCR,

Multiplex PCR,
Specialty PCR,
Routine PCR,
DNA Amplification, PCR & qPCR,
PCR,

Fast Cloning: Accelerate your cloning workflows with reagents from NEB

  • 试剂盒组成

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • E0555S     -20    
        Q5® High-Fidelity 2X Master Mix M0492SVIAL -20 1 x 1.25 ml 2 X
        Quick-Load® Purple 1 kb Plus DNA Ladder N0550AVIAL 4 1 x 0.2 ml 100 µg/ml
        Gel Loading Dye, Purple (6X) B7024SVIAL 25 1 x 1 ml 6 X
        Nuclease-free Water B1502AVIAL -20 1 x 1.5 ml Not Applicable
    • E0555L     -20    
        Q5® High-Fidelity 2X Master Mix M0492SVIAL -20 4 x 1.25 ml 2 X
        Quick-Load® Purple 1 kb Plus DNA Ladder N0550AAVIAL 4 1 x 0.4 ml 100 µg/ml
        Gel Loading Dye, Purple (6X) B7024SVIAL 25 1 x 1 ml 6 X
        Nuclease-free Water B1502AVIAL -20 4 x 1.5 ml Not Applicable

  • 相关产品

    相关产品

    • dNTP 混合液
    • dNTP 套装
    • Q5® 超保真 DNA 聚合酶
    • Q5® 热启动超保真 2X 预混液
    • Q5® 热启动超保真 DNA 聚合酶
    • Q5® 反应缓冲液套装

  • 注意事项

    1. 可单独提供 Q5 超保真 PCR 试剂盒中各组分的产品规格。

  • 参考文献

    1. Anastassia Voronova Erin Coyne, Ashraf Al Madhoun, Joel V. Fair, Neven Bosiljcic, Catherine St-Louis, Grace Li, Sherry Thurig, Valerie A. Wallace, Nadine Wiper-Bergeron, and Ilona S. Skerjanc. (2013). Hedgehog Signaling Regulates MyoD Expression and Activity. J Biol Chem. 288(6), 4389–4404. PubMedID: PMC3567689
    2. Lieve Naesens, Luke Guddat, Dianne Keough, André B.P. van Kuilenburg, Judith Meijer, Johan Vande Voorde and Jan Balzarini (2013). ROLE OF HUMAN HYPOXANTHINE GUANINE PHOSPHORIBOSYLTRANSFERASE IN ACTIVATION OF THE ANTIVIRAL AGENT T-705 (FAVIPIRAVIR). Molecular Pharmacology Fast Forward. 87247,
    3. Hicham Bouabe, Klaus Okkenhaug. (2013). A Protocol for Construction of Gene Targeting Vectors and Generation of Homologous Recombinant Embryonic Stem Cells. Methods in Molecular Biology . 1064, 337-354.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for a Routine PCR (E0555)
    2. PCR Optimization (E0555)

  • 说明书

    产品说明书包含产品使用的详细信息、产品配方和质控分析。

    • manualE0555

  • 使用指南

    • Activity of Restriction Enzymes in PCR Buffers

工具 & 资源

  • Web 工具

    • Tm Calculator

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What are the advantages of using Q5® High-Fidelity DNA Polymerase?
    2. What are the differences between the numerous Q5® Polymerase products available?
    3. My results are not as expected. Where can I find troubleshooting help?
    4. What ends will my PCR products have?
    5. What does exonuclease activity mean for a DNA polymerase?
    6. Does Q5® High-Fidelity DNA Polymerase exhibit a strand displacement activity?
    7. What are the properties of this polymerase (fidelity, product ends, max amplicon, modified base incorporation, etc.)?
    8. How should I determine the appropriate annealing temperature for my reaction?
    9. What should the final primer concentration be in my PCR?
    10. When and how should I use the Q5® High GC Enhancer?
    11. What are the stability and storage requirements of the Q5® PCR Kit?
    12. There is a precipitate in the bottom of the buffer tube. Is this normal?