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兔源Iba1抗体，无标签 Anti Iba1, Rabbit

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兔源Iba1抗体，无标签 Anti Iba1, Rabbit小胶质细胞特异性抗体

兔源Iba1抗体，无标签

 


　　Iba 1是在巨噬细胞/小胶质细胞中特异性表达的分子量为17,000的钙结合蛋白。近来小胶质细胞备受关注，除了在神经营养/神经保护中起作用外，也已被证实通过产生NO，TNF-α和IL-1β对神经造成损伤。

　　该产品是与小胶质细胞特异性反应的兔多克隆抗体，适用于与星形胶质细胞特异性抗GFAP单克隆抗体进行双染色。

◆特点


●　抗原：对应于Iba1的C末端的合成肽
●　形式：TBS溶液（1 mg/mL）
●　纯化：兔抗血清的抗原亲和层析纯化

●　特异性：对小胶质细胞和巨噬细胞具有特异性，但不与神经元和星形胶质细胞发生交叉反应。

　　　　　  与人类，小鼠大鼠Iba1反应。
●　用法：1.　抗Iba1，兔（免疫细胞化学）适用于免疫细胞化学。1-2 μg/mL使用

　　　　  2.　抗Iba1，兔（用于Westernblotting）适合于Western blotting（免疫印迹）。0.5-1 μg/mL使用。



◆应用


大鼠原代混合培养细胞双染色和相同视野的相位图像


兔源Iba1抗体，无标签 Anti Iba1, Rabbit

◆免疫印迹实验


兔源Iba1抗体，无标签 Anti Iba1, Rabbit

Lane

1. Iba1 protein (10 ng)

2. 大鼠小胶质细胞 (10 µg)

3. 大鼠神经元 (10 µg)

4. 大鼠大脑皮层 (150 µg)

■ 实验条件

SDS-PAGE：5.5 % stacking gel, 12.5 % running gel, 100V

Blocking：3 % 脱脂奶粉/TBS ，1 h，室温

一抗：抗Iba1抗体(1/1000) ，3 % 脱脂奶粉/TTBS，Overnight，4℃

二抗：过氧化物酶标记抗兔IgG（1/5000），3 % 脱脂奶粉/TTBS，1 h，室温

数据提供：国立研究开发法人　国立精神・神经医疗研究中心　佐栁老师、一戸老师、高坂老师



◆实验步骤


a）石蜡切片

1.　 脱蜡
　　 100％二甲苯10分钟，2次
          ⇓
　　 100％乙醇5分钟，2次
          ⇓
　　 80％乙醇5分钟
          ⇓
　　 70％乙醇5分钟
          ⇓
　　 dH2O，5分钟，2次

2.　用0.01M PBS洗涤，2次

3.　在0.3％H2O2的甲醇溶液中孵育30分钟

4. 　用0.01M PBS洗涤，3次

5.　室温（RT）下用封闭缓冲液（1.5％正常山羊血清和0.001M PBS的1％BSA）孵育2小时。

6.　4℃下在封闭缓冲液中与抗Iba1抗体（0.5 μg/mL）（Wako目录号019-19741）孵育过夜。

7.　用0.01M PBS洗涤，3次。

8.　与生物素化的抗兔IgG抗体（1:200）在封闭缓冲液中室温孵育1小时。

9.　用0.01M PBS洗涤，3次。

10.　室温下与Elite ABC试剂（0.01M PBS中的试剂A（1:50）和试剂B（1:50））孵育1小时。

11.　用0.01M PBS洗涤，3次

12.　在过氧化物酶溶液中孵育（0.05M Tris缓冲液的0.01％过氧化氢和0.05％DAB）

b）冰冻切片

　　冷冻的小鼠脑组织或培养的细胞应用4％多聚甲醛-PBS灌注固定。然后制备组织切片。制备后，将组织切片和培养的细胞用抗Iba1抗体免疫染色。



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兔源Iba1抗体，有标签

鼠源Iba1抗体，无标签，单克隆抗体（NCNP24）


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巨噬细胞/小胶质细胞Iba1抗体

兔源Iba1抗体，无标签 Anti Iba1, Rabbit

兔源Iba1抗体，无标签 Anti Iba1, Rabbit

iba1抗体单页

Iba1抗体概述

兔源Iba1抗体，无标签 Anti Iba1, Rabbit

兔源Iba1抗体，无标签 Anti Iba1, Rabbit

019-19741说明书

016-20001说明书

兔源Iba1抗体，无标签 Anti Iba1, Rabbit

兔源Iba1抗体，无标签 Anti Iba1, Rabbit

神经生物学产品系列

Protocol for IHC-Fr(Anti Iba Rabbit)

兔源Iba1抗体，无标签 Anti Iba1, Rabbit

Protocol for IHC-P(Anti Iba, Rabbit)


参考文献

产品编号

产品名称

2017年发表文献引用

019-19741

Anti Iba1, Rabbit 

(for   Immunocytochemistry)

[1]

Tomov N, Surchev L. Punctate   Staining as Indirect Evidence for Microglial Ramification[J]. Acta   morphologica et anthropologica, 24: 1-2.<链接>

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Barua S, Chung J I, Kim A Y, et   al. Jak kinase 3 signaling in microgliogenesis from the spinal nestin+   progenitors in both development and response to injury[J]. Neuroreport, 2017,   28(14): 929.<链接>

[3]

Dilution A S. Supplementary   Table S2. Antibodies used in immunohistochemical, flatmount and   immunoblotting studies[J].

<链接>

[4]

Su W S, Wu C H, Chen S F, et al.   Low-intensity pulsed ultrasound improves behavioral and histological outcomes   after experimental traumatic brain injury[J]. Scientific Reports, 2017, 7(1):   15524.

<链接>

[5]

Ebneter A, Kokona D, Jovanovic   J, et al. Dramatic Effect of Oral CSF-1R Kinase Inhibitor on Retinal   Microglia Revealed by In Vivo Scanning Laser Ophthalmoscopy[J]. Translational   vision science & technology, 2017, 6(2): 10-10.<链接>

016-20001

Anti Iba1, Rabbit

 (for   Western Blotting)

[1]

Zhang X, Wang D, Pan H, et al.   Enhanced expression of markers for astrocytes in the brain of a line of   GFAP-TK transgenic mice[J]. Frontiers in neuroscience, 2017, 11.

<链接>

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Barua S, Chung J I, Kim A Y, et   al. Jak kinase 3 signaling in microgliogenesis from the spinal nestin+   progenitors in both development and response to injury[J]. Neuroreport, 2017,   28(14): 929.<链接>

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Peters D G, Purnell C J, Haaf M   P, et al. Dietary lipophilic iron accelerates regional brain iron-load in   C57BL6 mice[J]. Brain Structure and Function, 2017: 1-18.<链接>

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Edwards A, Szklarczyk A,   Ottenheimer D, et al. Matrix metalloproteinase activity stimulates N-cadherin   shedding and the soluble N-cadherin ectodomain promotes classical microglial   activation[J]. Journal of neuroinflammation, 2017, 14(1): 56.<链接>

[5]

Roche S L, Ruiz‐Lopez A M,   Moloney J N, et al. Microglial‐induced Müller cell gliosis is attenuated by   progesterone in a mouse model of retinitis pigmentosa[J]. Glia,   2017.

<链接>


产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
019-19741 Anti Iba1, Rabbit(for Immunocytochemistry)
抗Iba1，兔（免疫细胞化学）		 50 μg 免疫化学
016-20001 Anti Iba1, Rabbit (for Western blotting)
抗Iba1，兔（用于免疫印迹）		 50 μg 免疫化学

第六回 小胶质细胞-星形胶质细胞相互关联控制脑卒中

发表于由

第六回 小胶质细胞-星形胶质细胞相互关联控制脑卒中

小胶质细胞研究的前沿  —从基础到临床—

第六回 小胶质细胞-星形胶质细胞相互关联控制脑卒中

山梨大学大学院　综合研究部　医学域　药理学讲座　小泉修一

第六回 小胶质细胞-星形胶质细胞相互关联控制脑卒中

◆前言

如今，胶质细胞在大脑功能中发挥的作用被不断地阐明。尤其是在各种大脑疾病中，胶质细胞的变化迅速、大且多样，因此研究人员认为这些胶质细胞的变化在大脑的异常和修复过程中可能发挥了重要的作用。这些假设逐渐被认可的同时，仍残留了许多课题。例如，胶质细胞研究在体外和体内实验的研究结果差异大，目前在体外实验获得的研究结果无法直接运用至体内实验研究。

此外，至今为止的大部分研究，都将各类胶质细胞分为小胶质细胞、星形胶质细胞、少突胶质细胞等分别进行研究，忽略了大脑功能受异源胶质细胞间交流结果的控制。当然，胶质细胞研究的历史和经验尚浅，先阐明各类胶质细胞的性质十分重要，而近期的研究以各类形式提出，胶质细胞可能作为集结者，通过异源胶质细胞间的协作控制大脑功能。

本文着眼于体内脑卒中模型中小胶质细胞-星形胶质细胞的关联，阐述其交流在控制大脑功能时发挥作用的重要性。

◆小胶质细胞-星形胶质细胞的关联

小胶质细胞对大脑内外环境的变化非常敏感，能够感知细微的变化，并先于大脑做出变化。例如，小胶质细胞在中年期就已活化并开始衰老1），而在肌萎缩侧索硬化等神经退行性疾病中，它们在发病前就已活化并与疾病的发病机制和难以治疗相关2）。虽然活化的小胶质细胞可以直接控制神经细胞的功能，但通过作用于星形胶质细胞能影响大脑功能。在外伤性脑损伤模型中，小胶质细胞首先感知到损伤并传达给星形胶质细胞，从而发挥保护作用3），另外感知到炎症的小胶质细胞通过传达信息给星形胶质细胞来控制神经细胞的功能4）。

若先经历过非侵袭性缺血应激，在后来的侵袭性缺血时便可获得抗性，这种现象称为“缺血耐受性”，在实验和临床上比较常见（图A，B）。在短暂性大脑中动脉闭塞（MCAO）模型小鼠中，首先发生强烈变化的细胞是小胶质细胞，其次是星形胶质细胞5）。即使是不会造成显著伤害的非侵袭性MCAO（预处理，PC），灵敏的小胶质细胞仍会活化。

另外，非侵袭性MCAO以外的PC也能够诱导缺血耐受性，出现交叉缺血耐受性现象，但诱导交叉缺血耐受性的典型代表PC是革兰氏阴性细菌细胞壁成分的lipopolysaccharide（LPS，脂多糖）。LPS在中枢对小胶质细胞Toll样受体4的作用特别强，表明小胶质细胞对于缺血耐受性诱导来说至关重要。

这些小胶质细胞性缺血耐受性的诱导机制与Ⅰ型干扰素介导的通路密切相关，其他小胶质细胞依赖性神经胶质递质、细胞因子、神经营养因子等也非常重要。因此，小胶质细胞不仅能够直接作用于神经细胞，还通过作用于星形胶质细胞等其他类型的胶质细胞，间接诱导缺血耐受性的机制，近年有人提出了后者的重要性。

第六回 小胶质细胞-星形胶质细胞相互关联控制脑卒中

图. 通过胶质细胞交流获得缺血耐受性的机制

A. 侵袭性脑缺血导致的神经细胞严重损伤或死亡。

B. 经历非侵袭性缺血（PC）后，诱导其在侵袭性缺血时获得抗性的缺血耐受性。

C. PC类的轻度刺激由小胶质细胞先感知。小胶质细胞转化为活性小胶质细胞，直接参与缺血耐受性诱导，同时诱导星形胶质细胞活化（反应性星形胶质细胞）。反应性星形胶质细胞通过多种机制促进缺血耐受性的形成，特别是通过P2X7受体表达和P2X7受体依赖性HIF1α表达介导的神经保护机制，缺血耐受性持久且强效。

◆从小胶质细胞到星形胶质细胞的信号传递

感知到PC后的小胶质细胞如何把信号传达给星形胶质细胞呢？一般有多种DAMP，而ATP作为最初的信号尤为重要。ATP/P2受体信号的显著变化是脑卒中初期及LPS负荷小胶质细胞最初的应答变化。

感知到LPS后的小胶质细胞通过表达囊泡核苷酸转运蛋白（Vesicular nucleotide transporter），增强ATP的胞吐作用6）。感知到脑卒中后的小胶质细胞会表达一般情况下不表达的P2Y1受体，并结合ATP，使小胶质细胞自身的功能发生巨大变化7）。尤其是ATP，即使在脑卒中以外，在受到高度的兴奋性刺激时4）,在外伤性脑损伤3）等的初期应答中，作为从小胶质细胞到星形胶质细胞的信号起着核心作用。小胶质细胞自身也有保护大脑的作用7），第一时间感知到更敏感的小胶质细胞信息，并将该信息传达给大脑保护功能更强大的星形胶质细胞，通过这种级联反应，发挥作为各脑部疾病安全装置的作用。

◆作为缺血耐受性执行细胞的星形胶质细胞

PC可使星形胶质细胞活化（反应性星形胶质细胞）。抑制该功能就会使缺血耐受性消失，因此可以说反应性星形胶质细胞是诱导缺血耐受性的必要条件。反应性星形胶质细胞是缺血耐受性诱导的执行细胞，其自身直接或通过与神经细胞和其他细胞的交流间接地在缺血耐受性诱导中发挥核心作用。

例如，反应性星形胶质细胞具有产生神经保护分子、增强兴奋性神经递质和去除有毒物质的功能、调节能量代谢等多种作用，特别是通过P2X7受体介导的作用更强5，8，9）。通过PC，反应性星形胶质细胞通过星形胶质细胞特异性大量（100倍以上）且长期（8周以上）地使P2X7受体的表达增强，并以受体依赖性诱导缺氧诱导因子1α（hypoxia inducible factor1α，HIF1α），发挥强烈的缺血抵抗性（图C）。

包括这种星形胶质细胞特异性的P2X7受体表达增强机制在内，缺血耐受性型星形胶质细胞的诱导机制还有很多尚不明确的地方。如上所述，由于小胶质细胞在PC诱导反应性星形胶质细胞之前活化，因此认为是小胶质细胞诱导了缺血耐受性型星形胶质细胞。然而这种推测是否正确，有关小胶质细胞诱导的星形胶质细胞表型多样性等相关问题，仍有许多不明之处，有待今后进一步研究。

此外，小胶质细胞如何感知非侵袭性的温和PC？又会产生怎样的表现型？小胶质细胞向星形胶质细胞和神经细胞传达的信号分别又是什么？等等一系列的问题尚待解决。但是，小胶质细胞-星形胶质细胞如同继电器一样传达大脑环境内的变化，并以此改变其在大脑中的应答性机制，被认为是各种脑部疾病发病前的常见现象。揭示了这是一种溢出效应较大的现象，期待未来的研究进展。

◆结语

本文以缺血耐受性为例，表明了小胶质细胞在控制神经胶质细胞脑功能方面的重要性。虽然小胶质细胞和星形胶质细胞均具有诱导缺血耐受性的潜力，但事实上小胶质细胞-星形胶质细胞关联的相互作用很可能发挥更重要的作用。随着各类胶质细胞的研究日渐活跃，预计未来异源细胞间相互作用控制神经细胞的观点也会越来越重要。

◆参考文献

1）Zhang, G. et al. : Nature, 497, 211 (2013). DOI: 10.1038/nature12143

2）Sanagi, T. et al. : J. Neurosci. Res., 88, 2736 (2010). DOI: 10.1002/jnr.22424

3）Shinozaki, Y. et al. : Cell Rep., 19, 1151 (2017). DOI: 10.1016/j.celrep.2017.04.047

4）Pascual, O. et al. : Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 109, E197 (2012). DOI: 10.1073/pnas.1111098109

5）Hirayama, Y. et al. : J. Neurosci., 35, 3794 (2015). DOI: 10.1523/JNEUROSCI.4218-14.2015

6）Imura, Y. et al. : Glia, 61, 1320 (2013). DOI: 10.1002/glia.22517

7）Fukumoto, Y. et al. : J. Cereb. Blood Flow Metab., 39, 2144 (2019). doi: 10.1177/0271678X18805317

8）Hirayama, Y. and Koizumi, S. : Glia, 65, 523 (2017). DOI: 10.1002/glia.23109

9）Hirayama, Y. and Koizumi, S. : Neurosci. Res., 126, 53 (2018). DOI: 10.1016/j.neures.2017.11.013


   “小胶质细胞研究的前沿—从基础到临床—”系列：结语


九州大学大学院　药学研究院　药理学领域　津田诚   


   从和光纯药时报2020年第3期开始连载的“小胶质细胞研究的前沿-从基础到临床-”系列共6篇，最终以综述“小胶质细胞-星形胶质细胞连锁调控脑   

   卒中”作为完结篇。本系列对阿尔茨海默病、癫痫、脑梗塞、精神疾病、慢性疼痛等小胶质细胞发挥重要作用的疾病进行了探讨，以简明易懂的方式   

   介绍了其近期的新发现和前景，并毫无保留地讲述了小胶质细胞的魅力。衷心感谢引领世界小胶质细胞研究的各位老师们，在百忙之中为本系列文章

   执笔，同时由衷期待有朝一日能够阐明目前小胶质细胞研究结果尚无法克服的神经疾病的发病机制，并实现诊断和治疗方法的开发。

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Triammonium Citrate 小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体（免疫组化）

发表于由

Triammonium Citrate

小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体（免疫组化）

品牌：FUJIFILM Wako
CAS No.：3458-72-8
储存条件：室温
纯度：95.0+% (Titration)
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

016-05265

 Wako 1st Grade 500g – 670.00 – –


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

鼠源Iba1抗体，无标签，单克隆抗体（NCNP24） Anti Iba1, Monoclonal Antibody (NCNP24)

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鼠源Iba1抗体，无标签，单克隆抗体（NCNP24） Anti Iba1, Monoclonal Antibody (NCNP24)小胶质标记

鼠源无标签抗Iba1，单克隆抗体（NCNP24）



　　Iba1是在小胶质细胞和巨噬细胞中高度表达的蛋白质，分子量约17 kDa。 此蛋白质通常称为中枢神经系统中的小胶质细胞标记物。

　　最近，小胶质细胞已被广泛研究，其负责中枢神经系统中的免疫功能，并且与各种疾病相关，如神经变性疾病，精神错乱，脑肿瘤和感染。

鼠源Iba1抗体，无标签，单克隆抗体（NCNP24） Anti Iba1, Monoclonal Antibody (NCNP24)

类别：Monoclonal

应用物种：IHC（小鼠、大鼠和狨猴冰冻切片,DABlocking）（1:500-2,000），

应用物种：IHC（大鼠冰冻切片,fluorescent）（1:100）

◆特点


●　免疫组化评估

●　用于多色免疫染色

●　具有高特异性和低背景的单克隆抗体



◆应用 – 免疫组织化学染色


鼠源Iba1抗体，无标签，单克隆抗体（NCNP24） Anti Iba1, Monoclonal Antibody (NCNP24)


→使用抗Iba1，单克隆抗体（FUJIFILM Wako产品编号：012-26723）小胶质细胞的定位信号清晰，与抗Iba1，兔多克隆抗体的效果相同（FUJIFILM Wako产品编号：019-19741、019-19741）。



◆实验条件


●　样品：7周龄大鼠，7周龄小鼠或成年狨猴的大脑皮质

●　切片：50 μm冰冻切片（小鼠和大鼠），40 μm冰冻切片（狨猴）

●　染色法：ABC法+DAB染色

●　抗体浓度= 1：500


数据提供


Sanagi,T., Manabe,T., Ichinohe, N., and Kohsaka, S., National Center of Neurology and Psychiatry in Japan. 


抗体信息


抗Iba1，单克隆抗体（NCNP24）

抗原

合成肽（Iba1的C末端）

克隆号

NCNP24

子类

小鼠IgG1

浓度

1.3 mg/mL

Buffer缓冲液

50％甘油/ TBS，0.05％叠氮化钠

物种反应性

小鼠，大鼠，狨猴

应用

免疫组织化学（冷冻切片）（1：500-2,000）

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兔源Iba1抗体，有标签

兔源Iba1抗体，无标签


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巨噬细胞/小胶质细胞Iba1抗体

◆相关产品

产品编号

产品名称

中文名称

包装

储存条件

016-26461

Anti Iba1, Rabbit, Biotin-conjugated

抗Iba1，兔，生物素缀合

100 μL

保存在2-10℃

013-26471

Anti Iba1, Rabbit, Red Fluorochrome   (635)-conjugated

抗Iba1，兔，红色荧光染料（635）结合

100 μL

 


◆相关资料

鼠源Iba1抗体，无标签，单克隆抗体（NCNP24） Anti Iba1, Monoclonal Antibody (NCNP24) 鼠源Iba1抗体，无标签，单克隆抗体（NCNP24） Anti Iba1, Monoclonal Antibody (NCNP24) 鼠源Iba1抗体，无标签，单克隆抗体（NCNP24） Anti Iba1, Monoclonal Antibody (NCNP24)
Iba1鼠源无标签 Iba1抗体概述

012-26723,016-26721

说明书
鼠源Iba1抗体，无标签，单克隆抗体（NCNP24） Anti Iba1, Monoclonal Antibody (NCNP24) 鼠源Iba1抗体，无标签，单克隆抗体（NCNP24） Anti Iba1, Monoclonal Antibody (NCNP24)
神经生物学产品系列 Iba1抗体系列

参考文献

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产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
012-26723 Anti Iba1, Monoclonal Antibody (NCNP24)
抗Iba1，单克隆抗体（NCNP24）		 10 μL －
016-26721 Anti Iba1, Monoclonal Antibody (NCNP24)
抗Iba1，单克隆抗体（NCNP24）		 50 μL －