产品信息

• 产品组分信息

  本产品提供以下试剂或组分：

  NEB #	名称	组分货号	储存温度	数量	浓度
  M0308S     -20       T4 PDG (T4 Endonuclease V) M0308SVIAL -20 1 x 0.2 ml 10,000 units/ml   T4 PDG Reaction Buffer B0308SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X   Recombinant Albumin, Molecular Biology Grade B9200SVIAL -20 1 x 0.6 ml 20 mg/ml

• 特性和用法

  单位定义

  1 单位指在 20 µl 反应体系中，37℃ 条件下，30 分钟使超过 95% 的 0.5 µg 经紫外线照射诱变的超螺旋 pUC19 DNA 变成切刻型质粒所需的酶量。切刻可通过琼脂糖凝胶电泳检测。诱变后的质粒 DNA 平均含有 3-5 个嘧啶二聚体。

  反应条件

  1X T4 PDG 反应缓冲液
  Supplement with 100 µg/ml Recombinant Albumin, Molecular Biology Grade
  Incubate at 37°C

  1X T4 PDG 反应缓冲液
  100 mM NaCl
  1 mM DTT
  1 mM EDTA
  25 mM Na₂HPO₄
  (pH 7.2 @ 25°C)

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  250 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  50% Glycerol
  0.15% Triton® X-100
  pH 7.4 @ 25°C

  热失活

  否

  单位活性检测条件

  20 µl 总反应体系，含 1X T4 PDG 反应缓冲液、0.5 µg 经紫外线照射诱变的超螺旋 pUC19 DNA 和 100 µg/ml BSA。

• 优势和特性

  应用特性

  • DNA 损伤研究
  • 单细胞凝胶电泳（彗星试验）

• 相关产品

  单独销售的组分

  • 重组白蛋白, 分子生物学级（不含动物成分）

• 注意事项

  1. 缓冲液在 4℃ 时会产生沉淀，因此需将其加热至室温。
  2. 该酶在 NEBuffer 4（NEB #B7004）中具有 100% 的活性，在 NEBuffer 1 – 3（NEB #B7001、NEB #B7002、NEB #B7003）中具有 75% 的活性。
  3. 为取得最佳使用效果，建议温育时间不超过 30 分钟。
  4. 反应后，电泳前，在 6X 上样缓冲液中加入终浓度为 0.5% 的 SDS 或 1 µl 苯酚，以分离蛋白与 DNA 的结合，从而改善电泳结果。

• 参考文献

  1. Higgins, K.L. and Lloyd, R.S. (1987). Mutation Research. 183, 117-121.

操作说明、说明书 & 用法

• 操作说明

  1. Protocol for T4 PDG (M0308)

• 使用指南

  • DNA Damage and PreCR

工具 & 资源

• 选择指南

  • Activities of DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases
  • DNA Repair Enzymes on Damaged and Non-standard Bases
  • Properties of DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases

FAQs & 问题解决指南

• FAQs

  1. What is the activity of T4 PDG in the NEBuffers 1-4?
  2. What is the molecular weight of T4 PDG?
  3. Is T4 PDG a tagged protein?
  4. Can the T4 PDG be used in the comet assay?
  5. Does T4 PDG remove the damaged base?
  6. What type of damaged DNA does T4 PDG recognize?