产品信息

该产品包含 50 nmol SNAP-Surface 549 底物，足以制备 10 ml 5 µM SNAP-tag 融合蛋白标记溶液。

SNAP-tag 蛋白标记体系能将目标蛋白以共价结合的形式，特异性地标记上任何分子。SNAP-tag 基于人 O⁶-烷基鸟嘌呤-DNA-烷基转移酶（hAGT）。SNAP-tag 的底物通过苄基与鸟嘌呤或氯嘧啶基团偶联荧光基团、生物素或微珠。在标记反应中，底物的苄基部分被替换，与 SNAP-tag 形成共价结合。

该体系包括两个步骤：亚克隆并表达目标蛋白为 SNAP-tag 融合蛋白，以及使用所选的 SNAP-tag 底物标记融合蛋白。在 SNAP-tag 质粒的产品说明中描述了 SNAP-tag 融合蛋白的表达。有关利用 SNAP-tag 底物进行融合蛋白标记的信息如下所述。

图 1：SNAP-Surface 549 结构（MW 1195.2 g/mol）

图 2：SNAP-Surface 549 在 pH 7.5 的缓冲液中的激发光谱（虚线）和发射光谱

产品类别:

SNAP-tag Substrates Products ,

Protein Labeling Products

应用:

Snap Surface Products,

Pulse Chase,

In vivo Imaging,

Receptor Internalization,

Protein Localization,

Protein Labeling Snap Clip

• 产品组分信息

  本产品提供以下试剂或组分：

  NEB #	名称	组分货号	储存温度	数量	浓度
  S9112S     -20       SNAP-Surface® 549 S9112SVIAL -20 1 x 50 nmol Not Applicable

• 特性和用法

  需要但不提供的材料

  • 表达 SNAP-tag 融合蛋白的细胞。可在目标蛋白 N 端或 C 端融合 SNAP-tag，但请注意，标签需要暴露在细胞质膜胞外表面，以便利用 SNAP-Surface 549 进行标记。
  • 组织培养材料和培养基
  • 荧光显微镜及适用的滤光装置
  • 转染试剂
  • DMSO

  激发

  560nm

  发射

  575nm

• 注意事项

  1. 贮存条件：
     SNAP-Surface 549 应避光贮存在 -20℃（长期贮存）或 4℃ 条件下（短期贮存，少于 4 周）。底物应避光和避免受潮。如果妥善贮存在 -20℃ 下，干燥贮存的底物至少可保持三年稳定，溶解在 DMSO 中时，至少可保持三个月稳定。

操作说明、说明书 & 用法

• 操作说明

  1. Cellular Labeling (S9112)
  2. Labeling Proteins in vitro (S9112)
  3. View the video “Fluorescent Labeling of COS-7 Expressing SNAP-tag Fusion Proteins for Live Cell Imaging” in the Journal of Visualized Experiments (JoVE)

工具 & 资源

• 选择指南

  • Comparison of SNAP-tag®/CLIP-tag™ Technologies to GFP
  • SNAP-tag® and CLIP-tag™ Substrate Selection Chart

FAQs & 问题解决指南

• FAQs

  1. Cellular Imaging and Analysis FAQs

• 问题解决指南

  • Labeling with SNAP-tag® Technology Troubleshooting Guide

• 实验技巧

  添加 DMSO 后，使用移液枪吸打混匀至少 10-20 次，然后剧烈涡旋处理至少 1 分钟整，以确保底物完全溶解。

  在完全培养基中稀释底物后，使用移液枪吸打混匀至少 10 次，有助于降低背景。

  增加底物浓度及/或反应时间通常会导致背景较高，并且不一定会增加信噪比（SNR）。

产品信息

该产品包含 50 nmol SNAP-Surface 594 底物，足以制备 10 ml 5  µM SNAP-tag 融合蛋白标记溶液。

SNAP-tag 蛋白标记体系能将目标蛋白以共价结合的形式，特异性地标记上任何分子。SNAP-tag 是一种基于哺乳动物 O⁶-烷基鸟嘌呤-DNA-烷基转移酶（AGT）的小蛋白。SNAP-tag 底物是苄基嘌呤和苄基氯嘧啶的衍生物。在标记反应中，底物的苄基部分被替换，与 SNAP-tag 形成共价结合。

该体系包括两个步骤：亚克隆并表达目标蛋白为 SNAP-tag 融合蛋白，以及使用所选的 SNAP-tag 底物标记融合蛋白。在 SNAP-tag 质粒的产品说明中描述了 SNAP-tag 融合蛋白的表达。有关利用 SNAP-tag 底物进行融合蛋白标记的信息如下所述。

图 1：在 pH 7.5 的缓冲液中将 SNAP-Surface 594 与 SNAP-tag 偶联后的激发光谱（虚线）和发射光谱

产品类别:

SNAP-tag Substrates Products ,

Protein Labeling Products

应用:

Snap Surface Products,

Pulse Chase,

In vivo Imaging,

Receptor Internalization,

Protein Localization,

Protein Labeling Snap Clip

• 产品组分信息

  本产品提供以下试剂或组分：

  NEB #	名称	组分货号	储存温度	数量	浓度
  S9134S     -20       SNAP-Surface® 594 S9134SVIAL -20 1 x 50 nmol Not Applicable

• 特性和用法

  需要但不提供的材料

  • 表达 SNAP-tag 融合蛋白的细胞。可在目标蛋白 N 端或 C 端融合 SNAP-tag，但请注意，标签需要暴露在细胞质膜细胞外表面，以便利用 SNAP-Surface 594 进行标记。
  • 组织培养材料和培养基
  • 转染试剂
  • 荧光显微镜及适用的滤光装置
  • DMSO

  激发

  606nm

  发射

  626nm

• 注意事项

  1. 贮存条件：SNAP-Surface 594 应避光贮存在 -20℃（长期贮存）或 4℃（短期贮存，少于 4 周）条件下。底物应避光和避免受潮。如果妥善贮存在 -20℃ 下，干燥贮存的底物至少可保持三年稳定，溶解在 DMSO 中时，至少可保持三个月稳定。

操作说明、说明书 & 用法

• 操作说明

  1. Cellular Labeling (S9134)
  2. Labeling Proteins in vitro (S9134)
  3. View the video “Fluorescent Labeling of COS-7 Expressing SNAP-tag Fusion Proteins for Live Cell Imaging” in the Journal of Visualized Experiments (JoVE)

工具 & 资源

• 选择指南

  • Comparison of SNAP-tag®/CLIP-tag™ Technologies to GFP
  • SNAP-tag® and CLIP-tag™ Substrate Selection Chart

FAQs & 问题解决指南

• FAQs

  1. Cellular Imaging and Analysis FAQs

• 问题解决指南

  • Labeling with SNAP-tag® Technology Troubleshooting Guide

• 实验技巧

  添加 DMSO 后，使用移液枪吸打混匀至少 10-20 次，然后剧烈涡旋处理至少 1 分钟整，以确保底物完全溶解。

  在完全培养基中稀释底物后，使用移液枪吸打混匀至少 10 次，有助于降低背景。

  增加底物浓度及/或反应时间通常会导致背景较高，并且不一定会增加信噪比（SNR）。

产品信息

This package includes 50 nmol of SNAP-Surface 649 substrate, sufficient to make 10 ml of a 5 μM SNAP-tag fusion protein labeling solution.

The SNAP-tag is a novel tool for protein research, allowing the specific, covalent attachment of virtually any molecule to a protein of interest. The SNAP-tag is based on mammalian O⁶-alkylguanine- DNA-alkyltransferase (AGT). SNAP-tag substrates are derivatives of benzylguanines and benzylchloropyrimidines. In the labeling reaction, the substituted benzyl group of the substrate is covalently attached to the SNAP-tag.

There are two steps to using this system: subcloning and expression of the protein of interest as a SNAP-tag fusion, and labeling of the fusion with the SNAP-tag substrate of choice. Expression of SNAP-tag fusion proteins is described in the documentation supplied with SNAP-tag plasmids. The labeling of the fusion proteins with the SNAPtag substrate is described below.

Excitation (dotted line) and emission spectra of SNAP-Surface 649 coupled to SNAP-tag in buffer at pH 7.5

产品类别:

SNAP-tag Substrates Products ,

Protein Labeling Products

应用:

Snap Surface Products,

Pulse Chase,

In vivo Imaging,

Receptor Internalization,

Protein Localization,

Protein Labeling Snap Clip

• 产品组分信息

  本产品提供以下试剂或组分：

  NEB #	名称	组分货号	储存温度	数量	浓度
  S9159S     -20       SNAP-Surface® 649 S9159SVIAL -20 1 x 50 nmol Not Applicable

• 特性和用法

  需要但不提供的材料

  • Cells expressing SNAP-fusion proteins. Proteins of interest can be expressed with the SNAP-tag as either an N- or a C-terminal fusion, but note that the tag needs to be exposed to the extracellular surface of the plasma membrane for labeling with SNAPSurface 649.
  • Tissue culture materials and media
  • Transfection reagents
  • Fluorescence microscope with suitable filter set
  • DMSO

  激发

  655nm

  发射

  676nm

• 注意事项

  1. Storage: SNAP-Surface 649 should be stored at –20°C (longterm) or at 4°C in the dark (short term, less than4 weeks). Protect the substrate from light and moisture.With proper storage at –20°C the substrateshould be stable for at least three years dry or3 months dissolved in DMSO.

操作说明、说明书 & 用法

• 操作说明

  1. Cellular Labeling (S9159)
  2. Labeling of Proteins in vitro (S9159)
  3. View the video “Fluorescent Labeling of COS-7 Expressing SNAP-tag Fusion Proteins for Live Cell Imaging” in the Journal of Visualized Experiments (JoVE)

FAQs & 问题解决指南

• FAQs

  1. Cellular Imaging and Analysis FAQs