上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
产品信息
产品来源
大肠杆菌菌株，携带有克隆自小牛胸腺的末端转移酶基因。
- 产品类别:
- DNA Labeling Products,
- DNA Manipulation Products
- 应用:
- A-tailing,
- PCR
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产品组分信息
本产品提供以下试剂或组分：
NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度 -
M0315S -20 Terminal Transferase M0315SVIAL -20 1 x 0.025 ml 20,000 units/ml Terminal Transferase Reaction Buffer Pack B0315SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X CoCl2 B0252SVIAL -20 1 x 1.4 ml 10 X
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M0315L -20 Terminal Transferase M0315LVIAL -20 1 x 0.125 ml 20,000 units/ml Terminal Transferase Reaction Buffer Pack B0315SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X CoCl2 B0252SVIAL -20 1 x 1.4 ml 10 X
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特性和用法
单位定义
1 单位是指在 50 反应体系中，37℃ 条件下，以 d(A)18 为引物，1 小时内将 1 nmol 的 dTTP 掺入酸不溶物所需的酶量。
反应条件
1X 末端转移酶反应缓冲液套装
Supplement with 0.25 mM CoCl2
Incubate at 37°C1X 末端转移酶反应缓冲液套装
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
(pH 7.9 @ 25°C)贮存溶液
50 mM KPO4
100 mM NaCl
1.43 mM β-ME
50% Glycerol
0.1% Triton® X-100
pH 7.3 @ 25°C热失活
75°C for 20 minutes
分子量
理论上的: 58000 道尔顿
5′ – 3′ 核酸外切酶
No
3′ – 5′ 核酸外切酶
No
链置换
No
单位活性检测条件
50 μl 反应体系，1X 末端转移酶反应缓冲液，0.72 μM d(A)18，0.2 mM dTTP 和 1 μCi [3H]- dTTP。
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优势和特性
应用特性
- 催化 DNA 的 3´ 末端添加同聚物
- 利用修饰碱基（如 ddNTP、DIG-dUTP）标记 DNA 3´ 末端
- TUNEL 检测（细胞凋亡的原位检测）
- TdT 依赖的 PCR
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参考文献
- Chang, L.M. and Bollum, F.J. (1986). CRC Crit. Rev. Biochem.. 21, 27-52.
- Roychoudhury, R., Jay, E. and Wu, R. (1976). Nucl. Acids Res.. 3, 101-116.
- Tu, C.P. and Cohen, S.N. (1980). Gene. 10, 177-183.
- Boule, J.B., Rougeon, F. and Papanicolaou, C. (2001). J. Biol. Chem. 276, 31388-31393.
操作说明、说明书 & 用法
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操作说明
- A Typical DNA Tailing Reaction
- A-Tailing (single nucleotide) with Terminal Transferase
FAQs & 问题解决指南
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FAQs
- Can Terminal Transferase be heat inactivated?
- Can Terminal Transferase label the 5′ end of DNA?
- Is Terminal Transferase supplied with dNTPs?
- Does Terminal Transferase require Co2+ as a divalent cation?
- Can just one dNTP be added to the end of DNA with Terminal Transferase?
- Does Terminal Transferase have a preference for one type of 3′ DNA end?
- What are the kM values for Terminal Transferase?
- Will Terminal Transferase add a non-radioactively labeled dNTP?