层粘连蛋白溶液, EHS 肉瘤源

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细胞培养容器涂层剂层粘连蛋白溶液, EHS 肉瘤源

层粘连蛋白溶液, EHS 肉瘤源


  层粘连蛋白是大部分组织的基底膜主要成分,对基底膜的组成及功能起关键作用。层粘连蛋白的生物活性包括促进细胞的粘着、移动、增殖、轴突的生长和分化等等。用作细胞培养表面涂层,主要促进上皮细胞、神经细胞、肝细胞和肌肉细胞的细胞粘着。

 

产品概要


● 浓度:0.5mg/mL(首批产品实效)

● 组成:50mmol/l Tris-HCl(pH7.4), 150mmol/l NaCl

● 经过 0.2 um 滤器过滤灭菌

● -80℃ 保存(-20℃ 可稳定保存1年)



使用例


层粘连蛋白溶液, EHS 肉瘤源

 

  用 D-PBS(-) 将层粘连蛋白调制成各浓度,按 0.3mL/well 涂在 24 孔板的每个孔中,37℃ 条件下,培养过夜。洗出上清液,牛血清封闭后,种植 TIG-3 细胞(5×104个/mL),37℃ 培养 90 分钟。然后洗脱未粘着细胞,用胰蛋白酶 EDTA 溶液,剥离粘着细胞,测定细胞数量。

 

◆重要使用的细胞种类


● 上皮细胞

● 神经细胞

● 肝细胞

● 肌细胞


使用方法(例)


1.在4℃温度下或冰上缓慢溶解。

2.将 D-PBS(-) 或培养基稀释为目标浓度(5~30 ug/mL)。

3.将适量稀释好的层粘连蛋白溶液加入已涂层的容器中。

4.37℃ 条件下培养1小时,或4℃条件下培养过夜。

5.去除涂层溶液。

6.用 D-PBS(-) 清洗2~3次。

7.种植细胞。

 

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
120-05751 Laminin Solution, from Mouse EHS Tumor 1mg 细胞培养用

抗小鼠血清素转运蛋白,大鼠单克隆抗体(R5-3-2) 识别天然形态的血清素转运蛋白

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识别天然形态的血清素转运蛋白抗小鼠血清素转运蛋白,大鼠单克隆抗体(R5-3-2)                              识别天然形态的血清素转运蛋白

抗小鼠血清素转运蛋白,大鼠单克隆抗体(R5-3-2)

 


  本产品是根据DNA免疫法建立的特异性识别天然形态的血清素转运蛋白的大鼠单克隆抗体。血清素转运蛋白是一种12回跨膜型的膜蛋白。有报道称,血清素运转蛋白可以调节与记忆,进食,睡眠等相关的羟色胺的量,并与精神疾病有关联。可确认它广泛存在于大脑的中缝核,大脑皮质,海马体等,且在末梢血小板中也有表达。

 


◆特点


● 可用于免疫组织染色

● 识别天然形态的血清素转运蛋白

 


◆产品概述


● Clone NO.:R5-3-2

● 亚类:大鼠IgG2a・K

● 交叉性:小鼠(未验证其他动物物种)

● 适用:流式细胞术(1:100~10,000)
           免疫组织染色(1:100)

 


使用例


免疫组织染色


抗小鼠血清素转运蛋白,大鼠单克隆抗体(R5-3-2)                              识别天然形态的血清素转运蛋白


在实验的前额叶皮层中,血清素转运蛋白mRNA的表达呈阳性。

(数据提供:大阪大学牙科研究科 田熊老师,长谷部老师)



◆产品列表


产品编号

产品名称

规格

包装

011-26911

Anti Mouse Serotonin Transporter,Rat Monoclonal Antibody(R5-3-2)

抗小鼠血清素转运蛋白,大鼠单克隆抗体(R5-3-2)

免疫化学用

10 μL

017-26913

50 μL



◆相关产品


产品编号

产品名称

规格

包装

016-25981

Anti Mouse 5-HT1A Receptor,Rat Monoclonal Antibody(4A6)
抗小鼠5-HT1A受体,大鼠单克隆抗体(4A6)

免疫化学用

50 μL

013-25991

Anti Mouse 5-HT2C Receptor,Rat Monoclonal Antibody(6D2)
抗小鼠5-HT2C受体,大鼠单克隆抗体(6D2)

免疫化学用

50 μL

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产品编号 产品名称 产品规格 产品等级

重组赖氨酰内肽酶RLys-C

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重组赖氨酰内肽酶RLys-C重组赖氨酰内肽酶RLys-C

重组赖氨酰内肽酶RLys-C



◆概述


赖氨酰内肽酶最早从土壤细菌无色杆菌Achromobacter lyticus中分离得到,能够特异性识别与切割肽链中Lys羧基端肽键,常被用于蛋白测序及Lys-X化合物的酶催化合成。

艾美迪选用Achromobacter lyticus来源的,克服大肠杆菌重组表达技术难题进行制备。本品最适pH 9.0~9.5,等电点为pH 6.9~7.0;最适反应温度30~37℃,50℃以上稳定性下降。在适宜温度下,该酶稳定性良好,在4 mol/L尿素或0.2%SDS溶液中30℃孵育6 hr后,生物活性未发生降低。可广泛用于蛋白组学分析,蛋白、抗体类药物质量检测,多肽、蛋白类产品制备工艺中。

 


◆特性


● 高比活性,高特异性,可消化难以酶切的位点,空间构象复杂或疏水性较强的蛋白(如膜蛋白)同样适用

● 活性稳定,尿素、乙腈等变性剂耐受能力强

● 批量化生产,连续批次质量稳定,批间差小

● 高纯度,重组表达避免了可能存在的杂酶残留(e.g. Arg-C,Lys-N等)



◆来源


重组 E. coli 菌株,其克隆有来自的无色杆菌(A. lyticus蛋白酶I基因。

 


◆酶活定义


0.2 mol/L pH 9.0Tris-HCl缓冲中,温度为37±2℃的条件下, 1 min催化底物AC-Lys-PNA生成1 μmol PNA所需的酶量为一个活性单位(AU)。

 


◆纯度


将 rLys-C以DTT 还原处理后, 还原电泳显示纯度>99%


重组赖氨酰内肽酶RLys-C

◆使用方法


本品为冻干粉,使用前先使用超纯水或25 mmol/L Tris-HCl,pH 8.0~8.5溶解。



◆应用实例


RLys-C酶切重组人门冬胰岛素原(Pro-Insulin-Aspart)

底物Pro-Insulin-Aspart分子量约为7 kDa,含有3个赖氨酸(K),采用 Lys-C 酶切的理论肽段示意图如下:


重组赖氨酰内肽酶RLys-C

酶切条件酶与底物的质量比为 1:10000,在50 mM Tris-HCl,pH 8.5中37℃酶切16 小时。


重组赖氨酰内肽酶RLys-C


峰 A:酶切前肽段 Pro-Insulin-Aspart

峰 B:酶切后 B链+C肽+A链(去引导肽)

峰 C:酶切后B链+A链(去引导肽和C肽)



名称 

RT 

Area 

Area% 

质谱量 

酶切位点 

对应肽段

Pro-Insulin-Aspart
    未酶切对照 

10.45

155.045

100%

7096.94

酶切前

以IMD-RLys-C-酶切产物
(酶:底物1:10000)

11.57

201.6

100%

5724.54

B链+A链

以其他公司重组Lys-C酶产物
(酶:底物1:10000)

10.49

146.9

61.78%

7096.94

酶切前

10.62

81.5

34.29%

6006.84

① 

B链+C肽+A链

艾美迪的 RLys-C 酶切产物为切除引导肽和 C 肽的门冬胰岛素前体,酶切位点①②③均酶切完全。

而其他公司产品仅部分切开酶切位点①,切除效率仅为34.29%,酶切位点②③均未被酶切,未能得到序列正确的门冬胰岛素前体。

◆与其他公司产品对比


底物 

酶切位点对比 

艾美迪 

其他公司重组Lys-C

重组人门冬胰岛素原

(Pro-Insulin Aspart)

分子量约为7 kDa,含有3个K

①PK

++ 

+

②DK

++ 

③GK

++ 

重组人普通胰岛素原

(Pro-Insulin)

分子量约为7 kDa,含有3个K

①PK 

++ 

+

②PK 

++ 

+

②AK 

++ 

+

PJ-10S小肽
分子量约为1 kDa,含有3个K

①DK 

++ 

+


相同底物浓度的酶切条件下艾美迪的 RLys-C 的酶切效率显著高于其他品牌同类产品。以生成的肽段 YDDDDK 计算,艾美迪的RLys-C 的酶切率比其他品牌同类产品高约9倍;以生成的肽段 RGWK 计算,艾美迪的RLys-C的酶切效率比其他品牌同类产品高约8.6倍。



◆产品信息

产品编号 产品名称 规格
RLYS-C0401

RLys-C

重组赖氨酰内肽酶

20 μg
RLYS-C0403

RLys-C

重组赖氨酰内肽酶

1 mg



◆相关产品


产品编号 产品名称 规格
RME0101

    Lys-C + Trypsin

重组赖氨酰内肽酶/重组胰蛋白酶混合装

20 μg
RME0102

Lys-C + Trypsin

重组赖氨酰内肽酶/重组胰蛋白酶混合装

20 μg×5

产品编号 产品名称 规格 储存条件 其他
IRLys-C0401 immobilized RLys-C
固定化重组赖氨酰内肽酶
1.0 mL -15℃以下 1.0 mL含1.0 mg
MDRK0401 RLys-C ELISA Kit
重组赖氨酰内肽酶检测试剂盒
96孔 -15℃以下

检测范围:

1.0~4000 ng/mL


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产品编号 产品名称 产品规格 产品等级

​anti-Asc, pAb (AL177) 凋亡相关斑点样蛋白 Asc 检测及功能抗体

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​anti-Asc, pAb (AL177)                              凋亡相关斑点样蛋白 Asc 检测及功能抗体anti-Asc,pAb (AL177)

凋亡相关斑点样蛋白 Asc 检测及功能抗体


Asc 促进半胱天冬酶介导的细胞凋亡。这种促凋亡活性主要通过半胱天冬酶-9 的活性介导。它是炎症小体的一个组成部分,炎症小体是包含 NLRP3/NALP3、CARD8 和 CASP1 的蛋白复合体,其功能是激活促炎性半胱氨酸蛋白酶。


产品详情

别名

 Pycard、甲基化诱导沉默的靶点1、TMS1、Caspase Recruitment Domain-containing Protein 5、

 细胞凋亡相关Speck样蛋白 CARD、CARD5

产品类型

 多克隆抗体

免疫动物/宿主

 兔

免疫原/抗原

 对应于 N 末端人 Asc 的氨基酸合成肽.

应用

 免疫细胞化学(1:200)
 免疫组织化学(1:500;paraffin sections)
 免疫沉淀(1:200)
 Western Blot(1:1000)
 功能应用(见参考文献 [1])

交叉反应性

 人、小鼠

特异性

 识别人和小鼠 Asc.

纯度

 表位亲和纯化

浓度

 1 mg/mL

配方

 液体,溶解在含有 10% 甘油和 0.02% 叠氮钠的 PBS 中

运输

 干冰

短时间储存

 +4°C

长时间储存

 -20°C

参考文献

[1]

NALP3 forms an IL-1beta-processing inflammasome with increased activity in Muckle-Wells autoinflammatory disorder: L. Agostini,et al.; Immunity 20, 319 (2004)


[2]

P2X7 Receptor Differentially Couples to Distinct Release Pathways for IL-1beta in Mouse Macrophage: P. Pelegrin, et al.; J. Immunol. 180, 7147 (2008)


[3]

Inflammatory role of ASC in antigen-induced arthritis is independent of caspase-1, NALP-3, and IPAF: L. Kolly, et al.; J. Immunol. 183, 4003 (2009)


[4]

Activation of autophagy by inflammatory signals limits IL-1b production by targeting ubiquitinatedinflammasomes for destruction: C.-S. Shi, et al.; Nat. Immunol. 13, 255  (2012)


[5]

NLRP3 is activated in Alzheimer's disease and contributes to pathology in APP/PS1 mice: M.T. Heneka, et al.;  Nature 493, 674 (2013)


[6]

Promyelocytic leukemia protein interacts with the apoptosis-associated speck-like protein to limit inflammasome activation: J.K. Dowling, et al.; J. Biol. Chem. 289, 6429 (2014)


[7]

Localization and functionality of the inflammasome in neutrophils: M. Bakele, et al.; J. Biol. Chem. 289, 5320 (2014)


[8]

The adaptor ASC has extracellular and 'prionoid' activities that propagate inflammation: B.S. Franklin, et al.; Nat. Immunol. 15, 727 (2014)


[9]

The NLRP3 inflammasome is released as a particulate danger signal that amplifies the inflammatory response: A. Baroja-Mazo, et al.; Nat. Immunol. 15, 738 (2014)


[10]

Aging-associated TNF production primes inflammasome activation and Nlrp3-related metabolic disturbances: F. Bauernfeind, et al.; J. Immunol. 197, 2900 (2016)


[11]

An Investigation of Inflammatory and Metabolic Blood-Based Biomarkers of Cognitive Decline: H. Wolfe; Thesis Univ. Dublin, Trinity College Dep. of Physiol. (2018)


 

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
AG-25B-0006-C100 anti-Asc, pAb (AL177)
 Asc多抗(AL177)
100 μg