Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶（高浓度） |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶（高浓度）的浓度为标准 Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶（NEB＃M0658）的 20 倍，是希望自己建立和优化体外转录反应体系的有经验用户的理想选择。该酶配有 Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶反应缓冲液和氯化镁溶液，可进一步调试不同条件，例如核苷酸浓度。

体外转录除了 RNA 聚合酶外还涉及多种成分，包括核糖核苷酸、无机焦磷酸酶和 RNase 抑制剂，这些均可单独购买。详细信息请参考“相关产品”部分

Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶是一种经基因工程改造的 DNA 依赖性 RNA 聚合酶，对 T7 噬菌体启动子具有高度特异性，跟野生型噬菌体 T7 RNA 聚合酶相比，它可在更高的温度下进行反应。Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶的最佳温度为 50-52°C。

产品来源

An E.coli strain that carries an engineered His-tag T7 RNA Polymerase gene.

产品类别:
RNA Synthesis In vitro Transcription (IVT)

应用:
Transcription-Mediated and NASBA Amplification

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0470T     -20    
        Hi-T7® RNA Polymerase (High Concentration) M0470TVIAL -20 1 x 0.05 ml 1,000,000 units/ml
        Hi-T7® RNA Polymerase Reaction Buffer B0658AVIAL -20 1 x 1 ml Not Applicable
        MgCl2 Solution B2534AVIAL -20 1 x 0.5 ml 0.2 M

  • 特性和用法

    单位定义

    One unit is defined as the amount of enzyme required to incorporate 1 nmol of ATP into acid-insoluble material in 1 hour at 50°C

    反应条件

    1X Hi-T7® RNA Polymerase Reaction Buffer
    Incubate at 50°C

    1X Hi-T7® RNA Polymerase Reaction Buffer
    40 mM Tris-HCl
    4 mM MgCl2
    50 mM NaCl
    2 mM spermidine
    1 mM DTT
    (pH 7.5 @ 25°C)

    贮存溶液

    50 mM Tris-HCl
    100 mM NaCl
    1 mM EDTA
    1 mM DTT
    50% Glycerol
    0.1% (w/v) Triton® X-100
    pH 7.9 @ 25°C

    单位活性检测条件

    1X Hi-T7 RNA Polymerase Reaction Buffer, supplemented with 0.5 mM each ATP, UTP, GTP, CTP and 1 µg T7 phage DNA in 50 µl reaction volume.

  • 优势和特性

    应用特性

    • mRNA 用于体外翻译、显微注射以及转染
    • 放射标记的 RNA 探
    • 非同位素 RNA 标记
    • 靶基因的向导 RNA
    • RNA 的结构、加工以及催化作用的研究
    • 基因表达实验中的反义 RNA
    • RNA 扩增
    • 等温扩增

  • 相关产品

    相关产品

    • rNTP 套装
    • rNTP 混合液
    • 小鼠 RNase 抑制剂
    • rNTP 混合液
    • T2040 Monarch RNA Cleanup Kit 50 ug
    • m0251-t7-rna-polymerase
    • 无机焦磷酸酶（大肠杆菌）

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for Standard RNA Synthesis

  • 应用实例

    • Scaling of High-Yield In vitro Transcription Reactions for Linear Increase of RNA Production

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Can I use a different reaction buffer for in vitro transcription with Hi-T7 RNA Polymerase?
    2. Does Hi-T7 RNA Polymerase recognize the same promoter sequence as the wild-type T7 RNA Polymerase from bacteriophage?
    3. At what temperature is Hi-T7 RNA Polymerase active?
    4. What are the main causes of reaction failure when using Hi-T7 RNA Polymerase?
    5. What templates can be used for in vitro transcription with Hi-T7 RNA Polymerase?
    6. Can Hi-T7 RNA Polymerase transcribe off of an uncut plasmid?