Bst DNA Polymerase
链置换酶
◆产品说明
本产品具有5’→ 3’DNA聚合酶活性与链置换活性，是一款自动从模板双链DNA的氢键解离，然后后合成新DNA链的酶。由于其特性，耐热性链置换DNA聚合酶无需DNA的双链解离，即可在恒定温度下合成DNA，且合成不受DNA二级结构的抑制。
特点
● 具有5’→ 3’DNA聚合酶活性与链置换活性
● 可在恒定温度下合成DNA
● 适用于合成GC含量高的DNA链
● 合成不受DNA二级结构抑制
应用
● 利用链置换活性的应用（等温基因扩增法等）
Bst DNA Polymerase
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理想反应温度
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60°C～65°C
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失活时间*1
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80°C、5 min
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*1 将酶原液直接热变性时的失活温度
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来源
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Geobacillus stearothermophilus
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活性
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8 units/μL
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单位定义
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1 unit指以小牛胸腺DNA为引物/模板，在65°C，30 min的条件下将10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物的
酶量。
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储存液成分
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10 mmol/L Tris-HCl（pH 7.5）, 1 mmol/L DTT, 0.1% Tween 20, 0.1 mmol/L EDTA, 50% Glycerol
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酶反应条件
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随酶附带10×的酶反应专用缓冲液（0.5 mL×1）。如反应总体积为50 μL，添加5 μL的酶反应专用缓冲液
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◆产品组成
Bst DNA Polymerase（1,600 units）
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产品组分
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容量
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保存
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Bst DNA Polymerase（8 units/μL）
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200 μL × 1
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-20°C
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10 × Bst Reaction Buffer（80 mmol/L Mg2+）
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500 μL × 1
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-20°C
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◆应用实例
实验案例1 LAMP法中的运用
LAMP法 反应条件
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3.0% Agarose 21
TAE凝胶电泳
EtBr染色
M：Gene Ladder Wide 1
1：A 公司Bst DNA Polymerase
2：本公司Bst DNA Polymerase
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Candidatus Liberibacter asiaticus DNA
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1 × 106 copies
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FIP*
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40 pmol
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BIP*
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40 pmol
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F3 Primer*
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5 pmol
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B3 Primer*
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5 pmol
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Loop Primer F*
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20 pmol
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Loop Primer B*
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20 pmol
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dNTPs Mixture
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1.4 mM each
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10 × Bst Reaction Buffer
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2.5 μL
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Bst DNA Polymerase
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8 units
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Total
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25 μL
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反应
*引物序列
FIP: 5'-GCATGCCGAGGATCAATGCCTTGCTTAAAGAGCGTGCTACG-3'
BIP: 5'-TATGCCTAATGGCACGGGGGTAAGCTTCATCCGCCTTCGA-3'
F3 Primer: 5'-TGGGTTAAGTGATGCTGTGG-3'
B3 Primer: 5'-CAACAATATCAGCCCCTGCT-3'
Loop Primer F: 5'-TCTCAACTGTTTCATCAAACCTAGC-3'
Loop Primer B: 5'- CGTGGCGGTTTTTGCTACA-3'
实验案例2 RCA法评估Bst DNA Polymerase的耐热性与理想反应温度
RCA法 反应溶液组成
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M13mp18 single strand DNA
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40 ng
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Universal primer
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50 mM
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dNTPs Mixture
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1.4 mM each
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Tris-HCl (pH 8.8 at 25°C)
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20 mM
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KCl
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10 mM
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(NH4)2SO4
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10 mM
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MgSO4
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8 mM
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Tween 20
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0.10%
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Betaine
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0.8 M
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Bst DNA Polymerase
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4 units
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Total
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20 μL
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反应条件
结果
条带
M： Gene Ladder Wide 1 (产品编号313-06961)
D： 模板 DNA (M13mp8 single strand, 产品编号319-00841)
引物序列（Universal Primer）
5'-GTTTTCCCAGTCACGACGTTGTA-3'
电泳条件
0.7% Agarose S / TAE凝胶电泳
EtBr染色
使用不含SDS的Loading Buffer
备注
本实验为比较两种Bst DNA Polymerase，使用相同的反应液组成进行反应。在RCA法中使用各种酶配套的专用缓冲液时，须进行预实验探究反应体系。
◆相关信息
备注
● 本产品为实验研究用试剂。不可作为医药品使用。
● 检测Candidatus Liberibacter asiaticus的LAMP引物组合是国立研究开发法人 农业、食品产业技术综合研究机构 九州冲绳农业研究中心灵活运用先进技术，在农林水产研究高度化事业“抑制顽固性疾病柑橘绿化病传播的技术开发”中开发的产品。
License
● LAMP（Loop-mediated Isothermal Amplification）法由荣研化学株式会社持有专利权。
◆产品列表
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产品编号
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产品名称
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包装
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311-07481
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Bst DNA Polymerase
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1600 units
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◆相关产品
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产品编号
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产品名称
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包装
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319-07281
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Csa DNA Polymerase
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1600 units
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319-07301
|
96-7 DNA Polymerase
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1600 units
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312-07271
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dNTPs Mixture（25 mM each）
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400 μL
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※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
