新芝scientz CRY-3细胞融合仪

新芝scientz CRY-3细胞融合仪

新芝scientz CRY-3细胞融合仪

  • 商品品牌: 新芝Scientz
    商品编号:CRY-3
  • 商品价格: 请与我们联系
  • 新芝scientz CRY-3细胞融合仪-新芝Scientz-CRY-3

    • 波形:方波
    • 品牌属性:国产
    生命科学仪器|||细胞培养|||细胞融合仪|||新芝scientzCRY-3细胞融合仪
    细胞融合仪


    新芝scientz CRY-3细胞融合仪

    产品概述

    该仪器适用于细胞杂交、细胞融合、可在倒置显微镜下直接观察,

    可用于微生物学、动物医学、生物工程等方面的研究。

    与传统的化学融合方法相比,具有对细胞无毒性、融合效率高,

    方便快速等特点。可选购各种平型电极和针型电极。

    文章举例:

    1、《中国养猪学报》2001、12“香港2-细胞胚胎电融合参数测定”

    上海市农业科学院畜牧兽医研究所;

    2、《上海农业学报》2004、20(1)23-25“猪胚胎细胞核移植重组胚发育能力研究”

    上海市农业遗传育种重点实验室,中国科学院上海细胞生物学研究所,

    中国科学院落上海实验动物中心;

    3、《食品科技》-2007年32卷7期“产赤酵母融合株RH-L4-F9遗传学和

    生物学特征的饿研究”吉林农业大学食品工程学院落


    商品属性

    • 波形:方波
    • 品牌属性:国产
    商品属性
    商品名称 新芝scientz CRY-3细胞融合仪-CRY-3-新芝Scientz
    型号 CRY-3
    类别 生命科学仪器|||细胞培养|||细胞融合仪|||新芝scientzCRY-3细胞融合仪
    品牌 新芝Scientz
    品牌简介 新芝Scientz
    关键字 细胞融合仪,细胞,可调,上海,上海市,电极,胚胎

    新芝scientz CRY-3细胞融合仪

    Cellnest μ-piece 由人I型胶原蛋白重组多肽形成的新型细胞支架

    • 产品特性
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    • 参考文献

    由人I型胶原蛋白重组多肽形成的新型细胞支架Cellnest μ-piece                              由人I型胶原蛋白重组多肽形成的新型细胞支架

    Cellnest μ-piece

    Cellnest μ-piece是由人I型胶原蛋白重组多肽经过交联处理所形成的、具有特殊结构的细胞支架。

    使用时仅需与细胞混合,就可装配成可防止细胞团中心发生坏死的三维细胞结构体(CellSaic),可应用于细胞移植实验。

     

    ◆特点

    何谓Cellnest


    Cellnest是一种以不含有任何动物源成分的酶所产生的重组多肽,由FUJIFILM开发。

    其序列不含人I型胶原抗原部位,因此容易被生物体吸收分解。

    细胞与独特花瓣形结构的微片混合培养,可形成三维细胞结构体

    Cellnest μ-piece                              由人I型胶原蛋白重组多肽形成的新型细胞支架

    高细胞存活率


     in vitro LIVE/DEAD染色

    Cellnest μ-piece                              由人I型胶原蛋白重组多肽形成的新型细胞支架

    LIVE:Calcein(绿)    DEAD:EthD-1(红)


    在hMSC制作的多细胞球状体中可观察到散布的死细胞;用μ-piece制作的CellSaic中,可观察到很多活细胞

    ■ in vitro ATP assay (Day 7)


    Cellnest μ-piece                              由人I型胶原蛋白重组多肽形成的新型细胞支架

    在hMSC(2×104 cells)中进行ATP定量。从图示中可看到与Spheroid的存活率相比,CellSaic的存活率高约2倍。

    细胞存活率高,可应用于细胞移植。微片易于被生物体分解、吸收,是安全型的材料(胶原蛋白重组多肽)

    Cellnest μ-piece                              由人I型胶原蛋白重组多肽形成的新型细胞支架

    大鼠模型由于大脑动脉阻塞引起右脑梗塞,在其梗塞的部位局部移植入CellSaic(BMSC+μ-piece)。将计算左转行动次数并进行评价,作为症状改善的简单指标。

    Cellnest μ-piece                              由人I型胶原蛋白重组多肽形成的新型细胞支架

    与仅投与细胞悬液相比,可确认移植进CellSaic对左转行动有改善效果。

    ◆Cellnest μ-piece制作的CellSaic是什么

    ● 在细胞球状体中紧密嵌入细胞支架,抑制细胞死亡

    ● 移植后易于血管导入

    细胞球状体

    400 μm以上厚度的细胞团,从中心位置开始细胞出现死亡(中心坏死)


    Cellnest μ-piece                              由人I型胶原蛋白重组多肽形成的新型细胞支架

    CellSaic

    以细胞支架与细胞间的间隙,或者是细胞支架自身作为氧气、营养、废弃物的通道

    Cellnest μ-piece                              由人I型胶原蛋白重组多肽形成的新型细胞支架

    Cellnest μ-piece                              由人I型胶原蛋白重组多肽形成的新型细胞支架

    CellSaic制作步骤概要

    将μ-piecec(0.1 mg/mL)和细胞(1.0×105 cells/mL)的悬液按照200 μL/well加入96孔U型吸附处理板进行培养。用板式离心机进行离心(600 g×5 min),CO2 孵育(37℃)1~2日,即可完成。

    Cellnest μ-piece                              由人I型胶原蛋白重组多肽形成的新型细胞支架

    ◆产品列表


    产品编号 产品名称 包装
    633-44791 cellnest μ-piece  10 mg


    ※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。


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    产品编号 产品名称 产品规格 产品等级

    M65® 和M65 EpiDeath® ELISA试剂盒

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    M65® 和M65 EpiDeath® ELISA试剂盒M65® 和M65 EpiDeath® ELISA试剂盒


    细胞死亡通过两种主要机制发生,即细胞坏死和细胞凋亡。细胞凋亡是一个自然发生的过程,对组织和器官的发育和再生至关重要,但细胞坏死是由进行性细胞损伤引起的病理过程。

     

    细胞坏死是一种细胞死亡机制,通常由细胞外部因素激活,例如疾病、毒性或组织创伤,这些因素会对细胞造成严重损害。最近,科学家还观察到细胞的程序性坏死。坏死的细胞被破坏,并以不受控制的方式将细胞内容物释放到细胞外空间,通常会引发周围组织的炎症反应。

    ◆总细胞死亡中的角蛋白18


    M65® 和M65 EpiDeath® ELISA试剂盒

    在细胞死亡过程中释放到细胞外空间的蛋白中,其中包括中间丝蛋白角蛋白18 (K18),这是一种在上皮细胞组织中高度表达的蛋白。

     

    在细胞坏死期间,细胞膜失去其完整性,K18以完整形式释放到细胞外空间。另一方面,在细胞凋亡期间,caspase酶激活并将细胞内蛋白切割成更小的片段。因此,当细胞因凋亡而溶解时,片段形式的K18就会被释放出来。

     

    M5和M6角蛋白18抗体可与不受caspase酶切割影响的K18的表位结合,从而可检测K18的总水平。因此这两个抗体可检测细胞总死亡(细胞凋亡和细胞坏死)。

     

    ◆M65系列ELISA试剂盒

    M65® ELISA和M65 EpiDeath® ELISA试剂盒均基于独特的M5和M6抗体,可检测K18的总水平,从而检测因任何原因导致的总细胞死亡量。

    ◆产品列表

    产品编号

    产品名称

    规格

    10020

    M65® ELISA细胞死亡
    M65® ELISA试剂盒

    96 wells

    10040

    M65 EpiDeath® ELISA
    细胞死亡M65 EpiDeath® ELISA试剂盒

    96 wells

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    产品编号 产品名称 产品规格 产品等级

    CryoScarless ® DMSO-Free 高存活率细胞冻存液

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    CryoScarless ® DMSO-Free                              高存活率细胞冻存液

    高存活率细胞冻存液

    CryoScarless® DMSO-Free

    CryoScarless® DMSO-Free 是一款不含蛋白和 DMSO,适用于多种细胞的细胞冻存液。各种细胞在解冻后具有很高的培养活率,且维持了干细胞的多分化性(未分化状态)。


    ※ 本产品仅供科研,不可用于科研外其他用途。

    关于含有DMSO冻存液的问题

    DMSO作为普通细胞冷冻保护成分常被添加到冻存液中,但同时也是对人体有害的成分,且极易被皮肤吸收。除具有细胞毒性外,如同下列论文所述,是影响细胞分化的因子之一。因此,为获得更精确的实验结果,无DMSO的细胞保存是必须的。

    ● 使用DMSO将人骨髓白血病细胞株 HL-60 分化为粒细胞。1

    ● 使用DMSO将小鼠间充质干细胞分化为心肌细胞。 2

    ● 使用含有DMSD的冻存液冻存人ES细胞发现未分化标记Oct-4的表达降低。 3

     


    参考文献


    1. Jiang, G., et al., Int. Immunopharmacol.(7), 1204~1213 (2006).

    2. Young, D. A., et al., Biochem. Biophys. Res. Commun.322 (3), 759~765 (2004).

    3. Katkov, I. I., et al., Cryobiology, 53 (2), 194~205 (2006).

    ◆特点


    ● 不含血清和蛋白,因此不受白蛋白和球蛋白等蛋白的影响。

    ● 不受DMSO毒性和蛋白影响,可安全且高活率地冻存细胞。

    ● 大部分细胞在冻存后复苏,存活率可达90%以上。

    ● 已有人/小鼠的正常细胞、肿瘤细胞株、干细胞等各种细胞的冻存应用。

    ● 冻存后可维持干细胞的分化性能。

    ● 同样适用于无血清培养。

    ● 经无菌测试确认不含细菌、真菌与支原体污染。

    ● 本产品可在4°C下长期保存。(有效期2年)。 


    ※ 使用台盼蓝处理CryoScarless保存的细胞时,请务必清洗细胞。

    ◆应用实例1


    大鼠间充质干细胞分化能力


    CryoScarless ® DMSO-Free                              高存活率细胞冻存液


    确认使用本产品冻存的大鼠间充质干细胞在复苏后的分化能力,并与未冻存组以及10% DMSO保存的细胞进行比较。结果显示,使用本产品冻存的细胞皆维持良好的分化性能。

    大鼠间充干细胞的存活率


    CryoScarless ® DMSO-Free                              高存活率细胞冻存液


    检测使用本产品冻存(1周)的大鼠间充质干细胞在复苏后的存活率以及 6 h后的存活率,并与10% DMSO保存的情况进行比较。本产品无论是在刚复苏(0 h),还是贴壁后(6 h)皆显示更高的存活率。

    ◆应用实例2


    使用 CryoScarless® DMSO-Free 简单冻存后的小鼠 ES 细胞


    实验方法:


    将小鼠 ES 细胞(FKHR+/+)在明胶包被的96孔板上于37°C培养48 h后,进行简单地冻存。吸走培养基并用PBS清洗,然后分别添加10%DMSO/培养基,或CryoScarless® DMSO-Free,在-80°C下保存。24 h后迅速复苏,添加加热至37°C的培养基,在37°C下继续培养。6 h后使用光学显微镜观察相衬图像。


    CryoScarless ® DMSO-Free                              高存活率细胞冻存液

    结果:


    可观察到在10%DMSO/培养基中保存的小鼠ES细胞在复苏后活细胞减少(左图),而在 CryoScarless® DMSO-Free 中保存的小鼠ES细胞状态得到改善,可观察到大部分的活细胞。

    讨论:


    在对多个转基因克隆的培养板一起进行冻存时(简易冻存),使用CryoScarless® DMSO-Free 更加方便。利用 CryoScarless® DMSO-Free 进行冻存,存活细胞更多,更易于未分化小鼠ES细胞的传代培养(在一定细胞密度下每2天传代一次),并可顺利进行分化实验。

    数据提供


    熊本大学发育医学研究所 干细胞部门 组织干细胞领域 田村洁美老师


    CryoScarless ® DMSO-Free                              高存活率细胞冻存液

    小川峰太郎老师(组织干细胞领域教授:中间),田村洁美老师(右起2)与研究室成员

     


    ◆应用实例3


    对于人牙髓来源间充质干细胞的体内实验,CryoScarless® DMSO-Free 拥有更出色的冻存能力


    日本牙科大学生命牙学部 发育、再生医科讲座 中原贵教授

    生命牙科学讲座 望月 真衣 助教


    Establishment of xenogeneic serum-free culture methods for handling human dental pulp stem cells using clinically oriented in-vitro and in-vivo conditions.

    Stem Cell Research & Therapy,9:25, (2015).

     


    背景


    由于再生医学不断普及,因此急需确立可安全地培养从患者获得的间充质干细胞的方法。近年来,通过牙科治疗从拔牙的牙组织(牙髓)中获得的间充质干细胞,显示比骨髓干细胞高3~4倍的高增殖性,且没有伴随染色体异常的细胞变化。而且牙髓干细胞拥有与骨髓干细胞相同的多分化性能。由于在体外培养可大量增殖,灵活利用低癌变和成瘤风险的牙髓干细胞,对于确保医疗安全性的再生医学来说是一个极具吸引力的选择。

    作为再生医学中必不可少的"细胞冻存",已经证明CryoScarless® DMSO-Free(BioVerde公司)是一款优秀的细胞冻存液。换言之,使用该细胞冻存液冻存的人牙髓干细胞拥有与未经冻存培养的牙髓干细胞相同的增殖能与多分化能力,且未发现染色体异常。

    本文着眼于牙髓干细胞活跃的增殖能力,并证实了CryoScarless® DMSO-Free不会影响细胞增殖能力。

    方法及结果


    从20~37岁成人拔下来的智齿分离牙髓细胞并进行无血清培养,培养至传代数为1时使用CryoScarless® DMSO-Free冻存。3个月后再次培养冻存的细胞,传代数到3时进行以下的细胞评价。同时,对未经冻存的牙髓细胞也进行了相同的评价。

    使用相差显微镜观察细胞形态,确认纺锤形的成纤维细胞形态没有发生变化(图-1)。根据增殖曲线分析的结果,经过12天的培养,呈现一致的细胞增殖模式,两者间在统计学上的没有显著差异(图-2)。另外,通过Bromodeoxyuridine(BrdU)进行细胞分裂能力分析的结果显示,可观察到对数生长期内大量的BrdU阳性细胞,细胞数在统计学上没有显著差异(图-3)。

    CryoScarless ® DMSO-Free                              高存活率细胞冻存液

    图-1 人牙髓干细胞的相差显微镜图像

    无论CryoScarless® DMSO-Free冻存(左)还是未经冻存(右)的细胞都呈现出相同的成纤维细胞样形态。

    CryoScarless ® DMSO-Free                              高存活率细胞冻存液

    图-2 人牙髓干细胞增殖曲线分析


    细胞培养期间,未发现两者在统计学上的显著差异。

    CryoScarless ® DMSO-Free                              高存活率细胞冻存液

    图-3 人牙髓干细胞在对数生长期内的BrdU分析

    可观察到大部分细胞摄入BraU(绿)(左),未发现两者的BraU阳性细胞数在统计学上的显著差异(右)。

    结论


    除了本文中报告的细胞增殖能力评价之外,使用CryoScarless® DMSO-Free冻存的牙髓干细胞不仅维持了成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞的多分化能力,也能维持向免疫缺陷小鼠的皮下移植并引起硬组织形成的能力。并且该产品并不影响干细胞的特性。

    另外,值得注意的是,使用CryoScarless® DMSO-Free冻存的牙髓干细胞即使长期培养至传代数为10后仍然保持染色体的二倍体和正常核型,大量培养的细胞中也没有发现染色体异常。

    在再生医学中必不可少的"细胞冻存"中,作为冷冻保护剂使用的Dimethyl sulfoxide(DMSO)可能会有细胞毒性和引起意外的细胞分化,因此,我们十分期待能够确立一个像该产品一样的无DMSO的细胞冻存体系。

    本报道中使用易于获得的牙髓来源间充质干细胞,研究了CryoScarless® DMSO-Free对干细胞特性的影响,并确认了使用该产品冻存的细胞与未经冻存的牙髓干细胞拥有相同的细胞特性。因此,CryoScarless® DMSO-Free在间充质干细胞基础研究以及临床前研究,甚至是将来的再生医学领域中,有望成为一款可以提供安全且高预测性数据和治疗成果的细胞冻存液。

    CryoScarless ® DMSO-Free                              高存活率细胞冻存液


    中原贵教授(前排右),望月真衣助教(前排左)与研究室成员

    ◆实际应用的细胞和冻存效果


    细胞株

    存活率(%)*

    L929

    小鼠成纤维细胞

    97.5 ± 1.2

    MG63

    人骨肉瘤细胞

    93.1 ± 2.3

    HT1080

    人纤维肉瘤细胞

    90.2 ± 4.3

    Colon26

    小鼠结肠癌细胞

    92.3 ± 2.3

    B16F1

    小鼠黑素瘤细胞

    94.2 ± 0.6

    KB

    人口腔癌细胞

    91.8 ± 0.9

    Caco2

    人结肠癌细胞

    93.7 ± 1.9

    MC3T3

    小鼠成骨细胞

    94.4 ± 0.5

    Jurkat E6-1

    人白血病细胞

    88.4 ± 2.5

    HUVEC

    人脐静脉内皮细胞

    89.9 ± 0.4

    HCAEC

    人冠状动脉内皮细胞

    90.1 ± 1.6

    MEF

    小鼠胎儿成纤维细胞

    94.4 ± 0.8

    hACh

    人软骨细胞

    93.5 ± 0.7


    * -80°C冻存3个月,复苏后24 h

    ◆操作方法概要


    1. 将培养细胞放入离心管,离心并去掉上清。

    2. 按照5×105~5×106 cells/mL添加本产品,并制成细胞悬液,每个冻存管分装1 mL。

    3. 放入-80℃超低温冰箱中冻存。

    4. 将在上一步中保存的细胞放入37°C恒温水浴槽中,快速晃动使细胞解冻,融化后放入适当的培养基(10 mL)中并离心清洗。


    ※长期保存请置于液氮罐中保存。

    ◆产品列表


    产品编号

    产品名称

    包装

    CPL-A1

    CryoScarless DMSO-Free
    无DMSO干细胞冻存液

    100 mL

    ◆相关产品


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    产品名称

    规格

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    细胞温度检测荧光探针 Particulate型

    100 μg


    产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
    CPL-A1 CryoScarless DMSO-Free 
     无DMSO细胞冻存液
    100 ml