α1-3,4,6 半乳糖苷酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

 

产品来源

该酶克隆自绿色咖啡豆，在 E. coli 中表达。

特异性

α1-3,4,6 半乳糖苷酶 |
产品类别:
Exoglycosidases Products,
Proteome Analysis Products

应用:
Expression Systems,
Glycan Sequencing,
Proteomics,

Recombinant Glycoprotein Expression,

Glycoprotein Analysis

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • P0747S     4    
        α1-3,4,6 Galactosidase P0747SVIAL 4 1 x 0.025 ml 8,000 units/ml
        GlycoBuffer 1 B1727SVIAL -20 1 x 1 ml 10 X
        Recombinant Albumin (Low-glycerol) B9203SVIAL -20 1 x 0.25 ml 10 mg/ml
    • P0747L     4    
        α1-3,4,6 Galactosidase P0747LVIAL 4 1 x 0.125 ml 8,000 units/ml
        GlycoBuffer 1 B1727SVIAL -20 1 x 1 ml 10 X
        Recombinant Albumin (Low-glycerol) B9203SVIAL -20 1 x 0.25 ml 10 mg/ml

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内将 1 nmol Galα1-3Galβ1-4Gal- 7-amino-4-methyl-coumarin（AMC）中超过 95% 的末端 α-D-半乳糖水解所需要的酶量。

    反应条件

    1X GlycoBuffer 1
    Supplement with 100 µg/ml Recombinant Albumin (Low-glycerol)
    Incubate at 37°C

    1X GlycoBuffer 1
    5 mM CaCl2
    50 mM sodium acetate
    (pH 5.5 @ 25°C)

    贮存溶液

    20 mM Tris-HCl
    50 mM NaCl
    1 mM EDTA
    pH 7.5 @ 25°C

    热失活

    65°C

    分子量

    理论上的: 39700 Da

    比活度

    71,000 unit/mg

    单位活性检测条件

    在 10 μl 1X GlycoBuffer 1 和 1X BSA 的反应体系中，将两倍稀释的 α1-3,4,6 半乳糖苷酶与 1 nmol AMC 标记底物进行温育。反应混合液在 37℃ 条件下温育 1 小时。通过薄层色谱法观察反应产物的分离情况（1）。

  • 相关产品

    相关产品

    • α1-3,6 半乳糖苷酶

  • 注意事项

    1. 8 个单位的酶在 65℃ 条件下温育 10 分钟失活。

  • 参考文献

    1. Wong-Madden, S.T. and Landry, D. (1995). Glycobiology 5,. 19-28.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Typical Reaction Conditions for α1-3, 4, 6 Galactosidase (P0747)

  • 应用实例

    • Detailed Characterization of Antibody Glycan Structure using the N-Glycan Sequencing Kit

工具 & 资源

  • Web 工具

    • Glycan Analyzer

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What are Glycosidases and their uses?
    2. What is the difference between α1-3,6 Galactosidase and α1-3,4,6 Galactosidase?
    3. Can I use α1-3,4,6 Galactosidase in a double digest with other exoglycosidases and/or endoglycosidases?
    4. What is a good positive control for α1-3,4,6 Galactosidase?
    5. Does this enzyme require denaturing conditions to act on glycoproteins?
    6. What is a good method to re-purify a glycan or glycopeptide after exoglycosidase treatment?
    7. Do detergents inhibit glycosidases?
    8. How much exoglycosidase should be used?
    9. How much exoglycosidase should be used?

  • 实验技巧

    • 反复冻融会降低酶活性。推荐贮存温度为 4℃
    • 1 µg 糖蛋白或 100 nM 寡糖反应 1 小时，酶的最佳起始量范围为 1-2 µl。
    • 对硝基苯 α-D-半乳糖苷是 α1-3,4,6 半乳糖苷酶的阳性对照底物
    • 贮存缓冲液不包含 BSA；建议在反应中添加 BSA 以保持最佳酶活性