β1-3 半乳糖苷酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

底物特异性：
β1-3 半乳糖苷酶 |

β1-3 半乳糖苷酶是一种具有高度特异性的糖苷外切酶，既可催化水解寡糖上 β1-3 连接的 D-半乳糖残基，也可缓慢水解 β1-6 连接的 D-半乳糖残基。动力学数据表明，该酶优先水解 β1-3 糖苷键，其水解速度是 β1-6 糖苷键的 100 倍以上（1,2），是水解 β1-4 糖苷键的 500 倍以上（3）。

详细特异性：GlcNAc(β1-6) 残基是唯一可以影响酶特异性切割的异构型，因而能够水解非还原性 β1-4 半乳糖（图 1）。

 图 1： 
β1-3 半乳糖苷酶 |

β1-3 半乳糖苷酶 |


由于邻近的 GlcNAc1-6 异构体，在售浓度的酶将切断β1-4 半乳糖糖苷键，如（A）所示。如果在售浓度的酶稀释 16 倍，则无法进行此类切割，如（B）所示。


产品来源

克隆自木薯细菌性萎蔫病菌（Xanthomonas manihotis），在 E. coli 中表达。

产品类别:
Exoglycosidases Products

应用:
Glycan Sequencing,
Recombinant Glycoprotein Expression,
Glycoprotein Analysis

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • P0726S     -20    
        β1-3 Galactosidase P0726SVIAL -20 1 x 0.05 ml 10,000 units/ml
        GlycoBuffer 1 B1727SVIAL -20 1 x 1 ml 10 X
        Recombinant Albumin (Low-glycerol) B9203SVIAL -20 1 x 0.25 ml 10 mg/ml

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指 10 µl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内将 1 nmol Galβ1-3GlcNAcβ1-3Galβ1-4Glc-7-amino-4-methyl-coumarin（AMC）中超过 95% 的末端 β-D-半乳糖水解所需要的酶量。

    反应条件

    1X GlycoBuffer 1
    Supplement with 100 µg/µl Recombinant Albumin (Low-glycerol)
    Incubate at 37°C

    1X GlycoBuffer 1
    5 mM CaCl2
    50 mM sodium acetate
    (pH 5.5 @ 25°C)

    贮存溶液

    50 mM NaCl
    20 mM Tris-HCl
    1 mM EDTA
    pH 7.5 @ 25°C

    热失活

    65°C for 10 minutes

    分子量

    理论上的: 66 kDa

    单位活性检测条件

    在 10 µl 1X GlycoBuffer 1（添加有 100 µg/ml BSA）反应体系中，将两倍稀释的 β1-3 半乳糖苷酶与 1 nmol AMC 标记底物进行温育。反应混合液在 37℃ 条件下温育 1 小时。通过薄层色谱法观察反应产物的分离情况（1）。

  • 相关产品

    相关产品

    • β1-4 半乳糖苷酶 S
    • 1-3,4 半乳糖苷酶

  • 注意事项

    1. 对于特定底物，需对实验进行优化，以确定最佳温育时间和酶浓度。

  • 参考文献

    1. Wong-Madden, S.T. and Landry, D. (1995). Glycobiology. 5, 19-28.
    2. Guthrie, E.P. and Taron, C.H. New England Biolabs. Unpublished observation
    3. Monks, B. New England Biolabs. Unpublished observation

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Typical Reaction Conditions for β1-3 Galactosidase (P0726)

  • 使用指南

    • Detailed Characterization of Several Glycosidase Enzymes
    • Glycobiology Unit Conversion Chart

  • 应用实例

    • Enzymatic removal of N– and O-glycans using PNGase F or the Protein Deglycosylation Mix

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. How much exoglycosidase should be used?
    2. Do detergents inhibit exoglycosidases/endoglycosidases?
    3. Why have the NEB Glycosidase enzymes changed reaction buffers? What are the new reaction buffers and can I still use an enzyme with its old buffer? Where can I find the composition of the old buffers?
    4. What are Glycosidases and their uses?
    5. How much exoglycosidase should be used?

  • 实验技巧

    1 µg 糖蛋白或 100 nM 寡糖反应 1 小时，酶的最佳起始量范围为 1-2 µl。