E. coli RNA 聚合酶，全酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

E. coli RNA 聚合酶，全酶由核心酶和 sigma 因子 70 组成。全酶能从 sigma 因子 70 特定的细菌和噬菌体启动子处起始合成 RNA。

E. coli RNA 聚合酶，核心酶由 5 种亚基组成，分别为 α、α、β´、β、和 ω。 该酶无 sigma 因子，因此不会识别任何特定的细菌和噬菌体 DNA 启动子。该酶保留了从非特异性启动序列转录 RNA 的功能。添加 sigma 因子后，该酶可从特定的细菌和噬菌体启动子启动合成 RNA。核心酶分子量约 400 kDa。

产品来源

E. coli RNA 聚合酶，全酶分离自 E. coli 菌株 BL21。Sigma 因子 70 由携带有克隆自 sigma 因子 70 基因的 E. coli 菌株纯化而来。

产品类别:
RNA Modification,
RNA Synthesis In vitro Transcription (IVT)

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0551S     -20    
        E. coli RNA Polymerase, Holoenzyme M0551SVIAL -20 1 x 0.05 ml 1,000 units/ml
        E.coli RNA Polymerase Reaction Buffer B0550AVIAL -20 1 x 0.5 ml 5 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指在 37℃ 条件下，10 分钟内可将 1 nmol NTP 掺入 RNA 所需的酶量。

    反应条件

    1X E.coli RNA 聚合酶反应缓冲液
    Incubate at 37°C

    1X E.coli RNA 聚合酶反应缓冲液
    40 mM Tris-HCl
    150 mM KCl
    10 mM MgCl2
    1 mM DTT
    0.01% Triton® X-100
    (pH 7.5 @ 25°C)

    贮存溶液

    20 mM Tris-HCl
    100 mM NaCl
    0.1 mM EDTA
    1 mM DTT
    50% Glycerol
    pH 7.5 @ 25°C

    单位活性检测条件

    50 μl 含有 1X E. coli RNA 聚合酶反应缓冲液的反应体系中，添加每种 NTP 各 0.5 mM，以及 1 μg T7 噬菌体 DNA。

  • 优势和特性

    应用特性

    • E. coli 启动子启动的 RNA 合成
    • 转录起始研究
    • PURExpress 体外翻译

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FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is the difference between the E.coli RNA Polymerase, Core Enzyme and Holoenzyme?
    2. What are the major functions of these subunits?
    3. Can the Core and Holoenzyme be used in PURExpress?
    4. What are the other sigma factors in E.coli?