α1-2 岩藻糖苷酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

底物特异性: α1-2 岩藻糖苷酶 |
α1-2 岩藻糖苷酶是一种具有高度特异性的糖苷外切酶,催化水解寡糖中线型 α1-2 连接的 L-岩藻糖残基(1)。此处的线型底物是指残基附近无分支。
图 1:α1-2 岩藻糖苷酶的详细特异性
α1-2 岩藻糖苷酶 |
所有反应均含有 1X Glycobuffer 1。所有反应体系都是 10 μl,并含有 1X BSA,37℃ 条件下温育。所有反应都含有 20 unit α1-2 岩藻糖苷酶。反应中(C)还含有 20 unit α-N-乙酰半乳糖胺酶(#P0734)。在反应(C)中,添加两种酶后可去除分支 α 1-2 岩藻糖,但无法仅通过 α1-2 岩藻糖苷酶将其去除。

α1-2 岩藻糖苷酶 |

产品来源

克隆自木薯细菌性萎蔫病菌(Xanthomonas manihotis),在 E. coli 中表达。

产品类别:
Exoglycosidases Products

应用:
Glycan Sequencing,
Recombinant Glycoprotein Expression,
Glycoprotein Analysis

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分:

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • P0724S     4    
        α1-2 Fucosidase P0724SVIAL 4 1 x 0.05 ml 20,000 units/ml
        GlycoBuffer 1 B1727SVIAL -20 1 x 1 ml 10 X
        Recombinant Albumin (Low-glycerol) B9203SVIAL -20 1 x 0.25 ml 10 mg/ml

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指 10 µl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内将 1 nmol Fucα1-2Galβ1-4Glc-7-amino-4-methyl-coumarin(AMC)中超过 95% 的 α-L-岩藻糖水解所需要的酶量。

    反应条件

    1X GlycoBuffer 1
    Supplement with 100 µg/ml Recombinant Albumin (Low-glycerol)
    Incubate at 37°C

    1X GlycoBuffer 1
    5 mM CaCl2
    50 mM sodium acetate
    (pH 5.5 @ 25°C)

    贮存溶液

    50 mM NaCl
    20 mM Tris-HCl
    1 mM EDTA
    pH 7.5 @ 25°C

    热失活

    65°C for 10 minutes

    分子量

    理论上的: 70000 Da

    单位活性检测条件

    在 10 µl 1X GlycoBuffer 1(添加有 100 µg/ml BSA)反应体系中,将两倍稀释的 α1-2 岩藻糖苷酶与 1 nmol AMC 标记底物进行温育。反应混合液在 37℃ 条件下温育 1 小时。通过薄层色谱法观察反应产物的分离情况(1)。

  • 相关产品

    相关产品

    • p0749-a1-2-4-6-fucosidase-o
    • α1-3,4 岩藻糖苷酶

  • 注意事项

    1. 添加 100μ/ml BSA。37℃ 温育
    2. 对硝基苯-α-L-岩藻吡喃糖苷不是本酶底物。
    3. 反复冻融会降低酶活性。推荐的贮存温度已改为 4℃。
    4. 对于特定底物,需对实验进行优化,以确定最佳温育时间和酶浓度。

  • 参考文献

    1. Wong-Madden, S.T. and Landry, D. (1995). Glycobiology. 5, 19-28.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Typical Reaction Conditions for α1-2 Fucosidase (P0724)

  • 使用指南

    • Detailed Characterization of Several Glycosidase Enzymes
    • Glycobiology Unit Conversion Chart

  • 应用实例

    • Enzymatic removal of N– and O-glycans using PNGase F or the Protein Deglycosylation Mix

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. How much exoglycosidase should be used?
    2. Do detergents inhibit exoglycosidases/endoglycosidases?
    3. Why have the NEB Glycosidase enzymes changed reaction buffers? What are the new reaction buffers and can I still use an enzyme with its old buffer? Where can I find the composition of the old buffers?
    4. What are Glycosidases and their uses?
    5. How much exoglycosidase should be used?