α1-6 甘露糖苷酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

底物特异性：α1-6 甘露糖苷酶 |

α1-6 甘露糖苷酶是一种具有高度特异性的糖苷外切酶，催化切割寡糖未分支的 α1-6 糖苷键连接的 D-吡喃甘露糖残基（1,2）。当与 α1-2,3 甘露糖苷酶共同作用时，该酶将从分支的碳水化合物底物中切割 α1-6 甘露糖残基。

图 1：α1-6 甘露糖苷酶的详细特异性
α1-6 甘露糖苷酶 |
α1-6 甘露糖苷酶 |
所有反应含 32 unit α1-2,3甘露糖苷酶（NEB #P0729）、40 unit的 α1-6 甘露糖苷酶、1X GlycoBuffer 1 和 1X BSA，总反应体系为 10 µl。反应在 37℃ 条件下温育。（E）中所示的底物不会被完全切割。只要任一底物中存在该结构，它不会受到 α1-6 甘露糖苷酶的切割。注意：单独使用时，α1-6 甘露糖苷酶仅对线型底物起作用。当与 α1-2,3 甘露糖苷酶共同作用时，该酶将从分支的碳水化合物底物中切割 α1-6 甘露糖残基。

产品来源

克隆自木薯细菌性萎蔫病菌（Xanthomonas manihotis），在 E. coli 中表达。

产品类别:
Exoglycosidases Products

应用:
Recombinant Glycoprotein Expression

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • P0727S     4    
        α1-6 Mannosidase P0727SVIAL 4 1 x 0.02 ml 40,000 units/ml
        GlycoBuffer 1 B1727SVIAL -20 1 x 1 ml 10 X
        Recombinant Albumin (Low-glycerol) B9203SVIAL -20 1 x 0.25 ml 10 mg/ml

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指 10 µl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内将 1 nmol Manα1-6Manα1-6Man-7-amino-4-methyl-coumarin（AMC）中超过 95% 的末端 α-D-甘露糖水解所需要的酶量。

    反应条件

    1X GlycoBuffer 1
    Supplement with 100 µg/ml Recombinant Albumin (Low-glycerol)
    Incubate at 37°C

    1X GlycoBuffer 1
    5 mM CaCl2
    50 mM sodium acetate
    (pH 5.5 @ 25°C)

    贮存溶液

    50 mM NaCl
    20 mM Tris-HCl
    1 mM EDTA
    pH 7.5 @ 25°C

    热失活

    65°C for 10 minutes

    分子量

    实际: 51 kDa

    单位活性检测条件

    在 10 µl 1X GlycoBuffer 1（添加有 100 µg/ml BSA）反应体系中，将两倍稀释的 α1­­­­­­­­‑6 甘露糖苷酶与 1 nmol AMC 标记底物进行温育。反应混合液在 37℃ 条件下温育 1 小时。通过薄层色谱法观察反应产物的分离情况（1）。

  • 相关产品

    相关产品

    • α1-2,3 甘露糖苷酶

  • 注意事项

    1. 对硝基苯-α-D-吡喃甘露糖苷不是本酶底物。
    2. 避免反复冻融。

  • 参考文献

    1. Wong-Madden, S.T. and Landry, D. (1995). Glycobiology. 5, 19-28.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Typical Reaction Conditions for α1-6 Mannosidase (P0727)

  • 使用指南

    • Detailed Characterization of Several Glycosidase Enzymes
    • Glycobiology Unit Conversion Chart

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is a good positive control for α1-6 Mannosidase?
    2. How much exoglycosidase should be used?
    3. Why have the NEB Glycosidase enzymes changed reaction buffers? What are the new reaction buffers and can I still use an enzyme with its old buffer? Where can I find the composition of the old buffers?
    4. Do detergents inhibit exoglycosidases/endoglycosidases?
    5. What are Glycosidases and their uses?
    6. How much exoglycosidase should be used?

  • 实验技巧

    1 µg 糖蛋白或 100 nM 寡糖反应 1 小时，酶的最佳起始量范围为 1-2 µl。

    单独使用时，α1-6 甘露糖苷酶仅从寡糖中去除未分支的 α1-6 连接甘露糖残基。

    对硝基苯-a-D-吡喃甘露糖苷（pNP-Man）不是本酶底物。

    反复冻融会降低酶活性。建议在 4℃ 条件下贮存。