Monarch® RNA 纯化离心柱（500 µg） |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

Monarch® RNA 纯化离心柱（500 µg） |

Monarch RNA 纯化离心柱（500 µg）是 Monarch RNA 纯化试剂盒（500 µg）（NEB #T2050）的组分，可用于从酶促反应，包括高效 RNA 合成反应中，纯化高达 500 µg 的 RNA。离心柱的设计没有使用固定环，确保不会出现缓冲液残留及交叉污染。RNA 可在低至 50 μl 的体积中洗脱，洗脱后可用于各种下游应用，包括 RT-PCR、NGS RNA 文库制备和转染。

Monarch RNA 纯化离心柱还提供 10 µg（NEB #T2037）和 50 µg（NEB #T2047）的结合能力。

 

图 1：Monarch RNA 纯化试剂盒（500 µg）适用于纯化体外转录的大量 RNA（> 250 µg）

Monarch® RNA 纯化离心柱（500 µg） |

1. 使用 HiScribe®; T7 快速高效 RNA 合成试剂盒（NEB #E2050）、1.5 – 1.8 µg DNA 模板，在 37℃ 下温育两小时，合成不同长度（0.6 – 8 kb）的 RNA 转录本。使用 Monarch RNA 纯化试剂盒（500 µg，T2050）对 40 µl 体外转录（IVT）产物进行纯化，并以 200 µl 的体积洗脱。使用 Nanodrop® 分光光度计测量 A260 计算出 RNA 产量，每个 IVT 反应的 RNA 产量范围为 268 – 425 µg。

2. 使用 SYBR Gold 染色的 1% 琼脂糖-TBE 凝胶，在 Millennium™ RNA Marker（Thermo Fisher Scientific）上评估 RNA 完整性（200 ng/泳道）。

图 2：在洗脱离心之前，将离心柱与洗脱缓冲液（无核酸酶水）一起温育可提高 RNA 回收率

Monarch® RNA 纯化离心柱（500 µg） |

使用 Monarch RNA 纯化试剂盒（500 µg，NEB #T2050）纯化 rRNA（来自 Sigma 公司 E. coli 16S 和 23S rRNA 标准品）。将 100 µl 无核酸酶水添加到离心柱，并在室温下温育 0、1、3 或 5 分钟，然后离心洗脱 RNA。使用 Trinean DropSense 16 测得的 A260 值计算出 RNA 回收率。温育五分钟所得产量最大。
产品类别:
RNA Cleanup Products,
RNA Extraction and Purification,
Nucleic Acid Purification Products

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • T2057L     25    
        Monarch® RNA Cleanup Columns (500 μg) T2057-1 25 2 x 50 columns Not Applicable
        Monarch® Collection Tubes II T2018-1 25 2 x 50 tubes Not Applicable

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Extraction of RNA from Agarose Gels using the Monarch® RNA Cleanup Kits
    2. Separation of Large and Small RNA into Fractions using the Monarch® RNA Cleanup Kits
    3. Monarch® RNA Cleanup Kit Protocol
    4. Download Quick Protocol Card Monarch RNA Cleanup Kit
    5. RNA Extraction from Cells Using the Monarch RNA Cleanup Kits

  • 说明书

    产品说明书包含产品使用的详细信息、产品配方和质控分析。

    • manualT2030_T2040_T2050

  • 使用指南

    • Avoiding Ribonuclease Contamination
    • Guidelines for RNA Quantitation
    • Guidelines for Working with RNA During RNA Cleanup

  • 应用实例

    • A Practical Guide to Analyzing Nucleic Acid Concentration and Purity with Microvolume Spectrophotometers

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is the maximum binding capacity of the Monarch RNA Cleanup Column provided with the Monarch RNA Cleanup Kit?
    2. What is the smallest volume of nuclease-free water that can be used for elution with the Monarch RNA Cleanup Columns?
    3. Can I get better recovery with the Monarch RNA Cleanup Kits if I do a second elution with my eluent from the first elution?
    4. What factors affect my (A260/A230) when using the Monarch RNA Cleanup Kits?
    5. What size RNA can be purified with the Monarch RNA Cleanup Kit?
    6. Can I use the Monarch RNA Cleanup Kit to cleanup up my DNase I-treated RNA?
    7. Can I use the Monarch RNA Cleanup Kits to purify RNA from agarose gels?
    8. Can I use the Monarch RNA Cleanup Kits to cleanup RNA after a TRIzol®/chloroform extraction?
    9. Can I use the Monarch RNA Cleanup Kits to cleanup my in vitro transcription (IVT) reaction?
    10. Are the Monarch RNA Cleanup Kits (NEB # T2030, #T2040, #T2050) compatible with Luna RT-qPCR reagents?
    11. Are the Monarch RNA Cleanup Kits (NEB #T2030, #T2040, #T2050) compatible with NEBNext reagents for RNA library prep?
    12. My sample turned cloudy after adding the Monarch RNA Cleanup Binding Buffer and ethanol. Is this normal?
    13. Why do I need to incubate my column for 5 minutes with elution buffer (nuclease-free water)?
    14. How can I assess RNA integrity and purity?
    15. Are the columns in the Monarch RNA Cleanup Kits the same as those in the Monarch Total RNA Miniprep Kit (NEB #T2010)?
    16. Can I purchase Monarch buffers and columns separately?
    17. Can I do an on-column DNase I treatment with the Monarch RNA Cleanup Columns?
    18. Can the Monarch RNA Cleanup Kits (NEB #T2030, #T2040, #T2050) also be used to purify DNA?
    19. I would like to clean up  ~150 µg of RNA. Would it be better to use multiple 50 µg columns (NEB #T2040/#T2047) or a single 500 µg column (NEB #T2050/#T2057)?

  • 问题解决指南

    • Troubleshooting Guide for RNA Cleanup