Afu UDG |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶（Afu UDG）是 E. coli 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）的热稳定的同源蛋白（1,2），来源于闪烁古生球菌（Archaeoglobus fulgidus）。该酶从含尿嘧啶的 DNA 上催化释放尿嘧啶，能有效地水解单链和双链 DNA 上的尿嘧啶。

产品来源

在大肠杆菌中克隆和过表达。

产品类别:
DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases Products

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0279S     -20    
        Afu Uracil-DNA Glycosylase (UDG) M0279SVIAL -20 1 x 0.1 ml 2,000 units/ml
        ThermoPol® II (Mg-free) Reaction Buffer B9005SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指每分钟从含尿嘧啶双链 DNA 上催化释放 60 pmol 尿嘧啶所需要的酶量。通过检测 65℃ 30 分钟内，从 50 µl 含 0.2 µg DNA（104-105cpm/µg）的反应体系中释放 [3H]-尿嘧啶的量来确定活性。

    反应条件

    1X ThermoPol® II（不含 Mg2+）反应缓冲液
    Incubate at 65°C

    1X ThermoPol® II（不含 Mg2+）反应缓冲液
    20 mM Tris-HCl
    10 mM (NH4)2SO4
    10 mM KCl
    0.1% Triton® X-100
    (pH 8.8 @ 25°C)

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    50 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    0.1 mg/ml Recombinant Albumin
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    否

    分子量

    理论上的: 22717 道尔顿

    比活度

    96 units/mg

    单位活性检测条件

    50 µl 总反应体系，含 1X ThermoPol II（不含 Mg2+）反应缓冲液、1 单位 Afu UDG、0.2 µg 3H-尿嘧啶 DNA（104 – 105 cpm/µg），65℃ 温育 30 分钟。

  • 相关产品

    单独销售的组分

    • ThermoPol® II (Mg-free) Reaction Buffer Pack

  • 注意事项

    1. Afu UDG 在 150 mM NaCl 存在的条件下，仍有 50% 的活性。在标准反应条件下煮沸 30 分钟后，Afu UDG 的活性低于 1%。
    2. 在标准反应条件下，尿嘧啶糖基酶抑制剂（UGI）不会抑制 Afu UDG 活性。

  • 参考文献

    1. Sandigursky, M. and Franklin, W. A. (1999). CurrentBiology. 9,
    2. Sandigursky, M. and Franklin, W. A. (2000). J. Biol.Chem.. 275,

操作说明、说明书 & 用法

  • 使用指南

    • DNA Damage and PreCR

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Activities of DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases
    • DNA Repair Enzymes on Damaged and Non-standard Bases
    • Properties of DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Will Afu UDG work in Thermopol Buffer?
    2. What is the molecular weight of Afu UDG?
    3. Is Afu UDG a tagged protein?
    4. I see that Afu UDG works optimally at 65°C. Do you have another glycosylase that works at lower temperatures?
    5. Does the Uracil Glycosylase inhibitor (UGI) inhibit Afu UDG?
    6. Does Afu UDG release uracil from ss and dsDNA?
    7. Does Afu UDG cut RNA?
    8. Are there any specific recommendations for the use of UDG on single stranded DNA?
    9. Will Afu UDG work in Fpg buffer?
    10. What is the activity of WarmStart Afu Uracil-DNA Glycosylase (UDG) in NEBuffers?