T5 核酸外切酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

T5 核酸外切酶沿 5´→3´ 方向降解 DNA（1）。T5 核酸外切酶既能从线性或切刻双链 DNA（dsDNA）的 5′ 末端起始消化，也能从线性或环状双链 DNA（dsDNA）的缺口或切刻处起始消化（1）。然而该酶不会降解超螺旋双链 DNA（dsDNA）（2）。T5 核酸外切酶还具有单链 DNA（ssDNA）核酸内切酶活性。

产品来源

在大肠杆菌中，T5 噬菌体 D15 基因携带 His-tag 融合表达。

产品类别:
Exonucleases and Non-specific Endonucleases Products

应用:
Gibson Assembly®

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0663S     -20    
        T5 Exonuclease M0663SVIAL -20 1 x 0.1 ml 10,000 units/ml
        NEBuffer™ 4 B7004SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X
    • M0663L     -20    
        T5 Exonuclease M0663LVIAL -20 1 x 0.5 ml 10,000 units/ml
        NEBuffer™ 4 B7004SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位 T5 核酸外切酶指在 rCutSmart 缓冲液中，37℃ 条件下，每分钟 A260 值改变 0.00032 所需的酶量。

    反应条件

    1X NEBuffer™ 4
    Incubate at 37°C

    1X NEBuffer™ 4
    50 mM Potassium Acetate
    20 mM Tris-acetate
    10 mM Magnesium Acetate
    1 mM DTT
    (pH 7.9 @ 25°C)

    贮存溶液

    50 mM Tris-HCl
    100 mM NaCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    50% Glycerol
    0.1% Triton® X-100
    pH 7.5 @ 25°C

    热失活

    否

    单位活性检测条件

    1X CutSmart 缓冲液；40 µg/ml 鲑鱼精子 DNA

  • 优势和特性

    应用特性

    • 降解线性单链 DNA（ssDNA）、双链 DNA（dsDNA）或切刻的质粒 DNA，同时保留超螺旋质粒 DNA。
    • 去除碱裂解法提取质粒中的变性 DNA（5）。
    • 提高质粒 cDNA 文库小提的转染效率（6）。

  • 相关产品

    相关产品

    • T4 DNA 连接酶
    • NEBuilder® 高保真 DNA 组装预混液
    • Nuclease-free Water
    • Gibson 组装® 预混液

    单独销售的组分

    • NEBuffer 4

  • 参考文献

    1. Sayers, J.R. et al. (1991). Nucleic Acids Res. 19, 4127-4132.
    2. Sayers, J.R. et al. (1990). J. of Biol. Chem. 265, 18311-18317.
    3. Kaliman, A.V. et al. (1986). FEBS. 195, 61-64.
    4. Frenkel, G.D. et al. (1971). J. of Biol. Chem. 246, 4839-4847.
    5. Sayers, J.R. et al. (1996). Analytical Biochem. 241, 186-189.
    6. Kiss-Toth, E. et al. (2001). Analytical Biochem. 288, 230-232.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for T5 Exonuclease (NEB #M0663)

  • 使用指南

    • Activity of DNA Modifying Enzymes in rCutSmart™ Buffer

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Activities of Exonucleases and Non-specific Endonucleases
    • Common Applications for Exonucleases and Endonucleases
    • Properties of Exonucleases and Non-specific Endonucleases

  • Web 工具

    • Exo Selector

  • 研究摘要

    • Choosing the Right Exonuclease (2019)

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. How Does T5 Exonuclease differ from Lambda Exonuclease (NEB# M0262)?
    2. Will T5 exonuclease cleave supercoiled dsDNA?
    3. How does T5 Exonuclease differ from Exonuclease III (NEB# M0206)?
    4. What is the activity of T5 Exonuclease in the NEBuffers?
    5. Can T5 Exonuclease be heat inactivated?
    6. Can DNA be blunted using T5 Exonuclease?
    7. Will T5 Exonuclease work in rCutSmart buffer?
    8. What is the difference between T5 Exonuclease (NEB #M0363) and T5 Exonuclease (NEB #M0663)?

  • 实验技巧

    具有 5’→3’ 双链 DNA（dsDNA）核酸外切酶活性和单链 DNA（ssDNA）核酸内切酶活性。