核酸酶 P1 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

核酸酶 P1 是一种锌依赖的单链特异性核酸酶，能无碱基特异地水解 RNA 和单链 DNA（ssDNA）上的磷酸二酯键。核酸酶 P1 还具有 3′-磷酸单酯酶活性（1）。虽然核酸酶 P1 是一种单链特异性核酸酶（ssDNA 和 RNA 特异性），但是在核酸酶 P1 反应缓冲液中，核酸酶 P1 对双链 DNA（dsDNA）也显示具有活性。当有双链 DNA（dsDNA）存在的情况下，如果只想消化单链核苷酸（ssDNA 或 ssRNA），建议在 1X NEBuffer 1.1 中进行反应，来限制核酸酶 P1 对双链 DNA（dsDNA）的活性，使其发挥最大单链核酸酶活性。

产品来源

分离自橘青霉（Penicillium citrinum）。

产品类别:
Exonucleases and Non-specific Endonucleases Products

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0660S     -20    
        Nuclease P1 M0660SVIAL -20 1 x 0.1 ml 100,000 units/ml
        Nuclease P1 Reaction Buffer B0660SVIAL -20 2 x 1 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指在 1X 核酸酶 P1 反应缓冲液中，37℃ 条件下，每分钟消化圆酵母（TorulaYeast）总 RNA 释放 1 μg 酸可溶性核苷酸所需要的酶量。

    反应条件

    1X 核酸酶 P1 反应缓冲液
    Incubate at 37°C

    1X 核酸酶 P1 反应缓冲液
    50 mM sodium acetate
    (pH 5.5 @ 25°C)

    贮存溶液

    25 mM Tris-HCl
    50 mM NaCl
    1 mM ZnCl2
    50% Glycerol
    pH 7.2 @ 25°C

    热失活

    75°C for 10 minutes

  • 注意事项

    1. 核酸酶 P1 的底物特异性如下：3´ AMP > RNA > ssDNA >> dsDNA。
    2. 2´-AMP 的水解效率是 3´-AMP 的 1/3000。
    3. 虽然核酸酶 P1 是一种单链特异性核酸酶（ssDNA 和 RNA 特异性），但是在核酸酶 P1 反应缓冲液中，核酸酶 P1 对双链 DNA（dsDNA）也显示具有活性。当有双链 DNA（dsDNA）存在的情况下，如果只想消化单链核苷酸（ssDNA 或 ssRNA），建议在 1X NEBuffer 1.1 中进行反应，来限制核酸酶 P1 对双链 DNA（dsDNA）的活性，使其发挥最大单链核酸酶活性。

  • 参考文献

    1. Fujimoto, M., Kuninaka, A. and Yoshino, H. (1974). Agric. Biol. Chem. 38, 777-783.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for #M0660

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Activities of Exonucleases and Non-specific Endonucleases
    • Common Applications for Exonucleases and Endonucleases
    • Properties of Exonucleases and Non-specific Endonucleases

  • Web 工具

    • Exo Selector

  • 研究摘要

    • Choosing the Right Exonuclease (2019)

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Is Nuclease P1 sensitive to salt?
    2. Can Nuclease P1 be inactivated?
    3. Does Nuclease P1 require ZnCl2?
    4. What applications are Nuclease P1 best suited for?
    5. What substrates does Nuclease P1 digest?
    6. How much ssDNA or RNA can Nuclease P1 digest?
    7. What is the activity of Nuclease P1 in other buffers?
    8. How does the new unit definition relate to the historical unit definition for Nuclease P1?
    9. Will Nuclease P1 degrade double stranded DNA (dsDNA)?