热敏核酸外切酶 I |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

热敏核酸外切酶 I 作用于单链 DNA，沿 3´→5´ 方向催化切除核苷酸。

 

图 1：热敏 ExoI 的热失活特性

热敏核酸外切酶 I |

热敏 ExoI 可快速热失活，以加速下游应用。该数据表明，在 NEBuffer 3.1 和标准 Taq 反应缓冲液中，热敏 ExoI 可通过 80℃ 加热 1 分钟、65℃ 加热 4 分钟或 60℃ 加热 15 分钟进行热失活。

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自嗜冷海洋细菌（psychrophilic marine bacterium）的热敏核酸外切酶 I 基因。

产品类别:
Exonucleases and Non-specific Endonucleases Products

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0568S     -20    
        Thermolabile Exonuclease I M0568SVIAL -20 1 x 0.15 ml 20,000 units/ml
        NEBuffer™ r3.1 B6003SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X
    • M0568L     -20    
        Thermolabile Exonuclease I M0568LVIAL -20 1 x 0.75 ml 20,000 units/ml
        NEBuffer™ r3.1 B6003SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位热敏核酸外切酶 I 指在 37℃ 条件下，100 μl 总反应体系，含 50 mM Tris-HCl（pH 7.9）、100 mM NaCl、10 mM MgCl2、100 μg/ml BSA 和 0.17 mg/ml [3H]-标记单链大肠杆菌 DNA，6 分钟内催化释放 2 nmol 的酸可溶性核苷酸所需的酶量。

    反应条件

    1X NEBuffer™ r3.1
    Incubate at 37°C

    1X NEBuffer™ r3.1
    100 mM NaCl
    50 mM Tris-HCl
    10 mM MgCl2
    100 µg/ml Recombinant Albumin
    (pH 7.9 @ 25°C)

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    0.1 mM EDTA
    1 mM DTT
    0.25 M NaCl
    50% Glycerol
    200 µg/ml BSA
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    80°C for 1 minute

    单位活性检测条件

    50 mM Tris-HCl（pH 7.9）、10 mM MgCl2、100 mM NaCl、100 μg/ml BSA 和 0.17 mg/ml [3H]-标记单链大肠杆菌 DNA。

  • 优势和特性

    应用特性

    • 在 DNA 测序或 SNP 分析之前，去除 PCR 反应体系中的单链引物
    • 去除巢式 PCR 反应体系中的单链引物
    • 从 dsDNA 中去除单链 DNA

  • 相关产品

    相关产品

    • Exo-CIP™ 快速 PCR 纯化试剂盒

    单独销售的组分

    • Quick Dephosphorylation Kit
    • Nuclease-free Water

  • 注意事项

    1. 80℃ 加热 1 分钟，65℃ 加热 5 分钟，或 60℃ 加热 15 分钟可使该酶热失活。
    2. 在 25 – 200 mM NaCl 存在条件下，热敏核酸外切酶 I 具有活性。
    3. 如需降解更多的 ssDNA ，建议增加酶量而不是延长反应时间。

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for removing ssDNA from dsDNA or RNA Samples (M0568)

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Activities of Exonucleases and Non-specific Endonucleases
    • Common Applications for Exonucleases and Endonucleases
    • Properties of Exonucleases and Non-specific Endonucleases

  • Web 工具

    • Exo Selector

  • 研究摘要

    • Choosing the Right Exonuclease (2019)

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. How can I remove the remaining primers and dNTPs from a PCR reaction prior to DNA sequencing?
    2. Can Thermolabile Exonuclease I remove primers in nested PCR reactions?
    3. Will Thermolabile Exonuclease I degrade RNA?
    4. Can Thermolabile Exonuclease I be used to blunt dsDNA?
    5. Can Thermolabile Exonuclease I be heat inactivated?
    6. Can Thermolabile Exonuclease I be used with a double-stranded exonuclease to clean up plasmid preparations?
    7. Will Thermolabile Exonuclease I work in other buffers?
    8. Can Exonuclease I be used with a double stranded exonuclease to clean up plasmid preparations?
    9. Can you tell me more about the switch from BSA to Recombinant Albumin (rAlbumin) in NEBuffers?