OneTaq® Quick-Load® DNA 聚合酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

OneTaq® Quick-Load® DNA 聚合酶是经过优化的 Taq 和 Deep Vent®DNA 聚合酶的即用型混合物，非常适合多种模板中的常规 PCR 应用，包括纯 DNA 溶液、细菌菌落和 cDNA 产物。Deep Vent DNA 聚合酶的 3´→5´ 核酸外切酶活性提升了 Taq DNA 聚合酶（1）的保真性和扩增能力。这款便捷的 Quick-Load 缓冲液含有用于将 PCR 产物直接上样到 DNA 凝胶的两种常用示踪染料。在 1X TBE 的 1% 琼脂糖凝胶上，二甲苯蓝 FF 的迁移位置大约在 4 kb 处，柠檬黄大约在 10 bp 处。两种染料的设置浓度不会掩盖共迁移的 DNA 条带。

 

OneTaq 产品与其它市售聚合酶的比较

OneTaq® Quick-Load® DNA 聚合酶 | 

对一系列高 GC 含量的人类基因组 DNA 靶标进行扩增，展示 OneTaq 的优异性能。所有聚合酶均根据制造商的使用建议进行循环扩增，包括使用添加剂来增强高 GC 含量的靶标扩增。在 Perkin Elmer LabChip® 上对反应产物的产量（点大小）和纯度（颜色）进行量化。深绿色大圆点代表最高的产量与纯度。
OneTaq® Quick-Load® DNA 聚合酶 |
OneTaq Quick-Load DNA 聚合酶的稳定表现
实现对多种 DNA 靶标（人类和病毒模板）进行扩增证明了 OneTaq Quick-Load DNA 聚合酶具有优越表现。在 30 个 PCR 循环后，通过进行三次重复，使用微流控分析仪计算产物的产量（条状，左轴）和纯度（圆圈，右轴）。标准偏差由误差条（产量）或阴影带（纯度）表示。根据产品说明书使用 GoTaq 进行循环扩增。

产品来源

E. coli菌株，其携带克隆自水生嗜热菌（Thermus aquaticus）YT-1 的 Taq DNA 聚合酶基因；E. coli菌株，其携带克隆自火球菌属（Pyrococcus）GB-D 的 Deep Vent® DNA 聚合酶基因。

产品类别:
OneTaq® DNA Polymerases Products,
PCR, qPCR & Amplification Technologies Products

应用:
PCR,
Multiplex PCR,
Specialty PCR,

Routine PCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0509L     -20    
        OneTaq® Quick-Load® DNA Polymerase M0509LVIAL -20 1 x 0.1 ml 5,000 units/ml
        OneTaq® Standard Reaction Buffer Pack B9022SVIAL -20 2 x 2 ml 5 X
        OneTaq® Quick-Load® Reaction Buffer B0509AVIAL -20 2 x 2 ml 5 X
    • M0509X     -20    
        OneTaq® Quick-Load® DNA Polymerase M0509LVIAL -20 5 x 0.1 ml 5,000 units/ml
        OneTaq® Standard Reaction Buffer Pack B9022SVIAL -20 10 x 2 ml 5 X
        OneTaq® Quick-Load® Reaction Buffer B0509AVIAL -20 10 x 2 ml 5 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位是指在 75℃ 条件下，30 分钟能使 15 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶物所需的酶量。

    使用浓度

    1.25 units/50 μl 反应体系

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    100 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    50% Glycerol
    0.5% Tween® 20
    0.5% IGEPAL® CA-630
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    否

    单位活性检测条件

    1X ThermoPol® 反应缓冲液、200 µM dNTP（含 [3H]-dTTP）和 15 nM 已结合引物的 M13 DNA。

  • 优势和特性

    应用特性

    • 高灵敏度 PCR
    • 高通量 PCR
    • 常规 PCR
    • 高 AT PCR
    • 菌落 PCR
    • 长片段 PCR（基因组片段可扩增至 6 kb）

  • 相关产品

    相关产品

    • dNTP 混合液
    • dNTP 套装
    • MgCl2 溶液
    • OneTaq® 热启动 Quick-Load® 2X 预混液（提供 GC 缓冲液）
    • OneTaq® 热启动 Quick-Load® 2X 预混液（提供标准缓冲液）
    • OneTaq® DNA 聚合酶
    • OneTaq® 热启动 DNA 聚合酶
    • OneTaq Hot Start 2X Master Mix with Standard Buffer

    单独销售的组分

    • OneTaq® 热启动 Quick-Load® 2X 预混液（提供 GC 缓冲液）
    • OneTaq® Quick-Load® 2X 预混液（提供标准缓冲液）

  • 参考文献

    1. Barnes, W.M. (1994). Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 91, 2216-2220.
    2. Saiki, R.K. et al. (1985). Science. 230, 1350-1354.
    3. Powell, L.M. et al. (1987). Cell. 50, 831-840.
    4. Sun, Y., Hegamyer, G. and Colburn, N. (1993). Biotechniques. 15, 373-374.
    5. Sarkar, G. Kapelner, S. and Sommer, S.S. (1990). Nucleic Acids Res. 18, 7465.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. PCR Protocol for OneTaq® Quick-Load® DNA Polymerase (M0509)

  • 使用指南

    • Guidelines for PCR Optimization with OneTaq® and OneTaq® Hot Start DNA Polymerases
    • Guidelines for PCR Optimization with Thermophilic DNA Polymerases

  • 应用实例

    • Robust Colony PCR from Multiple E. coli Strains using OneTaq® Quick-Load® Master Mixes

工具 & 资源

  • 选择指南

    • DNA Polymerase Selection Chart
    • Thermophilic DNA Polymerases

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Can OneTaq® Quick-Load® DNA Polymerase be used in colony PCR
    2. How long a product can be made by OneTaq® Quick-Load® DNA Polymerase
    3. What is the fidelity of OneTaq® Quick-Load® DNA Polymerase
    4. How should I set up an amplification reaction using OneTaq® Quick-Load® DNA Polymerase

  • 问题解决指南

    • PCR Troubleshooting Guide