Deep Vent® DNA 聚合酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

Deep Vent DNA 聚合酶是 NEB 公司提供的第二种高保真耐热 DNA 聚合酶。Deep Vent DNA 聚合酶具有高保真性的原因，部分是由于其自身具有 3´→5´ 核酸外切酶校读活性。在 95 到 100℃ 的温度范围内，Deep Vent 比 Vent 的稳定性更好。

Deep Vent® DNA 聚合酶 |
Deep Vent DNA 聚合酶晶体（Ira Schildkraut 和 Rebecca Kucera，来自 NEB 公司）
Deep Vent® DNA 聚合酶 | 使用 Deep Vent DNA 聚合酶扩增 Jurkat 细胞的基因组 DNA。扩增片段长度标注在胶图下方。Marker (M) 为 1 kb DNA Ladder（NEB #N3232）。

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自 Pyrococcus GB-D 的 Deep Vent® DNA 聚合酶基因。这种原生生物是从 2,010 米（1）的海底热喷口分离出来的，能够在高达 104℃ 的温度下生长。

产品类别:
Other PCR Polymerases Products

应用:
Routine PCR,
PCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0258S     -20    
        Deep Vent® DNA Polymerase M0258SVIAL -20 1 x 0.1 ml 2,000 units/ml
        ThermoPol® Reaction Buffer B9004SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X
        Magnesium Sulfate (MgSO4) Solution B1003SVIAL -20 1 x 1.5 ml 100 mM
    • M0258L     -20    
        Deep Vent® DNA Polymerase M0258LVIAL -20 1 x 0.5 ml 2,000 units/ml
        ThermoPol® Reaction Buffer B9004SVIAL -20 3 x 1.5 ml 10 X
        Magnesium Sulfate (MgSO4) Solution B1003SVIAL -20 1 x 1.5 ml 100 mM

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位是指在 75℃ 条件下，30 分钟能使 10 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶物所需的酶量。

    反应条件

    1X ThermoPol® 反应缓冲液套装

    1X ThermoPol® 反应缓冲液套装
    20 mM Tris-HCl
    10 mM (NH4)2SO4
    10 mM KCl
    2 mM MgSO4
    0.1% Triton® X-100
    (pH 8.8 @ 25°C)

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    100 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    50% Glycerol
    0.1% Triton® X-100
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    否

    分子量

    理论上的: 89000 道尔顿

    5′ – 3′ 核酸外切酶

    No

    3′ – 5′ 核酸外切酶

    Yes

    链置换

    ++

    产物末端

    • 平末端

    单位活性检测条件

    1X ThermoPol 反应缓冲液、每种浓度为 200 µM 的 dNTP（含 [3H]-dTTP）和 15 nM 已结合引物的 M13 DNA。

  • 优势和特性

    Features

    • 适用于富含 GC 模板或循环序列

    应用特性

    • 引物延伸
    • PCR

  • 相关产品

    相关产品

    • dNTP 混合液
    • dNTP 套装

    单独销售的组分

    • ThermoPol® 反应缓冲液套装
    • Magnesium Sulfate (MgSO4) Solution

  • 注意事项

    1. 该酶不提供 BSA，因为大多数引物延伸反应不需要 BSA。但如果需要，在售有 NEB #B9001。乙酰化的 BSA 不能用于引物延伸反应。
    2. Deep Vent DNA 聚合酶在 95℃ 的半衰期为 23 小时。
    3. 在售稀释液 D（NEB# B8004）。推荐使用此稀释液稀释 Deep Vent 聚合酶。
    4. 本产品还提供其它 ThermoPol 反应缓冲液套装（NEB# B9004）。每种缓冲液套装含 4 管 10X 缓冲液（1.5 ml/管）和 1 管 MgSO4（100 mM）。

  • 参考文献

    1. Jannasch, H.W. et al. (1992). Appl. Environ. Microbiol.. 58, 3472-3481.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Guidelines for PCR Optimization for Deep Vent® DNA Polymerase
    2. Protocol for a Routine Deep Vent® PCR

  • 使用指南

    • Guidelines for PCR Optimization with Thermophilic DNA Polymerases

工具 & 资源

  • 选择指南

    • DNA Polymerase Selection Chart
    • Thermophilic DNA Polymerases

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Can Deep Vent DNA Polymerase be used in other buffers?
    2. I can’t get Deep Vent DNA Polymerase to work yet Taq DNA Polymerase works fine.
    3. Are the DNA fragments produced by Deep Vent DNA Polymerase blunt-ended or do they have the single-base 3′ overhang that Taq DNA Polymerase yields?
    4. Can I use Deep Vent DNA Polymerase to polish the ends of DNA fragments?
    5. I want to clone primer extension products made with Vent DNA Polymerase or Deep Vent DNA Polymerase. Are some protocols better than others?
    6. Can Vent® DNA Polymerase (NEB# M0254) or Deep Vent® DNA Polymerase (NEB# M0258) be used to create blunt ends on primer extension products made with Taq DNA Polymerase (NEB# M0267)?

  • 问题解决指南

    • PCR Troubleshooting Guide

  • 实验技巧

    反应中的酶量至关重要。尝试在反应中加入终浓度为 0.01 U/µl 的 Deep Vent DNA 聚合酶。