α1-2,3,4,6 岩藻糖苷酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

α1-2,3,4,6 岩藻糖苷酶克隆自牛肾，是一种具有广谱特异性的糖苷外切酶，催化水解寡糖上 α1-2、α1-3、α1-4 和 α1-6 连接的岩藻糖残基。α1-2,3,4,6 岩藻糖苷酶切割 α1-2 和 α1-6 岩藻糖残基的效率高于其它键连接，对 α1-3 岩藻糖残基有轻微活性。

产品来源

克隆自牛肾，在 E. coli 中表达（1）。

特异性

α1-2,3,4,6 岩藻糖苷酶 |
产品类别:
Discontinued (<3 years)

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内将 1 nmol Fuc α1-2Galα1-4Glc -7-amino-4-methyl-coumarin（AMC）中超过 95% 的 α-L-岩藻糖水解所需要的酶量。

    单位定义检测
    在 10 μl 1X GlycoBuffer 1（添加 100 μg/ml BSA）中，将两倍稀释的 α1-2,3,4,6 岩藻糖苷酶与 1 nmol AMC 标记底物进行温育。反应混合液在 37℃ 条件下温育 1 小时。通过薄层色谱法观察反应产物的分离情况（2）。

    反应条件

    1X GlycoBuffer 1
    Supplement with 纯化的 BSA
    Incubate at 37°C

    1X GlycoBuffer 1
    5 mM CaCl2
    50 mM sodium acetate
    (pH 5.5 @ 25°C)

    贮存溶液

    20 mM Tris-HCl
    50 mM NaCl
    1 mM EDTA
    pH 7.5 @ 25°C

    热失活

    100°C for 10 minutes

    分子量

    理论上的: 51800 Da

    比活度

    72,000 unit/mg

  • 相关产品

    相关产品

    • α1-2 岩藻糖苷酶

  • 注意事项

    1. 8 个单位的酶在 100℃ 条件下温育 10 分钟失活。

  • 参考文献

    1. Vainauskas, S., New England Biolabs, Inc. Unpublished observation
    2. Wong-Madden, S.T. and Landry, D. (1995). Glycobiology 5. 19-28.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Typical Reaction Conditions for α1-2, 3, 4, 6 Fucosidase (P0748)

工具 & 资源

  • Web 工具

    • Glycan Analyzer

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What are Glycosidases and their uses?
    2. Does this enzyme require denaturing conditions to act on glycoproteins?
    3. What is a good method to re-purify a glycan or glycopeptide after exoglycosidase treatment?
    4. Do detergents inhibit glycosidases?
    5. What is the difference between α1-2 Fucosidase, α1-3,4,6 Fucosidase and α1-3,4 Fucosidase?
    6. Can I use α1-3,4 Fucosidase in a double digest with other exoglycosidases and/or endoglycosidases?
    7. How much exoglycosidase should be used?
    8. Can α1-3,4 Fucosidase and α1-2,3,4,6 Fucosidase cleave branched and complex substrates?

  • 实验技巧

    • 反复冻融会降低酶活性。推荐贮存温度为 4℃
    • 1 µg 糖蛋白或 100 nM 寡糖反应 1 小时，酶的最佳起始量范围为 1-2 µl。
    • 若底物为复杂的分支寡糖，可能需要延长温育时间（4 小时至过夜）。
    • α1-2,3,4,6 岩藻糖苷酶切割分支的 α1-4 和 α1-6 岩藻糖残基，但不切割分叉的 α1-2 岩藻糖残基。
    • α1-2,3,4,6 岩藻糖苷酶可部分切割线型和分支型 α1-3 岩藻糖残基，但效率较低。
    • 贮存缓冲液不包含 BSA；建议在反应中添加 BSA 以保持最佳酶活性