石蜡包埋组织切片RNA提取试剂盒 ISOGEN PB Kit

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

石蜡包埋组织切片RNA提取试剂盒                              ISOGEN PB Kit

从石蜡包埋组织切片提取RNA试剂盒

ISOGEN PB Kit

  本产品是石蜡包埋组织切片RNA提取试剂盒。包含从脱石蜡,Proteinase K 处理组织到利用 ISOGEN-LS 提取RNA,非常简便、短时间(约2小时)即可完成。提取的RNA可用于RT-PCR检测。

石蜡包埋组织切片RNA提取试剂盒                              ISOGEN PB Kit

◆特点

● 从石蜡包埋组织切片提取RNA

● 操作简便,且用时少(2小时)

● 提取的 RNA 可用于 RT-PCR



◆用途

● RT-PCR 检测 RNA 病毒

● RT-PCR 检测 mRNA

● 检测石蜡包埋组织切片的 RNA 保存度等

◆产品内容

产品

包装

备注

Proteinase K(20 mg/mL)

100 µL×1

Extraction Buffer

3 mL×1

可室温保存
Extraction Buffer 可能出现白色结晶,非质量问题。在37~50°C条件下,孵化后,结晶完全溶解后使用。

ISOGEN-LS

10 mL×1

非医疗用剧毒物

可冷藏保存(2~10°C)

Ethachinmate

60 µL×1

可冷藏保存(2~10°C)

Deoxyribonuclease(RT Grade)

20 µL×1

10× DNase(RT Grade)Buffer II

100 µL×1

Stop Solution(RT Grade)

100 µL×1

DEPC treated Water

500 µL×2

可室温保存

保存方法

  冷冻保存(-20°C)

试剂盒以外必需的试剂

● Lemosol® 或Lemosol® A

● 乙醇

● 氯仿

● 异丙醇

◆使用实例

操作前需知

  从石蜡包埋组织提取RNA 时, RNA 的分解持续到包埋过程,其 RNA 的完整性比从新鲜组织提取的 RNA 低。

  从哺乳动物的新鲜组织提取的 total RNA 经过电泳后,检测出明亮的 28S rRNA 和 18S rRNA 条带,其比例约为 2 : 1。使用石蜡包埋组织进行提取时,无法得出这个结果。实际上,使用小鼠的石蜡包埋组织进行提取实验,几乎无法检测 28S rRNA 。因此,在包埋过程中引导RNA分解。石蜡包埋状态关系到 RNA 的分解程度。有可检测出 18S rRNA 的石蜡块,也有 18S rRNA 降解太多而无法检测出来。Nippon Gene 将判断基准设定为剩余一个 18S rRNA,in situ hybridization 等、需要高保存度RNA时,建议设定标准。

  即使 RNA 已分解(包括无法确认 18S rRNA 的情况),可使用 RT-PCR 检测出基因,使用 RT-PCR 时,RNA 的完整性较好。但是使用石蜡包埋组织切片进行 PCR 时,扩增效率比一般情况的低,请注意避免引物长度设置过大(400 bp 以下,尽量设置为 200 bp以下)。

操作流程

石蜡包埋组织切片RNA提取试剂盒                              ISOGEN PB Kit

操作实例1 从小鼠颌下腺石蜡包埋组织切片提取RNA


  按照操作流程,从4片10 µm小鼠颌下腺石蜡包埋组织切片,提取RNA ,取1/4的 量(5 µL),使用1% 福尔马林変性Agarose S 进行电泳。

石蜡包埋组织切片RNA提取试剂盒                              ISOGEN PB Kit

操作实例2 RT-PCR检测小鼠Gapd基因

从小鼠颌下腺石蜡包埋组织切片提取500 ng RNA, DNase 处理后,进行RT-PCR,检测出小鼠glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase(Gapd)基因外显子5(258 bp)。

   

石蜡包埋组织切片RNA提取试剂盒                              ISOGEN PB Kit

   

石蜡包埋组织切片RNA提取试剂盒                              ISOGEN PB Kit


关于微量样本RT-PCR

  对于无法得到提取RNA的电泳结果或10 ng 以下的情况,建议添加RT反应補助试剂RTmate,进行逆转录。

◆备注

● 本产品为实验研究用试剂。请勿用于医疗用途。

◆资料 Data Sheet

产品手册

ISOGEN PB Kit 第二版 (PDF 261 KB)

SDS(Safety Data Sheet)

ISOGEN PB Kit (PDF)

◆相关产品

液体样本提取RNA用试剂 ISOGEN-LS

RT反应補助试剂 RTmate




产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
315-06421 ISOGEN PB Kit
ISOGEN石蜡组织切片RNA提取试剂盒 
20次用量