EpiSight™ BisulTaq™ DNA Polymerase, recombinant, Solution Ver.2-WAKO和光纯药

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  • 货号: 293-78701
    供应商: 上海金畔生物科技有限公司
    数量: 10
    英文名: EpiSight™ BisulTaq™ DNA Polymerase, recombinant, Solution Ver.2
    保存条件: Keep at -20 degrees C
    规格: 20Tests

    EpiSightTM Bisulfite Conversion Kit Ver.2

    EpiSightTMBisulTaqTM DNA Polymerase,recombinant,Solution Ver.2

     

      Enhanced Bisulfite Reaction抑制因亚硫酸氢钠反应的DNA分解,扩增长链长度。

      通过添加专利产品Bisulfite溶液和反应促进剂(Enhancer),能抑制模板DNA的分解,能让胞嘧啶转化为尿嘧啶的效率大幅度上升。使用离心柱能使DNA纯化操作更加简便。

      结合专用的Taq DNA Polymerase,即使是亚硫酸氢钠反应后,PCR扩增比较困难的碱基序列也能稳定且高效地扩增。

     

    ◆特点

    ● 离心柱操作简单

    ● 专利的Enhancer抑制DNA分解

    ● 有效扩增富含CpG的序列

    ● 热启动聚合酶防止非特异性扩增

     

    有以下需求的可以考虑使用本产品

    ● 扩增长链进行高效分析

    ● 非甲基化胞嘧啶不转换为尿嘧啶的情况

    ● 甲基化胞嘧啶转换为尿嘧啶的情况

    ● 想提高PCR扩增效率

     

    试剂盒内容(kit 内容)

    EpiSightTM Bisulfite Conversion Kit Ver.2(20次)

     

    Bisulfite   solution

    11.8ml×1

    Enhancer

    100µl×1

    吸附缓冲液

    10ml×1

    洗涤液

    4.8ml×1

    Desulfonation   buffer(脱磺缓冲液)

    1ml×1

    洗脱缓冲液

    500µl×1

    离心柱

    20个

     

     

    EpiSightTMBisulTaqTM DNA Polymerase,recombinant,Solution Ver.2(20次)

     

    BisulTaqTM DNA Polymerase,recombinant,Solution   Ver.2

    10µl×1

    10×反应缓冲液

    100µl×1

    dNTPs溶液(各 2mmol/l)

    100µl×1

     

    使用例1

       以小鼠ES细胞(胚胎干细胞)和M1细胞(白血病衍生细胞)的基因组DNA为模板,经过亚硫酸盐处理后,PCR扩增干细胞未分化标记FGF4启动子区。 PCR扩增的链长是521bp,CpG二核苷酸数为61位,对于亚硫酸氢钠PCR扩增链较长,因为 GC含量高,被认为是对三维结构影响较大的区域。

      ES细胞有干细胞未分化标记FGF4的mRNA表达,启动子区为非甲基化状态;M1细胞没有用于体细胞分化的Fgf4的mRNA表达,被认为启动子区处于甲基化状态。

    ● 样本:小鼠ES细胞和小鼠M1细胞的基因组DNA、

    ● PCR扩增链长:521bp(小鼠Fgf4启动子区)

    ● CpG:61位

    ● PCR扩增区域GenBank Accession No.

    ● AC_149593 : 230224–230744

     

    结果

    ES细胞和M1细胞的PCR扩增产物在克隆后,得到分析11个样本的碱基序列。小鼠ES细胞的Fgf4启动子区为非甲基化状态。小鼠M1细胞的Fgf4启动子区为甲基化状态。

     

    EpiSight™ BisulTaq™ DNA Polymerase, recombinant, Solution Ver.2-WAKO和光纯药

    EpiSight™ BisulTaq™ DNA Polymerase, recombinant, Solution Ver.2-WAKO和光纯药

     

    使用例2

      以Lambda DNA为模板,通过使用该试剂盒和DNA聚合酶在Bisulfite反应后,扩增910bp目的区域,分析碱基序列。Lambda DNA中所有的胞嘧啶都是非甲基化,Bisulfite反应后全部被转化为尿嘧啶,预测PCR扩增产物中不存在胞嘧啶。

    ● 样本:Lambda DNA

    ● 非甲基化胞嘧啶:150个

    ● PCR扩增链长:910pb

    ● PCR扩增区域GenBank Accession No NC_001416 : 26062–269

     

    结果

    下图所示,不存在胞嘧啶,150处的胞嘧啶全部转化为胸腺嘧啶。

    以往的Bisulfite法中,DNA分解严重,条件设置困难,本产品能简单地成功实现900bp以上的PCR产物扩增。

     

    EpiSight™ BisulTaq™ DNA Polymerase, recombinant, Solution Ver.2-WAKO和光纯药

     

    产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
    291-78501 EpiSight™BisulfiteConversion Kit Ver.2 20次 遗传因子研究用
    293-78701 EpiSight™ BisulTaq™ DNA Polymerase, recombinant, Solution Ver.2 20次 遗传因子研究用
     
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