ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品SSR

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  • 货号: 191-18375
    供应商: 上海金畔生物科技有限公司
    数量: 10
    英文名: StemSure® Serum Replacement
    规格: 500mL

    ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品

    StemSure® Serum Replacement

    ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品SSR-WAKO和光纯药

     

     

      本产品是ES细胞和iPS细胞培养中使用的血清代替品。血清含有分化诱导因子,会导致干细胞分化。使用本产品代替血清,可在ES和iPS细胞培养的同时,保持他们的未分化状态,达到稳定培养。
      本产品不含剧毒物质,将其作为普通物质处理。
      使用本产品配制培养基培养的小鼠ES细胞,可用于制备嵌合体小鼠,并确认其种系传递。

     

     

     

     

     

    ◆特点•优势

     

      ● 可用于嵌合体小鼠制备,并确认其种系传递。

      ● 作为血清替代品,用于小鼠ES细胞・人IPS细胞培养。

      ● 不含剧毒物质。

     

    ◆案例•应用

     

    1、嵌合体小鼠的制备与种系传递Update!!

     

      将组装HaloTag® cDNA的目标载体导入小鼠ES细胞,用含有StemSure®  Serum Replacement(SSR)的培养基培养。确认载体导入小鼠ES细胞后,将其注入至ICR小鼠的胚盘胞,并移植至ICR小鼠的子宫。得到的嵌合体小鼠与C57BL/6J小鼠交配,获得F1小鼠。

     

     

    (1)  嵌合体小鼠

     

      收集嵌合体小鼠的血液,用TRITC(四甲基若丹明异硫氰酸盐)对HaloTag® 蛋白质染色。发现小鼠ES细胞源的HaloTag® 的血液被染色,可确认为嵌合化。

        

          ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品SSR-WAKO和光纯药ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品SSR-WAKO和光纯药

     

     

    (2) F1小鼠

      F1小鼠的血液发现HaloTag® 存在,可确认用SSR培养基培养的ES细胞嵌合小鼠能够正常存活。

     

     

    ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品SSR-WAKO和光纯药 ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品SSR-WAKO和光纯药

     

     

     

    2、人iPS细胞201B7的培养

     

    (1) 克隆形态与ALP染色 

     

      已确认可用StemSure®Serum Replacement(SSR)培养人iPS细胞201B7株。ALP染色呈阳性。

     

    ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品SSR-WAKO和光纯药

     

      <培养基组成>
      D-MEM/Ham’s F-12 + 20% SSR + 2mmol/l L-Glutamine +1×MEM Non-essential Amino Acids + 0.1mmol/l StemSure® 2-Mercaptoethanol + 1×Penicillin-Streptomycin + 5ng/ml bFGF

     

     

    (2) 未分化标记的发现

     

      使用StemSure®Serum Replacement(SSR)培养的人iPS细胞201B7株,确认各种未分化标记(Sox2, Oct3/4, SSEA-3, SSEA-4, Tra-1-81)呈阳性。

     

     

    ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品SSR-WAKO和光纯药

     

     

     

    3、小鼠ES细胞D3的培养

     

    (1) 细胞形态与ALP染色

     

      使用StemSure®Serum Replacement(SSR)培养小鼠ES细胞D3,能观察到小鼠ES细胞群特有的光泽,ALP染色呈阳性。

     

     

    ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品SSR-WAKO和光纯药 

     

     

    (2) 细胞增殖曲线

     

      用不同培养基培养小鼠ES细胞D3进行14继代培养,比较细胞增殖。

      如下图所示StemSure® 系列与A公司有同等的性能。

     

    ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品SSR-WAKO和光纯药

     

     

      < StemSure® 系列培养基组成>
      StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2mmol/l L-Glutamine + 1×MEM Non-essentialAmino Acids + 0.1mmol/lStemSure® 2-Mercaptoethanol + 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000units/ml StemSure® LIF

      (使用胶原包被的12孔板)

     

    (3) 细胞群倍加数*

     

      使用不同培养基对小鼠ES细胞D3进行继代培养,检查培养天数与细胞群倍加数的关系。

      下图显示StemSure® 系列与A公司产品的细胞群倍加数相同。

     

    ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品SSR-WAKO和光纯药

     

     

      *细胞群倍加数 cell population doubling level,缩写PDL,指从培养开始至现在细胞群的倍增次数。

      <培养基组成>

      StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2mmol/l L-Glutamine + 1×MEM Non-essentialAmino Acids + 0.1mmol/l StemSure® 2-Mercaptoethanol + 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000units/ml StemSure® LIF

      (使用胶原包被的12孔板)

     
     

    (4) 未分化标记的检测

      使用StemSure® 系列对小鼠ES细胞D3进行5代继代培养,各种未分化标记(Nanog, Oct3/4, Sox2, SSEA-1)呈阳性。

     

    ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品SSR-WAKO和光纯药

     

     

      <培养基组成>
      StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2mmol/l L-Glutamine + 1×MEM Non-essential Amino Acids + 0.1mmol/l StemSure® 2-Mercaptoethanol+ 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000units/ml StemSure® LIF

     

     

    4、畸形瘤的形成

      用StemSure® 系列对小鼠ES细胞D3进行继代培养。对免疫不全小鼠的皮下注射培养后细胞。在形成皮下畸形瘤,其内部检测出神经组织(外胚叶源)、软骨组织(中胚叶源)、管腔结构纤毛上皮(内胚叶源)。

     

    ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品SSR-WAKO和光纯药

     

      <培养基組成 >
      StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2mmol/l L-Glutamine + 1×MEM Non-essential Amino Acids + 0.1mmol/l StemSure® 2-Mercaptoethanol+ 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000units/ml StemSure® LIF

     

    ★StemSure® 系列★
     
      StemSure® 系列可培养ES细胞和iPS細胞。使用小鼠ES细胞D3检测每批产品的品质。
     
      ● StemSure® D-MEM・巯基乙醇,硫代甘油
      ● StemSure® 明胶溶液
      ● StemSure® LIF, 小鼠, 重组. 溶液,
      ● StemSure® 冻存溶液
     
     

    产品编号 产品名称 等 级 规 格
    197-16275  StemSure® D-MEM(High Glucose)with Phenol Red and Sodium Pyruvate 细胞培养用 500ml
    198-15781  StemSure® 10mmol/l  2-Mercaptoethanol Solution(×100) 细胞培养用 100ml
    195-15791  StemSure® 50mmol/l Monothioglycerol Solution(×100)
        与2ME同等使用的还原剂。不属于毒物。
    细胞培养用 100ml
    190-15805  StemSure® 0.1w/v% Gelatin Solution 细胞培养用 500ml
    199-16051
    195-16053
     StemSure® LIF,Mouse, recombinant, Solution 细胞培养用 106units
    106units×10
    195-16031  StemSure® Freezing Medium 细胞培养用 100ml