上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
产品信息

产品来源
该酶克隆自米尔伊丽莎白菌(Elizabethkingia miricola),旧称脑膜脓毒性黄杆菌(Flavobacterium meningosepticum),并在 E. coli 中表达。
- 产品类别:
- Endoglycosidases Products
- 应用:
- Glycan Sequencing
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产品组分信息
本产品提供以下试剂或组分:
NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度 -
P0772S -20 Endo F2 P0772SVIAL -20 1 x 0.06 ml 8,000 units/ml GlycoBuffer 4 B1703SVIAL -20 1 x 1 ml 10 X
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特性和用法
单位定义
1 单位指 10 µl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时从 10 µg 猪纤维蛋白原中除去超过 95%的碳水化合物所需的酶量。
反应条件
1X GlycoBuffer 4
Incubate at 37°C1X GlycoBuffer 4
50 mM sodium acetate
(pH 4.5 @ 25°C)贮存溶液
20 mM Tris-HCl
50 mM NaCl
5 mM EDTA
pH 7.5 @ 25°C热失活
65°C for 10 minutes
分子量
实际: 39.8 kDa
单位活性检测条件
在 1X GlycoBuffer 4 中将两倍稀释的糖苷内切酶 F2 与 10 µg 猪纤维蛋白原进行温育,反应体系为 10 µl。反应混合液在 37℃ 条件下温育 1 小时。通过 SDS-PAGE 观察反应产物的分离情况。
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- Endo S
- 糖苷内切酶 D
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注意事项
- 该酶可在变性和非变性(天然)条件下使用。不过,在非变性条件下具有最佳活性。
- 如需更大反应体积,可按比例扩大反应体系。
操作说明、说明书 & 用法
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操作说明
- Endo F2 Reaction Protocol (P0772)
- Removal of Endo F2 by Magnetic Beads (P0772)
工具 & 资源
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选择指南
- Endoglycosidase Selection Chart
FAQs & 问题解决指南
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FAQs
- Is Endo F2 tagged?
- What is the difference between PNGase F and Endo F2?
- What is the difference between Endo F2 and Endo F3?
- How much Endo F2 should I use to deglycosylate a glycoprotein under native conditions?
- What is the preferred substrate for Endo F2?
- Do detergents inhibit Endo F2 activity?
- What is the optimal pH for Endo F2 activity?
- How do I eliminate Endo F2 from a reaction?
- What is the binding capacity of the Magnetic Chitin Beads used to remove Endo F2?
- Is Endo F2 compatible with downstream analysis such as HPLC and Mass Spectrometry?
- What are Glycosidases and their uses?
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实验技巧
- 糖苷内切酶 F2 携带有几丁质结合域(CBD)标签,可使用几丁质磁珠从反应中轻松去除(NEB #E8036)
- 要实现酶的最佳活性并非必须变性,因此,糖苷内切酶 F2 通常在非变性(天然)条件下使用。
- 体系里含 1% NP-40 时,浓度为 0.5%的 SDS 不会抑制糖苷内切酶 F2 活性。
- 切割双支链型糖链的最佳 pH 值为 pH 4.5(10X Glycobuffer 4)
- 虽然 pH 6.0 不是最佳 pH 值,但在该 pH 条件(10X Glycobuffer 3)下也可进行切割。