糖苷内切酶 F2 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

特异性:

糖苷内切酶 F2 |

产品来源

该酶克隆自米尔伊丽莎白菌(Elizabethkingia miricola),旧称脑膜脓毒性黄杆菌(Flavobacterium meningosepticum),并在 E. coli 中表达。

产品类别:
Endoglycosidases Products

应用:
Glycan Sequencing

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分:

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • P0772S     -20    
        Endo F2 P0772SVIAL -20 1 x 0.06 ml 8,000 units/ml
        GlycoBuffer 4 B1703SVIAL -20 1 x 1 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指 10 µl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时从 10 µg 猪纤维蛋白原中除去超过 95%的碳水化合物所需的酶量。

    反应条件

    1X GlycoBuffer 4
    Incubate at 37°C

    1X GlycoBuffer 4
    50 mM sodium acetate
    (pH 4.5 @ 25°C)

    贮存溶液

    20 mM Tris-HCl
    50 mM NaCl
    5 mM EDTA
    pH 7.5 @ 25°C

    热失活

    65°C for 10 minutes

    分子量

    实际: 39.8 kDa

    单位活性检测条件

    在 1X GlycoBuffer 4 中将两倍稀释的糖苷内切酶 F2 与 10 µg 猪纤维蛋白原进行温育,反应体系为 10 µl。反应混合液在 37℃ 条件下温育 1 小时。通过 SDS-PAGE 观察反应产物的分离情况。

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  • 注意事项

    1. 该酶可在变性和非变性(天然)条件下使用。不过,在非变性条件下具有最佳活性。
    2. 如需更大反应体积,可按比例扩大反应体系。

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Endo F2 Reaction Protocol (P0772)
    2. Removal of Endo F2 by Magnetic Beads (P0772)

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Endoglycosidase Selection Chart

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Is Endo F2 tagged?
    2. What is the difference between PNGase F and Endo F2?
    3. What is the difference between Endo F2 and Endo F3?
    4. How much Endo F2 should I use to deglycosylate a glycoprotein under native conditions?
    5. What is the preferred substrate for Endo F2?
    6. Do detergents inhibit Endo F2 activity?
    7. What is the optimal pH for Endo F2 activity?
    8. How do I eliminate Endo F2 from a reaction?
    9. What is the binding capacity of the Magnetic Chitin Beads used to remove Endo F2?
    10. Is Endo F2 compatible with downstream analysis such as HPLC and Mass Spectrometry?
    11. What are Glycosidases and their uses?

  • 实验技巧

    • 糖苷内切酶 F2 携带有几丁质结合域(CBD)标签,可使用几丁质磁珠从反应中轻松去除(NEB #E8036)
    • 要实现酶的最佳活性并非必须变性,因此,糖苷内切酶 F2 通常在非变性(天然)条件下使用。
    • 体系里含 1% NP-40 时,浓度为 0.5%的 SDS 不会抑制糖苷内切酶 F2 活性。
    • 切割双支链型糖链的最佳 pH 值为 pH 4.5(10X Glycobuffer 4)
    • 虽然 pH 6.0 不是最佳 pH 值,但在该 pH 条件(10X Glycobuffer 3)下也可进行切割。