产品信息

• 产品组分信息

  本产品提供以下试剂或组分：

  NEB #	名称	组分货号	储存温度	数量	浓度
  M0223S     -20       BamHI Methyltransferase M0223SVIAL -20 1 x 0.025 ml 4,000 units/ml   BamHI Methyltransferase Reaction Buffer B0223SVIAL -20 1 x 1 ml 10 X   S-adenosylmethionine (SAM) B9003SVIAL -20 1 x 0.1 ml 32 mM

• 特性和用法

  单位定义

  1 个单位是指在 37℃ 条件下，10 µl反应体系中，1 小时内能保护 1 µg λ DNA 不被 BamHI 限制性内切酶切割所需的酶量。

  反应条件

  1X BamHI 甲基转移酶反应缓冲液
  Supplement with 80 µM S-adenosylmethionine (SAM)
  Incubate at 37°C

  对照保护实验

  在 10 µl 补充了 80 µM S-腺苷甲硫氨酸的 1X BamHI 甲基转移酶缓冲液中，BamHI 甲基转移酶与 1 µg λ DNA 于 37℃ 温育 1 小时，后于 65℃ 温育 15 分钟。然后添加 40 µl 补充了 10 mM MgCl₂ 和 10 个单位 BamHI 限制性内切酶的 NEBuffer 1，通过酶切实验确定 BamHI 甲基转移酶的保护能力。37℃ 条件下温育 30 分钟后用琼脂糖凝胶电泳分析。

  贮存溶液

  50 mM Tris-HCl
  1 mM DTT
  10 mM EDTA
  200 µg/ml BSA
  50% Glycerol
  pH 7.5 @ 25°C

  热失活

  否

• 相关产品

  单独销售的组分

  • S-腺苷甲硫氨酸（SAM）

• 注意事项

  1. SAM 贮存要求：S-腺苷甲硫氨酸以溶解在 0.005 M 硫酸和 10% 乙醇的 32 mM 溶液形式贮存于 –20℃。满足理想的贮存条件时，此溶液中的 SAM 可保持活性长达 6 个月。SAM 在 37℃，pH 7.5 的条件下不稳定；因此，当反应温育时间超过 4 小时，需补充 SAM。使用新鲜配置的 SAM 可以减轻实现完全酶切过程中遇到的许多问题。

• 参考文献

  1. Hoffman, J.L. (1986). Biochemistry. 25, 4444-4449.

操作说明、说明书 & 用法

• 操作说明

  1. Recommended Protocol for Methylation of Genomic DNA

FAQs & 问题解决指南

• FAQs

  1. Is S-adenosylmethionine (SAM) supplied with the Methyltransferase?
  2. What should be considered if the methylation is not going to completion?
  3. What is the molecular weight of BamHI Methyltransferase?
  4. Will any NEB methyltransferases (methylases) work on RNA?