PCR Marker |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

PCR Marker 包含多种已获专利的质粒，此类质粒经适当的限制性内切酶消化完成后，产生的 5 条条带适合用作琼脂糖凝胶电泳分子量标准。消化后的 DNA 包含 50 bp 到 766 bp 的片段。提供每条 DNA 条带的近似质量（当上样量为 0.3 μg 时），可对分子量大小相近的样品进行粗略定量。

随附 1 管 6X 紫色凝胶上样染料，无 SDS。

  • 推荐凝胶百分比范围：1.8% – 3%
  • 最佳分离百分比 2%

PCR Marker |
PCR Marker visualized by ethidium bromide staining on a 1.8% TBE Agarose Gel. Mass values are for 0.3 μg/lane.
产品类别:
DNA Markers & Ladders Products

应用:
DNA Analysis

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • N3234S     -20    
        PCR Marker N3234SVIAL -20 1 x 0.1 ml 300 µg/ml
        Gel Loading Dye, Purple (6X), no SDS B7025SVIAL 25 1 x 1 ml 6 X
    • N3234L     -20    
        PCR Marker N3234LVIAL -20 1 x 0.5 ml 300 µg/ml
        Gel Loading Dye, Purple (6X), no SDS B7025SVIAL 25 1 x 1 ml 6 X

  • 特性和用法

    碱基

    Fragment Mass (ng) bp
    1 62 766
    2 40 500
    3 48 300
    4 61 150
    5 89 50

    有效大小范围

    50bp to 766bp

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    1 mM EDTA
    pH 8 @ 25°C

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    • Monarch® DNA 胶回收试剂盒
    • Monarch® PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）

    单独销售的组分

    • 6X 紫色凝胶上样染料，无 SDS

  • 注意事项

    1. 建议使用上样缓冲液稀释，并取 0.3 μg 的 PCR Marker 上样。
      此 Marker 不适用于对 DNA 进行精确定量，但是可对分子量大小相近的样品进行粗略定量。
    2. PCR Marker 可在 4℃ 环境中稳定贮存至少 3 个月。
    3. 长期贮存时，请贮存在 -20℃ 环境中。如需稀释样本，请使用 TE 或离子强度极低的其它缓冲液。如果使用 dH2O 稀释，DNA 可能会变性。
    4. 所有末端均有 5′ 突出末端，可使用 T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK，NEB #M0201）进行标记，或使用 DNA 聚合酶 I Klenow 片段（NEB #M0210）补平（1）。使用 α-[32P] dCTP 或 α-[32P] dGTP 进行补平反应。
    5. 1 管紫色凝胶上样染料，无 SDS：
      2.5% Ficoll®-400
      10 mM EDTA
      3.3 mM Tris-HCl（pH 8.0@25℃）
      0.02% 染料 1
      0.001% 染料 2

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. End-labeling Protocol
    2. Suggested Loading Protocol for DNA Ladders & Markers

工具 & 资源

  • 选择指南

    • DNA Markers & Ladders Selection Tool

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What are the overhangs on the DNA ladder fragments? Can I end-label them using the T4 polynucleotide kinase (PNK)? What about the Klenow fragment?
    2. How can I quantify the amount of DNA in each band of a marker?
    3. Can I use Midori Green with the DNA Ladders from NEB?
    4. Why are there extra bands visible on polyacrylamide gels?
    5. Can I use SYBR® and/or GelRed® dyes with the DNA Ladders from NEB?
    6. Why is my DNA Ladder floating out the wells and Why are there no bands visible in my DNA ladder gel lane?

  • 实验技巧

    推荐使用 TE 缓冲液而非水稀释，配制成即用型。