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产品信息
超螺旋 DNA Ladder 包含 9 种专有超螺旋质粒,大小为 2 到 10 kb,适用作琼脂糖电泳的超螺旋分子量标准。5 kb 质粒的强度更高,可用作参照带。
- 推荐凝胶百分比范围:0.6% – 1%
- 0.8% 时可实现最佳分离
- 建议的迁移条件:不超过 5 V/cm(电极之间的距离),不超过 60 分钟
随附 1 管 6X 紫色凝胶上样染料,无 SDS。
- 产品类别:
- DNA Markers & Ladders Products
- 应用:
- DNA Analysis
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产品组分信息
本产品提供以下试剂或组分:
NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度 -
N0472S -20 Supercoiled DNA Ladder N0472SVIAL -20 1 x 0.1 ml 500 µg/ml Gel Loading Dye, Purple (6X), no SDS B7025SVIAL 25 1 x 1 ml 6 X
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特性和用法
碱基
Fragment Mass (ng) bp 1 45 10000 2 45 8000 3 45 6000 4 136 5000 5 45 4000 6 45 3500 7 45 3000 8 45 2500 9 45 2017 有效大小范围
2,017bp to 10,000bp
贮存溶液
10 mM Tris-HCl
1 mM EDTA
pH 8 @ 25°C -
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单独销售的组分
- 6X 紫色凝胶上样染料,无 SDS
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注意事项
- 此 Ladder 可能含有微量切刻 DNA 和大于 10 kb 的二聚体。要最大程度减少超螺旋 DNA 的切刻,请始终使用无菌移液枪头并避免反复冻融。琼脂糖凝胶中的超螺旋质粒迁移率可能发生变化,具体取决于琼脂糖浓度、缓冲液和电泳条件。在 TE 或其它离子强度极低的缓冲液中稀释。如果在 dH20 中稀释,DNA 可能会变性。
- 9 种专有质粒经过纯化、苯酚抽提,再平衡至 10 mM Tris-HCl(pH 8.0)和 1 mM EDTA 的溶液中。
- 使用之前,应快速离心并轻轻混合。建议上样 0.5 µg(1 µl)的超螺旋 DNA Ladder(在上样缓冲液中稀释)。此 Ladder 不适合精确定量 DNA 质量,但是可用于估算强度相当、大小相似的样本中的 DNA 质量。
- 贮存条件:建议分装为多份,避免反复冻融。
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参考文献
- Sambrook, J., Fritsch, E.F. and Maniatis, T. (1989). Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press. (2nd ed.),
操作说明、说明书 & 用法
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操作说明
- Suggested Loading Protocol for DNA Ladders & Markers
- Suggested Loading Protocol for DNA Ladders & Markers
FAQs & 问题解决指南
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FAQs
- Can I use Midori Green with the DNA Ladders from NEB?
- Can I use SYBR® and/or GelRed® dyes with the DNA Ladders from NEB?
- Why is my DNA Ladder floating out the wells and Why are there no bands visible in my DNA ladder gel lane?
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实验技巧
建议进行分装,避免反复冻融。