Monarch® DNA 胶回收试剂盒 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

Monarch DNA 胶回收试剂盒能快速可靠地从琼脂糖凝胶中纯化多达 5 μg 的高浓度、高质量 DNA。该产品中使用的结合/洗涤/洗脱流程，仅需极短的温育和离心时间。纯化柱可确保零缓冲液残留，零交叉污染，洗脱体积低至 6 μl。随附的缓冲液已经过优化，无需检测 pH 值。与其它试剂盒不同，使用本产品时，无需在上样之前向熔化的琼脂糖中添加异丙醇，因此可省去一个步骤。洗脱得到的 DNA 可用于限制性酶切、DNA 测序、连接和其它酶促实验。遵循可持续性发展的理念设计，Monarch 试剂盒大幅减少塑料用量，产品包装仅使用来源可靠的可回收材料。

观看我们的视频，了解 Monarch 操作流程、技巧和回收信息。

Monarch DNA 纯化柱设计
Monarch® DNA 胶回收试剂盒 |
Monarch 纯化柱专为实现卓越性能设计
Monarch® DNA 胶回收试剂盒 |
Monarch 纯化柱舍弃了固定环的设计，因此能消除缓冲液残留和交叉污染风险，从而实现快速无忧的 DNA 纯化。

优势：

  • 洗脱体积低至 6 μl
  • 纯化柱设计经优化，可防止缓冲液残留和盐交叉污染
  • 使用快速易用的操作流程来节省时间
  • 无需检测 pH 值或添加异丙醇
  • 缓冲液和纯化柱可单独出售
  • 与其它试剂盒相比，塑料用量大幅减少
  • 产品包装仅使用来源可靠的可回收材料


规格

DNA 样本类型： 琼脂糖凝胶中的双链 DNA
结合能力： 多达 5 μg
DNA 大小范围： 50 bp 至 25 kb
常规回收率： DNA（50 bp 至 10 kb）：70%–90%
DNA（11–23 kb）：50%–70%
洗脱体积： ≥ 6 μl
纯度： A260/280 > 1.8
操作流程时间： 离心和温育时间为 10 分钟
兼容下游应用
应用：		 连接、限制性酶切、标记和其它酶促操作，
以及建库和 DNA 测序。

Monarch DNA 胶回收试剂盒操作流程
Monarch® DNA 胶回收试剂盒 |
使用 Monarch DNA 胶回收试剂盒得到的纯化 DNA，其回收效率和纯度与头部供应商的产品效果相当，但浓度更高，更有利于下游实验的开展
Monarch® DNA 胶回收试剂盒 |
1 ug 的 3 kb 片段在 1% w/v 琼脂糖凝胶电泳后，使用不同的试剂盒回收，采用试剂盒要求的最小体积洗脱。用 Nanodrop™ 测量洗脱得到的 DNA 浓度和纯度，并根据该浓度和回收的体积计算出回收效率。
Monarch DNA 胶回收试剂盒可重复回收各种分子量的 DNA。
Monarch® DNA 胶回收试剂盒 |
制备 7 个 DNA 片段的混合液，大小范围从 10 kb 至 0.5 kb。取一半的混合液在 1% 凝胶中进行分离。从琼脂糖凝胶中手动切出每个片段，分别使用 Monarch DNA 胶回收试剂盒回收。每个片段的全部洗脱产物和剩下的 DNA 混合液重新进行琼脂糖凝胶电泳，并比较结果。
使用 Monarch DNA 胶回收试剂盒从琼脂糖凝胶中纯化的 DNA 能重复地分离和连接。
Monarch® DNA 胶回收试剂盒 |
使用 1% 琼脂糖凝胶电泳分离 2 ug 末端互补的 3 kb 片段，切胶后使用 Monarch DNA 胶回收试剂盒纯化。使用 20 μl 洗脱液洗脱样本，其中一部分（总量的 1/4）使用平末端/TA 连接酶预混液（NEB #M0367）进行连接。将 5 个重复的样本在第二个 1% 琼脂糖凝胶上分离。M 为 1 kb DNA Ladder（NEB #N3232）。

 

产品类别:
DNA Gel Extraction Products,
Nucleic Acid Purification Products

应用:
Nucleic Acid Purification

  • 试剂盒组成

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • T1020S     25    
        Monarch® DNA Cleanup Columns (5 μg) T1034-2 25 1 x 50 columns Not Applicable
        Monarch® Collection Tubes (2 ml) T1018-2 25 1 x 50 tubes Not Applicable
        Monarch® DNA Wash Buffer T1032-2 25 1 x 5 ml Not Applicable
        Monarch® Gel Dissolving Buffer T1021-2 25 1 x 47 ml Not Applicable
        Monarch® DNA Elution Buffer T1016-21 25 1 x 3 ml Not Applicable
    • T1020L     25    
        Monarch® DNA Cleanup Columns (5 μg) T1034-2 25 5 x 50 columns Not Applicable
        Monarch® Collection Tubes (2 ml) T1018-2 25 5 x 50 tubes Not Applicable
        Monarch® DNA Wash Buffer T1032-3 25 1 x 25 ml Not Applicable
        Monarch® Gel Dissolving Buffer T1021-3 25 1 x 235 ml Not Applicable
        Monarch® DNA Elution Buffer T1016-2 25 1 x 7 ml Not Applicable

  • 优势和特性

    Features

    • 洗脱体积低至 6 μl
    • 纯化柱设计经优化，可防止缓冲液残留和盐交叉污染
    • 使用快速易用的操作流程来节省时间
    • 无需检测 pH 值或添加异丙醇
    • 缓冲液和纯化柱可单独出售
    • 与其它试剂盒相比，塑料用量大幅减少
    • 产品包装仅使用来源可靠的可回收材料

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    单独销售的组分

    • Monarch® DNA 纯化离心柱（5 μg）
    • Monarch® 溶胶缓冲液
    • Monarch® DNA 洗涤缓冲液
    • Monarch® DNA 洗脱缓冲液

  • 注意事项

    1. 请在室温下贮存试剂盒。请保持缓冲液瓶盖处于密封状态，并将纯化柱置于密封的自封袋中。如需了解缓冲液成份的信息，请参阅“安全数据表”。请遵循对应的实验安全操作规范，包括穿戴实验服、手套、护目镜。

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Monarch® DNA Gel Extraction Kit Protocol (NEB #T1020)
    2. Download Quick Protocol Card T1020

  • 说明书

    产品说明书包含产品使用的详细信息、产品配方和质控分析。

    • manualT1020

  • 使用指南

    • Back to basics: Important things to keep in mind when purifying plasmids and DNA fragments
    • Six Tips for a Perfect Gel Extraction

  • 应用实例

    • A Practical Guide to Analyzing Nucleic Acid Concentration and Purity with Microvolume Spectrophotometers

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Can I purchase Monarch buffers and columns separately?
    2. Can I use water to elute the DNA when using the Monarch Kits?
    3. What is the smallest volume of elution buffer that can be used with the Monarch DNA Cleanup Column?
    4. What factors affect my (A260/A230)?
    5. Are the columns in the Monarch PCR & DNA Cleanup Kit (5 μg) the same as the ones in the Monarch DNA Gel Extraction Kit?
    6. What is the composition of each buffer provided with the Monarch DNA Gel Extraction Kit?
    7. What is the maximum binding capacity of the Monarch DNA Cleanup Column provided in the Monarch DNA Gel Extraction Kit?
    8. Can I excise a fragment from a gel and store it for purification at a later time?
    9. What size of DNA can be purified with the Monarch DNA Cleanup Columns?
    10. What type of agarose gels are compatible with the Monarch DNA Gel Extraction Kit?
    11. After purification, I see a faint additional band running below the expected size on a gel. What happened?
    12. Are Monarch spin columns compatible with Vacuum Manifolds?

  • 问题解决指南


    DNA 产量低

    • 试剂添加错误。检查操作流程，确保缓冲液配制正确，缓冲液添加顺序正确，正确处理纯化柱流穿液和洗脱产物。
    • 凝胶块未完全溶解。琼脂糖小块可能会堵塞纯化柱，或影响 DNA 结合。确保在 Monarch 溶胶缓冲液中，在适当的温度范围内将凝胶块温育指定时间。混合样品并定时检查，掌握琼脂糖的溶解情况。
    • 凝胶会在高于 60℃ 时溶解。如果在高于指定范围（37–55℃）的温度下温育，DNA 可能会变性。
    • 制备过程中洗脱不完全。确保 DNA 洗脱缓冲液直接添加到纯化柱中心，完全覆盖基质，从而实现有效洗脱。增加的洗脱体积和延长的温育时间可以增加洗脱的 DNA 量，但会稀释样本和增加处理时间。对于 10 kb 以下的常规片段，说明书中推荐的洗脱体积和温育时间可以满足需求，除非需要最大产量。对于更大片段的纯化，可在洗脱前将 DNA 洗脱缓冲液加热到 50℃，并在加上缓冲液后延长温育时间至 5 分钟，以提高产量。此外，可进行多轮洗脱来增加 DNA 产量，但会稀释样本。

    DNA 质量差

    • 凝胶块未完全溶解。未溶解琼脂糖可能会导致盐分渗入洗脱的 DNA 中。确保在 Monarch 溶胶缓冲液中，在适当的温度范围内将凝胶块温育指定时间。混合样品并定时检查，掌握琼脂糖的溶解情况。
    • 乙醇残留。最后的洗涤离心时间为 1 分钟，以确保完全去除纯化柱中的洗涤缓冲液。此外，将纯化柱转移到新收集管中进行洗脱步骤时，务必确保纯化柱尖端不会接触流穿液。
    • 在洗脱步骤中，痕量的盐残留会导致 OD260/230 低比值。将纯化柱转移到新收集管中进行洗脱步骤时，务必确保纯化柱尖端不会接触流穿液。
    • Troubleshooting Guide for DNA Cleanup and Plasmid Purification

  • 实验技巧

    Monarch DNA 胶回收试剂盒操作流程
    了解如何使用 Monarch DNA 胶回收试剂盒从琼脂糖凝胶中纯化 DNA。
    Monarch® DNA 胶回收试剂盒 |

    Monarch DNA 胶回收试剂盒使用技巧
    了解有关 Monarch DNA 胶回收试剂盒的快速使用技巧，优化 DNA 凝胶回收的操作流程。
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    如何循环使用 Monarch 试剂盒组份
    了解如何轻松循环使用 Monarch 试剂盒中的所有组份。
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