Monarch PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）| 纯化试剂盒 |NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

Monarch PCR & DNA 纯化试剂盒是一款快速可靠的纯化试剂盒，可从 PCR 和其它酶促反应中纯化多达 5 μg 高浓度和高纯度的 DNA。该产品中使用的结合/洗涤/洗脱流程，仅需极短的温育和离心时间。纯化柱可确保零缓冲液残留，零交叉污染，洗脱体积低至 6 μl。随附的缓冲液已经过优化，无需检测 pH 值。洗脱得到的 DNA 可用于限制性酶切、DNA 测序、连接和其它酶促实验。遵循可持续性发展的理念设计，Monarch 试剂盒大幅减少塑料用量，产品包装仅使用来源可靠的可回收材料。也可修改该操作流程，使其能够纯化更小的 DNA 片段，例如寡核苷酸和单链 DNA。

观看我们的视频，了解 Monarch 操作流程、技巧和回收信息。

 

应用
PCR 纯化 从扩增后的 PCR 反应体系中纯化 DNA，去除聚合酶、引物、变性剂、dNTP 等。
酶促反应纯化 高效去除限制性内切酶和修饰酶，如连接酶、激酶、核酸酶、磷酸酶等，从而对 DNA 样品进行有效的脱盐和浓缩。
cDNA 纯化 可以纯化 DNA/RNA 复合物，在反转录/扩增后去除反转录酶、聚合酶以及核苷酸。
标记纯化 从 DNA 底物中去除游离的带有放射性标记或荧光标记的核苷酸
质粒纯化 来源不明的质粒制品可能混杂抑制剂和污染物。使用此试剂盒可轻松进行纯化和浓缩。
寡核苷酸纯化 使用寡核苷酸纯化操作流程可纯化单链 DNA 寡核苷酸（≥ 18 nt）和双链 DNA 片段（≥ 15 bp）。
Monarch DNA 纯化柱设计
Monarch PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）| 纯化试剂盒 |

Monarch 纯化柱专为实现卓越性能设计
Monarch PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）| 纯化试剂盒 |
Monarch 纯化柱舍弃了固定环的设计，因此能消除缓冲液残留和交叉污染风险，从而实现快速无忧的 DNA 纯化。


规格

DNA 样本类型： PCR 和其它酶促反应（如限制性酶切、激酶反应、连接反应）中的 DNA。
使用寡核苷酸纯化操作流程可纯化酶促反应中的单链 DNA 或双链 DNA 寡核苷酸链。
结合能力： 多达 5 μg
DNA 大小范围： 50 bp 至 25 kb
使用寡核苷酸纯化操作流程可纯化 ≥ 15 bp 至 25 kb 的 DNA（双链 DNA）和 ≥ 18 nt 至 10 kb 的 DNA（单链 DNA）。
常规回收率：

DNA（50 bp 至 10 kb）：70%–90%
DNA（11–23 kb）：50%–70%
≥ 18 nt 的单链 DNA 和 ≥ 15 bp 的双链 DNA：70%-85%
洗脱体积： ≥ 6 μl
纯度： A260/280 > 1.8 及 A260/230 > 1.8
操作流程时间： 离心和温育时间为 5 分钟
兼容下游应用
应用：		 连接、限制性酶切、标记和其它酶促操作，
以及建库和 DNA 测序。

Monarch PCR & DNA 纯化试剂盒（5 µg）操作流程
Monarch PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）| 纯化试剂盒 |
Monarch PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）的表现与头部供应商的产品相当
Monarch PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）| 纯化试剂盒 |
根据建议的操作流程进行样品制备。1 μg 3 kb DNA 片段与 1 μM 引物和 OneTaq® Quick-Load® 2X 预混液（NEB #M0486）混合进行温育。分别使用 20 μl（NEB）和 40 μl（Qiagen）的洗脱缓冲液洗脱 DNA。取一半的洗脱产物，使用 5 单位 DraIII-HF®（NEB #R3510）进行酶切。通过 1% w/v 琼脂糖凝胶电泳检测酶切产物、未使用的洗脱产物以及起始样本。
Monarch PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）能去除双链 DNA 样本中的低分子量引物
Monarch PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）| 纯化试剂盒 |
在三个独立扩增子（267 bp、520 bp、1003 bp）中掺入两个寡核苷酸（16-mer、24-mer），终浓度 1 μM。取该混合物的一半体积，按照说明书中的实验流程，使用 Monarch PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）纯化。将等量的原始混合物和纯化后产物上样到 20% TBE 丙烯酰胺凝胶电泳上，100V 电泳 1 小时，然后使用 SYBR Green II 染色。

产品类别:
DNA Cleanup Products,
Nucleic Acid Purification Products

应用:
PCR & Reaction Cleanup,
Nucleic Acid Purification

  • 试剂盒组成

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • T1030S     25    
        Monarch® DNA Cleanup Columns (5 μg) T1034-2 25 1 x 50 columns Not Applicable
        Monarch® Collection Tubes (2 ml) T1018-2 25 1 x 50 tubes Not Applicable
        Monarch® DNA Wash Buffer T1032-2 25 1 x 5 ml Not Applicable
        Monarch® DNA Cleanup Binding Buffer T1031-2 25 1 x 38.5 ml Not Applicable
        Monarch® DNA Elution Buffer T1016-21 25 1 x 3 ml Not Applicable
    • T1030L     25    
        Monarch® DNA Cleanup Columns (5 μg) T1034-2 25 5 x 50 columns Not Applicable
        Monarch® Collection Tubes (2 ml) T1018-2 25 5 x 50 tubes Not Applicable
        Monarch® DNA Wash Buffer T1032-3 25 1 x 25 ml Not Applicable
        Monarch® DNA Cleanup Binding Buffer T1031-3 25 1 x 175 ml Not Applicable
        Monarch® DNA Elution Buffer T1016-2 25 1 x 7 ml Not Applicable

  • 优势和特性

    Features

    • 洗脱体积低至 6 μl
    • 纯化柱设计经优化，可防止缓冲液残留和盐交叉污染
    • 使用快速易用的操作流程来节省时间
    • 无需检测 pH 值
    • 缓冲液和纯化柱可单独出售
    • 产品包装仅使用来源可靠的可回收材料
    • 与其它试剂盒相比，塑料用量大幅减少

  • 相关产品

    相关产品

    • 6X 紫色凝胶上样染料
    • 6X 紫色凝胶上样染料，无 SDS
    • Quick-Load® 紫色 1 kb DNA Ladder
    • Quick-Load® 紫色 100 bp DNA Ladder
    • Quick-Load® 紫色 1 Kb Plus DNA Ladder
    • T4 DNA 连接酶
    • 平末端/TA 连接酶预混液
    • 瞬时粘性末端连接酶预混液
    • t1010-monarch-plasmid-miniprep-kit
    • Monarch® DNA 胶回收试剂盒

    单独销售的组分

    • Monarch® DNA 纯化离心柱（5 μg）
    • Monarch® DNA 纯化结合缓冲液
    • Monarch® DNA 洗涤缓冲液
    • Monarch® DNA 洗脱缓冲液

  • 注意事项

    1. 请在室温下贮存试剂盒。请保持缓冲液瓶盖处于密封状态，并将纯化柱置于密封的自封袋中。如需了解缓冲液成份的信息，请参阅“安全数据表”。请遵循对应的实验安全操作规范，包括穿戴实验服、手套、护目镜。

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Download Quick Protocol Card T1030
    2. Protocol for DNA Cleanup and Concentration Using the Monarch® PCR & DNA Cleanup Kit (5 μg) (NEB #T1030)
    3. Oligonucleotide Cleanup Using Monarch® PCR & DNA Cleanup Kit (5 μg) Protocol (NEB #T1030)

  • 说明书

    产品说明书包含产品使用的详细信息、产品配方和质控分析。

    • manualT1030

  • 使用指南

    • Back to basics: Important things to keep in mind when purifying plasmids and DNA fragments
    • Tips for the Monarch PCR & DNA Cleanup Kit

  • 应用实例

    • A Practical Guide to Analyzing Nucleic Acid Concentration and Purity with Microvolume Spectrophotometers

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Can I purchase Monarch buffers and columns separately?
    2. Can I use water to elute the DNA when using the Monarch Kits?
    3. What is the smallest volume of elution buffer that can be used with the Monarch DNA Cleanup Column?
    4. What is the composition of each buffer provided with the Monarch PCR & DNA Cleanup Kit (5 μg)?
    5. What is the maximum binding capacity of the Monarch DNA Cleanup Column provided with the Monarch PCR & DNA Cleanup Kit (5 μg)?
    6. What factors affect my (A260/A230)?
    7. What size primers can be effectively removed from a PCR reaction?
    8. Can the Monarch PCR & DNA Cleanup Kit (5 μg) be used to purify RNA?
    9. Do you have any recommendations for purification of ssDNA?
    10. Are the columns in the Monarch PCR & DNA Cleanup Kit (5 μg) the same as the ones in the Monarch DNA Gel Extraction Kit?
    11. What size of DNA can be purified with the Monarch DNA Cleanup Columns?
    12. After purification, I see a faint additional band running below the expected size on a gel. What happened?
    13. Are Monarch spin columns compatible with Vacuum Manifolds?
    14. Can I use the Monarch DNA & PCR Cleanup Kit to purify oligonucleotides and other short DNA fragments?
    15. If I need to clean up more than 5 μg of DNA, is there another higher capacity column alternative to the columns included in the Monarch PCR & DNA Cleanup kit (NEB #T1030)?

  • 问题解决指南


    DNA 产量低

    • 试剂添加错误。检查操作流程，确保缓冲液配制正确，缓冲液添加顺序正确，正确处理纯化柱流穿液和洗脱产物。
    • 制备过程中洗脱不完全。确保 DNA 洗脱缓冲液直接添加到纯化柱中心，完全覆盖基质，从而实现有效洗脱。增加的洗脱体积和延长的温育时间可以增加洗脱的 DNA 量，但会稀释样本和增加处理时间。对于 10 kb 以下的常规片段，说明书中推荐的洗脱体积和温育时间可以满足需求，除非需要最大产量。对于更大片段的纯化，可在洗脱前将 DNA 洗脱缓冲液加热到 50℃，并在加上缓冲液后延长温育时间至 5 分钟，以提高产量。此外，可进行多轮洗脱来增加 DNA 产量，但会稀释样本。

    DNA 质量差

    • 乙醇残留。确保最后的洗涤离心时间为 1 分钟，以完全去除纯化柱中的洗涤缓冲液。此外，将纯化柱转移到新收集管中进行洗脱步骤时，务必确保纯化柱尖端不会接触流穿液。
    • 在洗脱步骤中，痕量的盐残留会导致 OD260/230 低比值。将纯化柱转移到新收集管中进行洗脱步骤时，务必确保纯化柱尖端不会接触流穿液。
    • Troubleshooting Guide for DNA Cleanup and Plasmid Purification

  • 实验技巧

    Monarch PCR & DNA 纯化试剂盒操作流程
    了解如何使用 Monarch PCR & DNA 纯化试剂盒（5 µg）从 PCR 等酶促反应中分离 DNA。
    Monarch PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）| 纯化试剂盒 |

    Monarch PCR & DNA 纯化试剂盒使用技巧
    了解有关 Monarch PCR & DNA 纯化试剂盒的快速使用技巧，优化从 PCR 和其它酶促反应中分离 DNA 的操作流程。
    Monarch PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）| 纯化试剂盒 |

    如何循环使用 Monarch 试剂盒组份
    了解如何轻松循环使用 Monarch 试剂盒中的所有组份。
    Monarch PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）| 纯化试剂盒 |