APE 1 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

人源脱嘌呤/脱嘧啶（AP）核酸内切酶 APE 1，也称为 HAP 1 或 Ref-1，与大肠杆菌核酸外切酶 III 蛋白具有同源性。APE 1 水解断裂脱嘌呤/脱嘧啶位点 5´ 端的磷酸二酯键，产生单链 DNA 断裂，留下 3´ 羟基和 5´ 脱氧核糖磷酸末端。除具有 AP 核酸内切酶活性外，据报道 APE 1 还具有弱的 DNA 3´ 二酯酶、3´→5´ 核酸外切酶和 RNase H 活性（3-5）。

除 DNA 修复活性外，APE 1 还能通过氧化还原机制（Ref-1）在体外调控多种转录因子的 DNA 结合活性。APE 1 已被证实能刺激 Fos-Jun 异源二聚体、Jun-Jun 同源二聚体、Hela 细胞 AP-1 蛋白以及包括 NF-kB、Myb 和 ATF/CREB 家族成员在内的其它几种转录因子的 DNA 结合活性（7-9）。

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有人 APE 1 基因。

产品类别:
DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases Products

应用:
Polymerases for DNA Manipulation

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0282S     -20    
        APE 1 M0282SVIAL -20 1 x 0.1 ml 10,000 units/ml
        NEBuffer™ 4 B7004SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X
    • M0282L     -20    
        APE 1 M0282LVIAL -20 1 x 0.5 ml 10,000 units/ml
        NEBuffer™ 4 B7004SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指在 10 µl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能切割 20 pmol 含一个 AP 位点* 的 34 bp 寡核苷酸双链所需要的酶量。

    * AP 位点创建方法：37℃ 条件下，用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）处理 20 pmol 含一个尿嘧啶碱基的 34 bp 寡核苷酸双链 2 分钟。

    反应条件

    1X NEBuffer™ 4
    Incubate at 37°C

    1X NEBuffer™ 4
    50 mM Potassium Acetate
    20 mM Tris-acetate
    10 mM Magnesium Acetate
    1 mM DTT
    (pH 7.9 @ 25°C)

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    50 mM NaCl
    1 mM DTT
    0.05 mM EDTA
    200 µg/ml BSA
    50% Glycerol
    pH 8 @ 25°C

    热失活

    65°C for 20 minutes

    单位活性检测条件

    10 μl 总反应体系，含 1X NEBuffer 4 和 20 pmol 荧光标记寡核苷酸双链。

  • 优势和特性

    应用特性

    • 单细胞凝胶电泳（彗星试验）
    • 碱洗脱
    • 碱解旋
    • 经修饰的切刻平移

  • 相关产品

    相关产品

    • t1010-monarch-plasmid-miniprep-kit
    • Monarch® DNA 胶回收试剂盒
    • Monarch® PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）

    单独销售的组分

    • NEBuffer 4

  • 注意事项

    1. 彗星试验的推荐稀释倍数：1:103。具体操作说明请登陆：http://cometassay.com
    2. APE 1 在 NEBuffer 1-3 中的活性为 50%。（NEB #B7001、NEB #B7002、NEB #B7003）

  • 参考文献

    1. Robson, C.N. and Hickson, D.I. (1991). Nucl. Acids Res.. 19, 5519-5523.
    2. Flaherty, D.M. (2001). Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol.. 25, 664-667.
    3. Demple, B. et al. (1991). Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 88, 11450-11454.
    4. Barzilay, G. et al. (1995). Nucl.Acids Res.. 23, 1544-1550.
    5. Barzilay, G. et al. (1995). NatureStruc. Biol.. 2, 451-468.
    6. Gorman, M.A. et al (1997). EMBOJ.. 16, 6548-6558.
    7. Xanthoudakis, S. et al. (1992). EMBO J.. 11, 3323-3335.
    8. Walker, L.J. et al. (1993). Mol.Cell. Biol.. 13, 5370-5376.
    9. Vidal, A.E. (2001). EMBO J.. 20, 6530-6539.
    10. Wilson, D.M. III et al. (1995). J. Biol. Chem.. 270, 16002-16007.

操作说明、说明书 & 用法

  • 使用指南

    • DNA Damage and PreCR

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Activities of DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases
    • DNA Repair Enzymes on Damaged and Non-standard Bases
    • Properties of DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is the activity of APE 1 in NEBuffers 1-4?
    2. What is the molecular weight of APE 1?
    3. Is APE 1 a tagged protein?
    4. What substrate is used to test APE 1 activity?