RecA |NEB酶试剂 New England Biolabs

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上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

对基因重组、DNA 修复和紫外诱变修复而言，大肠杆菌 RecA 不可或缺。RecA 可促进 LexA 阻遏蛋白、umuD 蛋白和 λ 阻遏蛋白自体消化。切割 LexA 能使 20 多种基因的抑制得到解除（1）。体外研究表明，在 ATP 的作用下，RecA 可促进单链 DNA 片段与同源双链 DNA 片段发生链置换。上述反应需要三步来完成：（i）RecA 在单链 DNA 上聚合，（ii）核蛋白丝结合双链 DNA 并寻找同源区域，（iii）链置换（2）。

产品类别:
ssDNA Binding Proteins Products,
DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases Products

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0249S     -20    
        RecA M0249SVIAL -20 1 x 0.1 ml 2 mg/ml
        Rec A Reaction Buffer B0355SVIAL -20 1 x 1 ml 10 X
    • M0249L     -20    
        RecA M0249LVIAL -20 1 x 0.5 ml 2 mg/ml
        Rec A Reaction Buffer B0355SVIAL -20 1 x 1 ml 10 X

  • 特性和用法

    反应条件

    1X RecA 反应缓冲液
    Incubate at 37°C

    1X RecA 反应缓冲液
    70 mM Tris-HCl
    10 mM MgCl2
    5 mM DTT
    (pH 7.6 @ 25°C)

    使用浓度

    2 mg/ml

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    0.1 mM EDTA
    1 mM DTT
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    65°C for 20 minutes

    分子量

    实际: 37973 kDa

  • 优势和特性

    应用特性

    • 用电子显微镜观察 DNA 结构（3）
    • D-loop 区突变（4）
    • 用 RecA 包被的探针进行文库筛选（5,6）
    • 在任意一个预先决定的位点切割 DNA（7,8,9）
    • RecA 介导全长 cDNA 克隆的亲合捕获（10,11）

  • 相关产品

    相关产品

    • t1010-monarch-plasmid-miniprep-kit
    • Monarch® DNA 胶回收试剂盒
    • Monarch® PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）

  • 注意事项

    1. 不提供形成三螺旋所需的 ATPγS。
    2. 热失活：65℃ 20 分钟

  • 参考文献

    1. West, S.C. (1992). Ann.Rev. Biochem.. 61, 603-640.
    2. Zhumabayeva, B. et al. (1990). Biotechniques. 27, 834-845.
    3. Zhumabayeva, B. et al. (2001). Biotechniques. 30, 512-520.
    4. Pace, C.N. et al (1995). Protein Sci. 4, 2411-2423.
    5. Radding, C.M. (1991). J. Biol.Chem.. 266, 5355-5358.
    6. Wasserman, S.A. and Cozzarelli, N.R. (1985). Proc.Natl. Acad. Sci. USA. 82, 1079-1083.
    7. Shortle, D. et al. (1980). Proc.Natl. Acad. Sci. USA. 77, 5375-5379.
    8. Honigberg, S.M. et al. (1986). Proc.Natl. Acad. Sci. USA. 83, 9586-9590.
    9. Rigas, B. et al. (1986). Proc.Natl. Acad. Sci. USA. 83, 9591-9595.
    10. Ferrin, L.J. and Camerini-Otero, R.D. (1991). Science. 254, 1494-1497.
    11. Koob, M. et al. (1992). Nucl.Acids Res.. 20, 5831-5836.
    12. Koob, M. (1992). R. Wu(Ed.), Methodsin Enzymology. 216, 321-329. San Diego: Academic Press.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Using RecA and an oligonucleotide to form a stable triple helix

  • 使用指南

    • DNA Damage and PreCR

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What buffer should be used with RecA Protein?
    2. Is magnesium required for triple strand formation using RecA Protein?
    3. Is ATP gamma-S required for triple strand formation using RecA Protein?
    4. Is the structure of the target DNA important when using RecA Protein?
    5. How much RecA Protein should be added to the single stranded DNA to coat it?
    6. What length single stranded oligo should be used with RecA Protein?

  • 实验技巧

    RecA 是一种极其稳定的蛋白，但盐会干扰三重螺旋蛋白形成，因而推荐使用低盐缓冲液（例如 50 mM NaCl）。