Tma 核酸内切酶 III |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

 

产品来源

大肠杆菌中过表达,克隆自海栖热袍菌(Thermotoga maritima)。

产品类别:
DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases Products

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分:

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0291S     -20    
        Tma Endonuclease III M0291SVIAL -20 1 x 0.05 ml 10,000 units/ml
        ThermoPol® Reaction Buffer B9004SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指在 10 µl 反应体系中,65℃ 条件下,1 小时能切割 1 pmol 含一个 AP 位点* 的 60 bp 寡核苷酸双链所需的酶量。

    * AP 位点创建方法:37℃ 条件下,用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)处理 10 pmol 含一个尿嘧啶碱基的 60 bp 寡核苷酸双链 2 分钟。

    反应条件

    1X ThermoPol® 反应缓冲液套装
    Incubate at 65°C

    1X ThermoPol® 反应缓冲液套装
    20 mM Tris-HCl
    10 mM (NH4)2SO4
    10 mM KCl
    2 mM MgSO4
    0.1% Triton® X-100
    (pH 8.8 @ 25°C)

    使用浓度

    10,000 units/ml

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    100 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    50% Glycerol
    0.1% Triton® X-100
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    单位活性检测条件

    10 µl 总反应体系,含 1X ThermoPol 反应缓冲液和 5 pmol 荧光标记寡核苷酸双链。

  • 优势和特性

    应用特性

    • 碱洗脱(3)
    • 碱解旋(4)

  • 相关产品

    单独销售的组分

    • ThermoPol® 反应缓冲液套装

  • 注意事项

    1. 将反应体系置于热循环仪中,或用矿物油覆盖,以减少蒸发。
    2. Tma 核酸内切酶 III 在 ThermoPol® II(不含 Mg2+)反应缓冲液(NEB #B9005)中的活性为 75%。
    3. Tma 核酸内切酶 III 在 NEBuffer 1(NEB #B7001)中的活性为 100%,在 NEBuffer 4(NEB #B7004)中的活性为 100%,在 NEBuffer 2(NEB #B7002)中的活性为 50%。不建议在 NEBuffer 3(NEB #B7003)中使用 Tma 核酸内切酶 III。
    4. 稀释液兼容性:稀释液 D
      100 mM KCl、10 mM Tris-HCl(pH 7.4 @ 25℃)、0.1 mM EDTA、1 mM DTT、0.1% Triton X-100 和 50% 甘油。

  • 参考文献

    1. Nelson, K.E. et al. (1999). Nature. 399,
    2. Marks, K. unpublished observation.
    3. Pflaum, M. et al. (1998). FreeRad. Res. 29,
    4. Hartwig, A. et al. (1996). Toxicol. Lett. 88,

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for Tma Endonuclease III (M0291)

  • 使用指南

    • DNA Damage and PreCR

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Activities of DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases
    • DNA Repair Enzymes on Damaged and Non-standard Bases
    • Properties of DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is the activity of Tma Endonuclease III in the NEBuffers 1-4?
    2. What is the activity of Tma Endonuclease III in ThermoPol buffer?
    3. What is the molecular weight of Tma Endonuclease III?
    4. Is Tma Endonuclease III a tagged protein?
    5. What substrate is used to test the Tma Endonuclease III activity?
    6. What types of DNA damage does Tma Endonuclease III act upon?