热稳定 FEN1 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

热稳定 Flap 核酸内切酶 1 也称 FEN1，可催化切割分叉双链 DNA 底物中的 5´ flap DNA，产生 5´ 磷酸末端。DNA 连接酶可以连接 FEN1 产物来产生双链 DNA。在体内实验中，FEN1 不仅对冈崎片段成熟通路至关重要，还能参与碱基切除修复。

大肠杆菌菌株，携带有克隆自热球菌（Thermococcus）9°N^™ 的 FEN1 基因。

本产品提供以下试剂或组分：

NEB #

名称

组分货号

储存温度

数量

浓度

M0645S

-20

	Thermostable FEN1	M0645SVIAL	-20	1 x 0.05 ml	32,000 units/ml
	ThermoPol^® Reaction Buffer	B9004SVIAL	-20	1 x 1.5 ml	10 X

特性和用法

单位定义

1 单位指在 10 µl 反应体系中，65℃ 条件下，10 分钟内切割 10 pmol 含 5´ flap 结构的寡核苷酸底物所需要的酶量。

反应条件

1X ThermoPol^® 反应缓冲液套装
Incubate at 65°C

1X ThermoPol^® 反应缓冲液套装
20 mM Tris-HCl
10 mM (NH₄)₂SO₄
10 mM KCl
2 mM MgSO₄
0.1% Triton® X-100
(pH 8.8 @ 25°C)

贮存溶液

10 mM Tris-HCl
1 mM DTT
100 mM KCl
0.1 mM EDTA
0.1% Triton® X-100
50% Glycerol
pH 7.4 @ 25°C

热失活

否

单位活性检测条件

10 µl 总反应体系，含 1X ThermoPol 反应缓冲液和 0.2 pmol 荧光标记的寡核苷酸。
优势和特性
应用特性
- 切割结构特异性 DNA
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单独销售的组分
- ThermoPol® 反应缓冲液套装
参考文献
1. Balakrishnon, L. et al. (2013). Annu. Rev. Biochem. 82, 119-138.
2. Greenough, L. et al. (2015). J. Biol. Chem. 20, 12514-12522.
3. Greenough, L. et al. (2015). Nucleic Acids Res. DOI: doi:10.1093/nar/gkv899 PubMedID: 26365239

选择指南
- Activities of DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases
- Properties of Exonucleases and Non-specific Endonucleases