拓扑异构酶 I（E. coli） |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

拓扑异构酶 I（E. coli）催化负超螺旋 DNA 的松弛。拓扑异构酶 I 也参与 DNA 螺旋化的形成和解旋（1）以及将两条互补的单链 DNA 环耦合为双链 DNA 环（2）。完整的全酶分子量为 97 kDa。

大肠杆菌菌株，携带有 topA 基因

本产品提供以下试剂或组分：

NEB #

名称

组分货号

储存温度

数量

浓度

M0301S

-20

	Topoisomerase I (E. coli)	M0301SVIAL	-20	1 x 0.02 ml	5,000 units/ml
	rCutSmart™ Buffer	B6004SVIAL	-20	1 x 1.25 ml	10 X

M0301L

-20

	Topoisomerase I (E. coli)	M0301LVIAL	-20	1 x 0.1 ml	5,000 units/ml
	rCutSmart™ Buffer	B6004SVIAL	-20	1 x 1.25 ml	10 X

特性和用法

单位定义

1 单位指在 25 μl 总反应体系中，37℃ 条件下，15 分钟内能催化超过 95% 的 0.5 μg pUC19 RF I 型（负超螺旋）DNA 松弛所需的酶量。DNA 超螺旋化通过不含溴化乙锭的琼脂糖凝胶电泳来检测。

反应条件

1X rCutSmart™ 缓冲液
Incubate at 37°C

1X rCutSmart™ 缓冲液
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
100 µg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25°C)

在不同缓冲液中的活性

NEBuffer™ 1: 25%
NEBuffer™ 2: 50%
NEBuffer™ 3: 0%
NEBuffer™ 4: 100%

贮存溶液

10 mM Tris-HCl
35 mM (NH₄)₂SO₄
50 mM KCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
50% Glycerol
pH 7.5 @ 25°C

热失活

65°C for 20 minutes
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参考文献
1. Liu, L.F., Depew, R.E. and Wang, J.C. (1976). J. Mol. Biol.. 106, 439-452.
2. Kirkegaard, K. and Wang, J.C. (1978). Nucl. Acids Res.. 5, 3811-3820.