Tte UvrD 解旋酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

Tte UvrD 解旋酶是一种修复解旋酶，该酶能使双链 DNA 解开而不需要特定的结构或突出末端，来源于腾冲嗜热厌氧菌（Thermoanaerobacter tengcongensis）。Tte UvrD 解旋酶适用于多种 DNA 底物且耐受高温（70℃）。Tte UvrD 解旋酶经证明是一种有效的添加剂，可提高等温扩增反应的特异性，特别是与 WarmStart® LAMP/RT-LAMP 试剂盒结合使用。

实验流程

Tte UvrD 解旋酶 |

Tte UvrD 解旋酶可减少 LAMP 反应中的无模板扩增

Tte UvrD 解旋酶 |

使用 WarmStart® 荧光 LAMP/RT-LAMP 试剂盒（NEB #E1700）和易于实现高水平无模板扩增的引物，进行 LAMP 反应。在没有 Tte UvrD 解旋酶（左图）的情况下，阳性反应（+DNA）扩增需约 8 分钟，而无模板对照（NTC）扩增需约 20 分钟。添加 10 ng Tte UvrD 解旋酶（右图）后，阳性反应可保持快速扩增时间，总 RFU 略有降低，而 NTC 反应被完全抑制。

产品来源

Tte UvrD 解旋酶由大肠杆菌菌株表达，携带有克隆自腾冲嗜热厌氧菌（Thermoanaerobacter tengcongensis）的 UvrD 基因。

产品类别:
PCR, qPCR & Amplification Technologies Products

应用:
Helicase-dependent Amplification,
Loop-Mediated Isothermal Amplification,
DNA Amplification, PCR & qPCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M1202S     -20    
        Tte UvrD Helicase M1202SVIAL -20 1 x 0.025 ml Not Applicable
        Isothermal Amplification Buffer Pack B0537SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X
        Adenosine 5′-Triphosphate (ATP) P0756SVIAL -20 1 x 1 ml 10 mM

  • 特性和用法

    反应条件

    1X 等温扩增缓冲液套装
    Supplement with 1 mM ATP
    Incubate at 65°C

    1X 等温扩增缓冲液套装
    20 mM Tris-HCl
    10 mM (NH4)2SO4
    50 mM KCl
    2 mM MgSO4
    0.1% Tween® 20
    (pH 8.8 @ 25°C)

    使用浓度

    0.2 – 0.4 ng/μl

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    100 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    0.1% Triton® X-100
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    80°C for 5 minutes

  • 参考文献

    1. An, L., Tang, W., Ranalli, T.A., Kim, H.J., Wytiaz, J., and Kong, H. (2005). Characterization of a thermostable UvrD helicase and its participation in helicase-dependent amplification. J Biol Chem. 280 (32), 28952-8. PubMedID: 15955821
    2. Mauris, J., and Evans, T.C. Jr. (2010). A human PMS2 homologue from Aquifex aeolicus stimulates an ATP-dependent DNA helicase. J Biol Chem. 285 (15), 11087-92. PubMedID: 20129926
    3. Vincent, M., Xu, Y., and Kong, H. (2004). Helicase-dependent isothermal DNA amplification. EMBO Rep. 5 (8), 795-800. PubMedID: 15247927

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for LAMP Reactions with Tte UvrD Helicase (#M1202)
    2. Protocol for unwinding double stranded DNA with Tte UvrD Helicase (#M1202)

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Does Tte UvrD Helicase (NEB #M1202) require any specific DNA structure for unwinding?
    2. How do I use Tte UvrD Helicase for reducing non-template amplification in LAMP reactions?
    3. Is Tte UvrD Helicase compatible with the WarmStart Colorimetric LAMP 2X Master Mix (NEB #M1800)?
    4. Do I need to add ATP for Tte UvrD Helicase activity?
    5. Is Tte UvrD Helicase active in other buffers?
    6. Can I purchase large amounts of an existing Enzyme for Innovation?
    7. What are Enzymes for Innovation?