OneTaq® 热启动 2X 预混液(提供标准缓冲液) |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

OneTaq® 热启动 2X 预混液(提供标准缓冲液)是经过优化的与核酸适配体抑制剂耦连的 Taq 和 Deep Vent® DNA 聚合酶混合物。此酶混合物非常适合多种模板中的常规 PCR 应用,包括纯 DNA 溶液、细菌菌落和 cDNA 产物。Deep Vent DNA 聚合酶的 3´→5´ 核酸外切酶活性提升了 Taq DNA 聚合酶(1)的保真性和聚合能力。该酶具有热启动特性,不仅方便使用,还能够减少引物二聚体和副产物对反应的干扰。这款便捷的预混液剂型含有 dNTP、MgCl2 以及下列缓冲液组分和稳定剂,仅需加入引物和 DNA 模板,即可稳健扩增。

OneTaq 产品与其它市售聚合酶的比较

OneTaq® 热启动 2X 预混液(提供标准缓冲液) | 

对一系列高 GC 含量的人类基因组 DNA 靶标进行扩增,展示 OneTaq 的优异性能。所有聚合酶均根据制造商使用建议进行循环扩增,包括使用添加剂来增强高 GC 含量的靶标扩增。在 Perkin Elmer LabChip® 上对反应产物的产量(点大小)和纯度(颜色)进行量化。深绿色大圆点代表最高的产量与纯度。

OneTaq® 热启动 2X 预混液(提供标准缓冲液) |

产品来源

大肠杆菌菌株,携带有克隆自水生嗜热菌(Thermus aquaticus)YT-1 的 Taq DNA 聚合酶基因;大肠杆菌菌株,携带有克隆自 Pyrococcus GB-D 的 Deep Vent® DNA 聚合酶基因。

产品类别:
OneTaq® DNA Polymerases Products,
Master Mixes Products,
Taq DNA Polymerase Products

应用:
Hot Start PCR,
Fast PCR,
Multiplex PCR,

Specialty PCR,
Routine PCR,

PCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分:

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0484S     -20    
        OneTaq® Hot Start 2X Master Mix with Standard Buffer M0484SVIAL -20 2 x 1.25 ml 2 X
    • M0484L     -20    
        OneTaq® Hot Start 2X Master Mix with Standard Buffer M0484SVIAL -20 10 x 1.25 ml 2 X

  • 特性和用法

    1X 预混液组分

    20 mM Tris-HCl
    22 mM KCl
    22 mM NH4Cl
    1.8 mM MgCl2
    5% Glycerol
    0.06% IGEPAL® CA-630
    0.05% Tween® 20
    0.2 mM dNTPs
    25 units/ml OneTaq Hot Start DNA Polymerase
    pH 8.9 @ 25°C

    热失活

    单位活性检测条件

    1X ThermoPol® 反应缓冲液、200 μM dNTP(含 [3H]-dTTP)和 15 nM 已结合引物的 M13 DNA。

  • 优势和特性

    应用特性

    • 高通量 PCR
    • 高灵敏度 PCR
    • 常规 PCR
    • 高 AT PCR
    • 菌落 PCR
    • 长片段 PCR(基因组片段可扩增至 6 kb)

  • 相关产品

    相关产品

    • MgCl2 溶液
    • OneTaq® DNA 聚合酶
    • OneTaq® 热启动 2X 预混液(提供 GC 缓冲液)
    • OneTaq® 热启动 DNA 聚合酶
    • OneTaq® Quick-Load® 2X 预混液(提供标准缓冲液)
    • OneTaq® 热启动 Quick-Load® 2X 预混液(提供 GC 缓冲液)
    • OneTaq® 2X 预混液(提供标准缓冲液)

  • 注意事项

    1. Product specifications for individual components in the OneTaq Hot Start 2X Master Mix with Standard Buffer are available separately.
    2. OneTaq Hot Start 2X Master Mix with Standard Buffer is stable for fifteen freeze-thaw cycles when stored at -20°C.
    3. OneTaq Hot Start 2X Master Mix with Standard Buffer is also stable for one month at 4°C, so for frequent use, an aliquot may be kept at 4°C.

  • 参考文献

    1. Barnes, W.M (1994). Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 91, 2216-2220.
    2. Saiki, R.K. et al. (1994). Science. 91, 2216-2220.
    3. Powell, L.M. et al. (1987). Cell. 50, 831-840.
    4. Sun, Y, Hegamyer, G. and Colburn, N. (1993). Biotechniques. 15, 372-374.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for OneTaq® Hot Start 2X Master Mix with Standard Buffer (M0484)

  • 使用指南

    • Activity of Restriction Enzymes in PCR Buffers
    • Guidelines for PCR Optimization with OneTaq® and OneTaq® Hot Start DNA Polymerases
    • Guidelines for PCR Optimization with Thermophilic DNA Polymerases

  • 应用实例

    • Robust Colony PCR from Multiple E. coli Strains using OneTaq® Quick-Load® Master Mixes

工具 & 资源

  • 选择指南

    • DNA Polymerase Selection Chart
    • Thermophilic DNA Polymerases

  • Web 工具

    • Tm Calculator

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What ends will my PCR products have?
    2. What are Hot Start and WarmStart® polymerases and when would I use them?
    3. How should I determine the appropriate annealing temperature for my reaction?
    4. What should the final primer concentration be in my PCR?
    5. What are the properties of this polymerase (fidelity, product ends, max amplicon, modified base incorporation, etc.)?
    6. What are the stability and storage requirements for NEB’s Taq and OneTaq DNA Polymerases?
    7. Can Taq/OneTaq® DNA Polymerases be used for nick translation?
    8. How can I optimize my PCR when using Taq DNA Polymerase?

  • 问题解决指南

    • PCR Troubleshooting Guide

  • 实验技巧

    尝试使用含 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶的预混液,以实现高特异性、高灵敏度的 PCR 扩增。