OneTaq® 热启动 Quick-Load® 2X 预混液（提供 GC 缓冲液） |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

OneTaq® 热启动 Quick-Load® 2X 预混液（提供 GC 缓冲液）是经过优化的 Taq 和 Deep Vent® DNA 聚合酶即用型混合物，同时含有核酸适配体抑制剂。此酶混合物非常适合富含 GC 的模板中的 PCR 应用，包括纯 DNA 溶液、细菌菌落和 cDNA 产物。Deep Vent DNA 聚合酶的 3´→5´ 核酸外切酶活性提升了 Taq DNA 聚合酶（1）的保真性和聚合能力。该酶具有热启动特性，不仅方便使用，还能够减少引物二聚体和副产物对反应的干扰。这款便捷的预混液剂型含有 dNTP、MgSO4、缓冲液组分和稳定剂，以及两种常用的 DNA 凝胶示踪染料。在 1X TBE 的 1% 琼脂糖凝胶上，二甲苯蓝 FF 的迁移条带在大约 4 kb 处，柠檬黄的迁移条带在大约 10 bp 处。两种染料的浓度设置使其不会掩盖共迁移的 DNA 条带。

OneTaq 产品与其它市售聚合酶的比较

OneTaq® 热启动 Quick-Load® 2X 预混液（提供 GC 缓冲液） | 

对一系列高 GC 含量的人类基因组 DNA 靶标进行扩增，展示 OneTaq 的优异性能。所有聚合酶均根据制造商使用建议进行循环扩增，包括使用添加剂来增强高 GC 含量的靶标扩增。在 Perkin Elmer LabChip® 上对反应产物的产量（点大小）和纯度（颜色）进行量化。深绿色大圆点代表最高的产量与纯度。

OneTaq® 热启动 Quick-Load® 2X 预混液（提供 GC 缓冲液） |

重点

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自水生嗜热菌（Thermus aquaticus）YT-1 的 Taq DNA 聚合酶基因；大肠杆菌菌株，携带有克隆自 Pyrococcus GB-D 的 Deep Vent® DNA 聚合酶基因。

产品类别:
OneTaq® DNA Polymerases Products,
Master Mixes Products,
Taq DNA Polymerase Products

应用:
Hot Start PCR,
Multiplex PCR,
Specialty PCR,

Routine PCR,

PCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0489S     -20    
        OneTaq® Hot Start Quick-Load® 2X Master Mix with GC Buffer M0489SVIAL -20 2 x 1.25 ml 2 X
        OneTaq® High GC Enhancer B9026AVIAL -20 1 x 2 ml Not Applicable
    • M0489L     -20    
        OneTaq® Hot Start Quick-Load® 2X Master Mix with GC Buffer M0489SVIAL -20 10 x 1.25 ml 2 X
        OneTaq® High GC Enhancer B9026AVIAL -20 3 x 2 ml Not Applicable

  • 特性和用法

    1X 预混液组分

    80 mM Tris-SO4
    1X Tartrazine
    25 units/ml OneTaq Hot Start DNA Polymerase
    20 mM (NH4)2SO4
    0.2 mM dNTPs
    2 mM MgSO4
    5% Glycerol
    5% DMSO
    0.06% IGEPAL® CA-630
    0.05% Tween® 20
    1X Xylene Cyanol
    pH 9.2 @ 25°C

    热失活

    否

    单位活性检测条件

    1X ThermoPol® 反应缓冲液、200 µM dNTP（含 [3H]-dTTP）和 15 nM 已结合引物的 M13 DNA。

    单位定义：
    1 单位是指在 75℃ 条件下，30 分钟能使 15 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶物所需的酶量。

    反应条件：
    OneTaq 热启动 Quick-Load 1X 预混液（提供 GC 缓冲液）、DNA 模板和引物，总反应体积为 50 µl。

  • 优势和特性

    应用特性

    • 高 GC PCR
    • 高灵敏度 PCR
    • 高通量 PCR
    • 菌落 PCR
    • 长片段 PCR（基因组片段可扩增至 6 kb）

  • 相关产品

    相关产品

    • Magnesium Sulfate (MgSO4) Solution
    • OneTaq® DNA 聚合酶
    • OneTaq® 热启动 2X 预混液（提供 GC 缓冲液）
    • OneTaq® 热启动 2X 预混液（提供标准缓冲液）
    • OneTaq® 热启动 DNA 聚合酶
    • OneTaq® 热启动 Quick-Load® 2X 预混液（提供标准缓冲液）

  • 注意事项

    1. Product specifications for individual components in the OneTaq Hot Start Quick-Load 2X Master Mix with GC Buffer are available separately.
    2. OneTaq Hot Start Quick-Load 2X Master Mix with GC Buffer is stable for fifteen freeze-thaw cycles when stored at -20°C.
    3. OneTaq Hot Start Quick-Load 2X Master Mix with GC Buffer is also stable for one month at 4°C, so for frequent use, an aliquot may be kept at 4°C.

  • 参考文献

    1. Barnes, W.M. (1994). Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 91, 2216-2220.
    2. Saiki R.K. et al. (1985). Science. 230, 1350-1354.
    3. Powell, L.M. et al. (1987). Cell. 50, 831-840.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for OneTaq® Hot Start Quick-Load® 2X Master Mix with GC Buffer
    2. Guidelines for PCR Optimization with OneTaq® and OneTaq® Hot Start DNA Polymerases

  • 使用指南

    • Activity of Restriction Enzymes in PCR Buffers
    • Guidelines for PCR Optimization with OneTaq® and OneTaq® Hot Start DNA Polymerases

  • 应用实例

    • Robust Colony PCR from Multiple E. coli Strains using OneTaq® Quick-Load® Master Mixes

工具 & 资源

  • Web 工具

    • Tm Calculator

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What ends will my PCR products have?
    2. What are Hot Start and WarmStart® polymerases and when would I use them?
    3. How should I determine the appropriate annealing temperature for my reaction?
    4. What should the final primer concentration be in my PCR?
    5. What are the properties of this polymerase (fidelity, product ends, max amplicon, modified base incorporation, etc.)?
    6. What are the stability and storage requirements for NEB’s Taq and OneTaq DNA Polymerases?
    7. Can Taq/OneTaq® DNA Polymerases be used for nick translation?
    8. How can I optimize my PCR when using Taq DNA Polymerase?

  • 实验技巧

    预混液随附凝胶上样染料，符合省时酶标准！该预混液不仅有助于轻松建立反应体系，还随附凝胶上样染料，可让您更快获得 PCR 结果。