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产品信息
LongAmp® Taq 2X 预混液是将高质量的 NEB 重组 Taq DNA 聚合酶结合微量的 Deep Vent® DNA 聚合酶而产生的。Deep Vent DNA 聚合酶的 3´→5´ 核酸外切酶活性提高了 Taq DNA 聚合酶的保真度和扩增性能(1)。这种即用型预混液的保真度是单独使用 Taq DNA 聚合酶的两倍。可扩增产生范围广泛的 PCR 产物,包括长达 30 kb 的 Lambda DNA 或人基因组 DNA。

产品来源
大肠杆菌菌株,携带有克隆自水生嗜热菌(Thermus aquaticus)YT-1 的 Taq DNA 聚合酶基因;大肠杆菌菌株,携带有克隆自 Pyrococcus GB-D 的 Deep Vent® DNA 聚合酶基因。
- 产品类别:
- LongAmp® DNA Polymerases Products,
- Master Mixes Products
- 应用:
- Long Range PCR,
- Specialty PCR,
- Routine PCR,
PCR
-
产品组分信息
本产品提供以下试剂或组分:
NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度 -
M0287S -20 LongAmp® Taq 2X Master Mix M0287SVIAL -20 2 x 1.25 ml 2 X
-
M0287L -20 LongAmp® Taq 2X Master Mix M0287SVIAL -20 10 x 1.25 ml 2 X
-
-
特性和用法
1X 预混液组分
60 mM Tris-SO4
20 mM (NH4)2SO4
2 mM MgSO4
0.3 mM dNTPs
3% Glycerol
0.06% IGEPAL® CA-630
0.05% Tween® 20
125 units/ml LongAmp Taq DNA Polymerase
pH 9.1 @ 25°C热失活
否
5′ – 3′ 核酸外切酶
Yes
3′ – 5′ 核酸外切酶
Yes
链置换
+
单位活性检测条件
1X ThermoPol® 反应缓冲液、200 µM dNTP(含 [3H]-dTTP)和 15 nM 已结合引物的 M13 DNA。
反应条件:
1X LongAmp Taq 预混液、DNA 模板和引物,总反应体积为 25 –50 µl。单位定义:
1 单位是指在 75℃ 条件下,30 分钟能使 10 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶物所需的酶量。 -
优势和特性
应用特性
- 长片段 PCR
- 高通量 PCR
- 菌落 PCR
-
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- LongAmp® 热启动 Taq 2X 预混液
- LongAmp® 热启动 Taq DNA 聚合酶
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注意事项
- 当 -20℃ 储存时,LongAmp Taq 2X 预混液反复冻融 15 次仍保持稳定。
- LongAmp Taq 2X 预混液在 4℃ 下可稳定储存三个月。因此,为了便于频繁使用,可分装储存在 4℃ 条件下。
-
参考文献
- Barnes, W. M. (1994). Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 91, 2216-2220.
- Saiki R. K. et al. (1985). Science. 230, 1350-1354.
- Powell, L. M. et al. (1987). Cell. 50, 831-840.
- Sun, Y., Hegamyer, G. and Colburn, N. (1993). Biotechniques. 15, 372-374.
- Sarkar, G., Kapelner, S. and Sommer, S. S. (1990). Nucleic Acids Res. 18, 7465.
操作说明、说明书 & 用法
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操作说明
- Protocol for LongAmp™ Taq 2X Master Mix
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使用指南
- Activity of Restriction Enzymes in PCR Buffers
- Guidelines for PCR Optimization with Taq DNA Polymerase
- Guidelines for PCR Optimization with Thermophilic DNA Polymerases
工具 & 资源
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选择指南
- DNA Polymerase Selection Chart
- Thermophilic DNA Polymerases
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Web 工具
- Tm Calculator
FAQs & 问题解决指南
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FAQs
- Is Monarch-purified gDNA suitable for long-range PCR?
- What ends will my PCR products have?
- How should I determine the appropriate annealing temperature for my reaction?
- What are the properties of this polymerase (fidelity, product ends, max amplicon, modified base incorporation, etc.)?
- My results are not as expected. Where can I find troubleshooting help?
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问题解决指南
- PCR Troubleshooting Guide
- Taq PCR Kit Troubleshooting Guide
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实验技巧
- 建议 LongAmp Taq 反应的延伸温度为 65℃。