上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
产品信息
产品来源
昆虫细胞(Sf21),感染了含有 AMV pol 基因的杆状病毒(baculovirus)。
- 产品类别:
- RT-PCR Products,
- cDNA Synthesis & Reverse Transcriptases Products
- 应用:
- Transcription-Mediated and NASBA Amplification,
- cDNA Synthesis,
- Reverse Transcription (cDNA Synthesis),
- RT-PCR & cDNA Synthesis,
PCR
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产品组分信息
本产品提供以下试剂或组分:
NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度 -
M0277S -20 AMV Reverse Transcriptase M0277SVIAL -20 1 x 0.02 ml 10,000 units/ml AMV Reverse Transcriptase Reaction Buffer B0277AVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X
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M0277L -20 AMV Reverse Transcriptase M0277LVIAL -20 1 x 0.1 ml 10,000 units/ml AMV Reverse Transcriptase Reaction Buffer B0277AVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X
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特性和用法
单位定义
1 单位指以 poly(rA)-oligo(dT) 为模板和引物,37℃ 条件下,10 分钟内催化 1 nmol 的 dTTP 掺入酸不溶物中所需的酶量。
反应条件
1X AMV 反转录酶反应缓冲液
Incubate at 42°C1X AMV 反转录酶反应缓冲液
50 mM Tris-acetate
75 mM Potassium Acetate
8 mM Magnesium Acetate
10 mM DTT
(pH 8.3 @ 25°C)贮存溶液
200 mM potassium phosphate
2 mM DTT
50% Glycerol
0.2% Triton® X-100
pH 7.2 @ 25°C热失活
85°C for 5 minutes
单位活性检测条件
75 mM 醋酸钾、50 mM Tris-HCl(pH 8.3)、8 mM 醋酸镁、0.5 mM [3H]-dTTP、0.2 mM poly(rA)•oligo(dT)12–18 和 10 mM DTT。
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优势和特性
应用特性
- cDNA 合成
- RNA 测序
- RT-PCR
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注意事项
- 反应条件:37℃-52℃ 温育。
- cDNA 转录产物的产量和长度随反转录酶量的增加而增加。
- 贮存条件:解冻后应贮存于 -20℃。反复冻融会使酶失活。分装形式可在 -70℃ 贮存较长时间。
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参考文献
- Krug, M.S. et al. (1987). Meth.Enzymol. 152,
- Sambrook.J., Fritsch, E.F. and Maniatis, T. (1989). Molecular Cloning: A LaboratoryManual. (2nd ed.), 8-64. Cold Spring Harbor Laboratory Press.
- Kacian, D.L. (1977). Meth.Virol.. 6, 143.
操作说明、说明书 & 用法
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操作说明
- First Strand cDNA Synthesis (Quick Protocol) (NEB #M0277)
- First Strand cDNA Synthesis (Standard Protocol) (NEB #M0277)
- First Strand cDNA Synthesis (No-RT Negative Control Reaction) (NEB #M0277)
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使用指南
- cDNA/Reverse Transcriptase Tips
工具 & 资源
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选择指南
- DNA Polymerase Selection Chart