AMV 反转录酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

禽骨髓母细胞瘤病毒(AMV)反转录酶是一种 RNA 介导的 DNA 聚合酶。该酶能以 RNA(合成 cDNA)或单链 DNA 为模板,由引物起始合成一条互补的 DNA 链(1-3)。

产品来源

昆虫细胞(Sf21),感染了含有 AMV pol 基因的杆状病毒(baculovirus)。

产品类别:
RT-PCR Products,
cDNA Synthesis & Reverse Transcriptases Products

应用:
Transcription-Mediated and NASBA Amplification,
cDNA Synthesis,
Reverse Transcription (cDNA Synthesis),

RT-PCR & cDNA Synthesis,

PCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分:

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0277S     -20    
        AMV Reverse Transcriptase M0277SVIAL -20 1 x 0.02 ml 10,000 units/ml
        AMV Reverse Transcriptase Reaction Buffer B0277AVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X
    • M0277L     -20    
        AMV Reverse Transcriptase M0277LVIAL -20 1 x 0.1 ml 10,000 units/ml
        AMV Reverse Transcriptase Reaction Buffer B0277AVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指以 poly(rA)-oligo(dT) 为模板和引物,37℃ 条件下,10 分钟内催化 1 nmol 的 dTTP 掺入酸不溶物中所需的酶量。

    反应条件

    1X AMV 反转录酶反应缓冲液
    Incubate at 42°C

    1X AMV 反转录酶反应缓冲液
    50 mM Tris-acetate
    75 mM Potassium Acetate
    8 mM Magnesium Acetate
    10 mM DTT
    (pH 8.3 @ 25°C)

    贮存溶液

    200 mM potassium phosphate
    2 mM DTT
    50% Glycerol
    0.2% Triton® X-100
    pH 7.2 @ 25°C

    热失活

    85°C for 5 minutes

    单位活性检测条件

    75 mM 醋酸钾、50 mM Tris-HCl(pH 8.3)、8 mM 醋酸镁、0.5 mM [3H]-dTTP、0.2 mM poly(rA)•oligo(dT)12–18 和 10 mM DTT。

  • 优势和特性

    应用特性

    • cDNA 合成
    • RNA 测序
    • RT-PCR

  • 相关产品

    相关产品

    • 小鼠 RNase 抑制剂
    • NEBNext® Ultra II RNA 非链特异性第二链合成模块

  • 注意事项

    1. 反应条件:37℃-52℃ 温育。
    2. cDNA 转录产物的产量和长度随反转录酶量的增加而增加。
    3. 贮存条件:解冻后应贮存于 -20℃。反复冻融会使酶失活。分装形式可在 -70℃ 贮存较长时间。

  • 参考文献

    1. Krug, M.S. et al. (1987). Meth.Enzymol. 152,
    2. Sambrook.J., Fritsch, E.F. and Maniatis, T. (1989). Molecular Cloning: A LaboratoryManual. (2nd ed.), 8-64. Cold Spring Harbor Laboratory Press.
    3. Kacian, D.L. (1977). Meth.Virol.. 6, 143.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. First Strand cDNA Synthesis (Quick Protocol) (NEB #M0277)
    2. First Strand cDNA Synthesis (Standard Protocol) (NEB #M0277)
    3. First Strand cDNA Synthesis (No-RT Negative Control Reaction) (NEB #M0277)

  • 使用指南

    • cDNA/Reverse Transcriptase Tips

工具 & 资源

  • 选择指南

    • DNA Polymerase Selection Chart